非洲猪瘟病毒细胞传代致弱株研究进展 被引量：8

1

作者 戈胜强 张潇月 +7 位作者 吕艳 王振忠 韩乃君 张永强 钱莺娟 蔡玉梅 吴晓东 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2021年第6期76-81,共6页

目前非洲猪瘟(African swine fever,ASF)仍无疫苗可用,使得该病防控难度较高。早期非洲猪瘟病毒(ASFV)的弱毒株研制主要通过细胞传代方式。经过国外多年研究积累,现已经在多种细胞上获得毒力致弱毒株。细胞传代致弱株是ASF疫苗研究的候... 目前非洲猪瘟(African swine fever,ASF)仍无疫苗可用,使得该病防控难度较高。早期非洲猪瘟病毒(ASFV)的弱毒株研制主要通过细胞传代方式。经过国外多年研究积累,现已经在多种细胞上获得毒力致弱毒株。细胞传代致弱株是ASF疫苗研究的候选方向之一,且对于基因敲除弱毒疫苗研究具有很好的指导借鉴作用。国内目前尚无这方面的调查研究,为此对国际上ASFV细胞传代致弱毒株相关研究进行整理,分析其传代致弱规律,以期为我国ASFV细胞适应株研究及新型疫苗研制提供参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 细胞传代 弱毒株

在线阅读 下载PDF 职称材料

接种猪瘟兔化弱毒株的永生化猪血管内皮细胞传代情况研究

2

作者 谭晓妮 张彦明 +1 位作者 张旭 邓力 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期11-15,共5页

在传至70代的永生化猪血管内皮细胞接种猪瘟兔化弱毒,72 h后收取细胞上清液并对处理的细胞进行传代培养,分别检测第70、75、80、90、100、105代接毒细胞中病毒,观察各代细胞的生长情况。结果表明,接种猪瘟兔化弱毒后20代(第90代永生化... 在传至70代的永生化猪血管内皮细胞接种猪瘟兔化弱毒,72 h后收取细胞上清液并对处理的细胞进行传代培养,分别检测第70、75、80、90、100、105代接毒细胞中病毒,观察各代细胞的生长情况。结果表明,接种猪瘟兔化弱毒后20代(第90代永生化猪血管内皮细胞)的细胞与正常的形态相似,但传至接毒后35代(第105代永生化猪血管内皮细胞)时,细胞稍有拉长现象。各代次细胞中都有猪瘟兔化弱毒的检出。本研究为永生化猪血管内皮细胞生产猪瘟兔化弱毒疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 猪瘟兔化弱毒株(HCLV) 永生化猪血管内皮细胞 形态变化 细胞传代

在线阅读 下载PDF 职称材料

庐山霉素在细胞传代培养中的应用试验

3

作者 王玉智 李子峰 汪文珍 《中国兽药杂志》 北大核心 1991年第1期29-30,共2页

细胞培养中的霉菌污染是一个普遍性问题。特别是工厂化用传代细胞系大转瓶培养细胞制造疫苗,由于生产量大、操作繁杂、连续传代、加之大批量牛血清和其它多种培养液中的隐性霉菌污染以及生产环境等诸多因素的影响,造成细胞霉菌污染情况... 细胞培养中的霉菌污染是一个普遍性问题。特别是工厂化用传代细胞系大转瓶培养细胞制造疫苗,由于生产量大、操作繁杂、连续传代、加之大批量牛血清和其它多种培养液中的隐性霉菌污染以及生产环境等诸多因素的影响,造成细胞霉菌污染情况十分严重。国产庐山霉素具有强大的抗霉菌作用, 展开更多

关键词 庐山霉素 细胞传代培育 应用 试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

非洲绿猴肾细胞传代培养中细胞消化液的优化试验

4

作者 吉有红 闫爽 张秀英 《养殖技术顾问》 2013年第2期195-196,共2页

通过比较0.25%胰蛋白酶和改良的细胞消化液(0.02%EDTA-0.25%胰蛋白酶)对非洲绿猴肾(Vero)传代细胞系的消化分散效果,确定最适合实际生产需要的细胞消化液。结果表明,用改良的细胞消化液消化Vero传代细胞系,消化时间短,消化效果好,优于0.... 通过比较0.25%胰蛋白酶和改良的细胞消化液(0.02%EDTA-0.25%胰蛋白酶)对非洲绿猴肾(Vero)传代细胞系的消化分散效果,确定最适合实际生产需要的细胞消化液。结果表明,用改良的细胞消化液消化Vero传代细胞系,消化时间短,消化效果好,优于0.25%胰蛋白酶的消化效果。 展开更多

关键词 非洲绿猴肾传代细胞系 细胞消化液 细胞传代

在线阅读 下载PDF 职称材料

麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的犬肾传代细胞凋亡的影响 被引量：24

5

作者 卢芳国 何迎春 +5 位作者 肖子曾 伍参荣 张薇 申可佳 周兴 周意香 《医学研究生学报》 CAS 2009年第2期185-188,共4页

目的:探讨麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的犬肾传代(MDCK)细胞凋亡的影响。方法:运用原位末端标记技术和流式细胞术分别检测最大无毒限量的麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的MDCK细胞凋亡百分率与细胞周期变化的影响。结果:麻杏石甘汤能显... 目的:探讨麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的犬肾传代(MDCK)细胞凋亡的影响。方法:运用原位末端标记技术和流式细胞术分别检测最大无毒限量的麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的MDCK细胞凋亡百分率与细胞周期变化的影响。结果:麻杏石甘汤能显著降低A型流感病毒感染的MDCK细胞的凋亡百分率,下调其G1/G0期细胞比例,上调其S期、G2/M期细胞比例以及细胞增殖指数(PI)值。结论:麻杏石甘汤通过调整流感病毒感染的MDCK细胞的细胞周期,降低细胞凋亡百分率而发挥抗流感病毒作用。 展开更多

关键词 麻杏石甘汤 流感病毒 犬肾传代细胞 细胞凋亡 细胞周期

在线阅读 下载PDF 职称材料

用MDBK传代细胞繁殖BVDV毒株的研究 被引量：13

6

作者 王树成 林建辉 +1 位作者 刘宏 董志珍 《中国动物检疫》 CAS 1995年第4期6-8,共3页

关键词 牛病 病毒性腹泻 病毒 MDBK 传代细胞繁殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

灭活病毒诱导牙鲆传代细胞差减cDNA文库的构建及分析 被引量：2

7

作者 杜昌升 张奇亚 +2 位作者 董彩文 苗大利 桂建芳 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期79-82,共4页

以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA.经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑... 以灭活大鳞鲆弹状病毒诱导的牙鲆(Paralichthys olivaceus)传代细胞作为检测子(tester),正常对照细胞作为驱赶子(driver),分别提取mRNA,逆转录合成双链cDNA.经两轮差减杂交,两轮抑制性PCR扩增后,取正向差减的PCR产物与T载体连接,构建抑制差减cDNA文库,随机挑取7400余个克隆,对其中4200多个克隆进行PCR扩增鉴定,发现近4000个克隆中均含有插入片段,大小在250～1000bps之间,进一步对含有插入片段的近4000个克隆进行了斑点杂交筛选,得到近668个可能含有抗病毒或与免疫相关的阳性克隆.初步的结果表明所建立的差减cDNA文库适合进一步克隆鱼类抗病毒相关新基因. 展开更多

关键词 灭活病毒 诱导 克隆 cDNA文库 抗病毒 传代细胞 免疫相关 牙鲆 差减杂交 PCR扩增

在线阅读 下载PDF 职称材料

四种动物传代细胞染色体遗传变异率分析 被引量：1

8

作者 李六金 李秦 +5 位作者 施新猷 张海 赵世君 师长宏 金昌德 胡春雷 《动物医学进展》 CSCD 2000年第2期63-65,共3页

本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二... 本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二倍体细胞系 ,染色体众数为 30 ;Vero是超二倍体细胞系 ,染色体众数为 73～ 75 ;MDCK属于亚四倍体细胞系 ,染色体众数为 12 5～135。BHK2 1为亚二倍体或亚四倍体细胞系 ,亚二倍体众数为 42 ,亚四倍体细胞众数为 72～ 74。四种细胞系的染色体畸变率为 0 %～6 %,均较低。结论是四种传代细胞遗传学特性相对稳定 ,各代次之间无本质差异 。 展开更多

关键词 传代细胞 染色体 变异率 疫苗 核型分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用电镜技术快速检测传代细胞中的污染因子——传代细胞污染细菌的快速检测 被引量：1

9

作者 李六金 姜焕宏 +4 位作者 李成 吴钟灵 胡淑贤 张海 刘建荣 《中国兽药杂志》 2001年第3期10-12,共3页

应用电镜技术检测传代细胞中的细菌污染 ,即快速又准确。根据细菌的形态及其鞭毛、噬菌体等指标的其中一项均可以判定细菌的污染 。

关键词 细菌污染 传代细胞 电镜技术 快速检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

六种传代细胞系的致瘤性研究 被引量：1

10

作者 王磊 杨承槐 +1 位作者 王团结 刘莹 《中国兽药杂志》 2020年第8期66-72,共7页

为分析6种传代细胞系对裸鼠致瘤性的影响,将80只裸鼠随机分为8组,每组10只。处理组分为MDBK细胞组、OA3.Ts细胞组、Marc-145细胞组、McCoy细胞组、PK-15细胞组、ST细胞组,每种细胞培养物颈背部皮下注射10只裸鼠。阳性对照组BHK-21细胞... 为分析6种传代细胞系对裸鼠致瘤性的影响,将80只裸鼠随机分为8组,每组10只。处理组分为MDBK细胞组、OA3.Ts细胞组、Marc-145细胞组、McCoy细胞组、PK-15细胞组、ST细胞组,每种细胞培养物颈背部皮下注射10只裸鼠。阳性对照组BHK-21细胞培养物和阴性对照组鸡胚成纤维细胞培养物各注射10只裸鼠。在饲养5周和12周后对裸鼠剖检并进行病理组织学检测。结果发现,阳性对照BHK-21细胞组、McCoy细胞组、PK-15细胞组和Marc-145细胞组接种裸鼠后5周注射部位均形成肿块。对各处理组采集的肿块进行病理组织学检测,结果均为鳞状细胞癌细胞。对阳性对照BHK-21细胞组的一只裸鼠肺组织进行病理组织学检测发现有癌细胞的转移;阴性对照鸡胚成纤维细胞组、MDBK细胞组、OA3.Ts细胞组和ST细胞组小鼠均无肿块形成,接种后5周和12周分别进行剖检和病理组织学检测均未发现肿瘤细胞。由此可知,MDBK细胞、OA3.Ts细胞、ST细胞对裸鼠均不具有致瘤性;McCoy细胞、PK-15细胞、Marc-145细胞接种后可诱导裸鼠发生肿瘤,具有致瘤性;若使用致瘤性阳性细胞进行灭活疫苗生产时,应对灭活苗生产的工艺过程进行进一步的安全性评价。 展开更多

关键词 传代细胞系 裸鼠 致瘤性

在线阅读 下载PDF 职称材料

国内外生产用传代细胞系致瘤性检验方法的比较与分析 被引量：1

11

作者 王磊 杨承槐 刘莹 《中国兽药杂志》 2020年第12期26-30,共5页

2013年WHO生物制品标准化专家委员会发布了最新版的动物细胞基质生产生物医药产品和细胞库特性的评价建议(Recommendations for the Evaluation of Animal Cell Culture as Substrates for the Manufacture of Biological Medicinal Pro... 2013年WHO生物制品标准化专家委员会发布了最新版的动物细胞基质生产生物医药产品和细胞库特性的评价建议(Recommendations for the Evaluation of Animal Cell Culture as Substrates for the Manufacture of Biological Medicinal Products and for the Characterization,简称技术指南),该技术指南对我国药品管理机构制定关于生产用细胞库的检定与特性描述的相关技术要求具有很好的参考意义。对发布WHO技术指南及我国现行版《中华人民共和国兽药典》三部中涉及的细胞致瘤性检验相关要求进行介绍、梳理和比较,并从检验方法要求和内容的完善、体外替代方法等方面进行探讨。 展开更多

关键词 传代细胞系 致瘤性 检验方法 生物制品

在线阅读 下载PDF 职称材料

用清洗纯化法清除传代细胞系中支原体污染的方法探索 被引量：2

12

作者 丁建民 《中国兽药杂志》 2004年第10期41-42,共2页

　为了解决引进细胞系的支原体污染和细胞传代生长不稳定问题,尝试对细胞培养条件和细胞群进行优选,并建立了清洗离心结合敏感抗生素法,达到了清除支原体和稳定细胞活力的目的。

关键词 清洗纯化法 传代细胞 支原体污染 细胞活力

在线阅读 下载PDF 职称材料

同功酶分析对传代细胞种系鉴定

13

作者 刘桂芳 张瑞婷 《中国兽药杂志》 北大核心 1991年第2期28-31,共4页

传代细胞种系鉴定可以采用多种方法,细胞核学检查、血清学试验或同功酶分析法来完成。在一些细胞试验室将此列为传代细胞质量检测的一项常规检测项目。

关键词 传代细胞 同功酶 种系

在线阅读 下载PDF 职称材料

五号病强弱毒在传代细胞上产生蚀斑的研究

14

作者 谷登峰 《新疆农业科学》 CAS CSCD 1991年第4期184-186,共3页

对五号病强弱毒在传代细胞上产生蚀斑的研究表明,强毒OK_5株大、中、小斑分别为8,5和2mm,且一般在接种后50h就能充分出斑,弱毒OM_2R_(39)株大、中、小斑分别为3.5,2和1mm,出斑时间在100h以后;用蚀斑测毒,强毒OK_5的蚀斑毒价高于弱毒OM_2... 对五号病强弱毒在传代细胞上产生蚀斑的研究表明,强毒OK_5株大、中、小斑分别为8,5和2mm,且一般在接种后50h就能充分出斑,弱毒OM_2R_(39)株大、中、小斑分别为3.5,2和1mm,出斑时间在100h以后;用蚀斑测毒,强毒OK_5的蚀斑毒价高于弱毒OM_2R_(39)3.8倍。由此证明五号病强弱病毒有遗传本质的不同。 展开更多

关键词 五号病 病毒 蚀斑 传代细胞 复浸度

在线阅读 下载PDF 职称材料

传代细胞培养节约原材料探讨

15

作者 令世鑫 沈方 《中国兽药杂志》 北大核心 1990年第1期37-38,共2页

细胞培养在兽医生物制品中广泛应用。但是从它的培养条件而言,在培养技术上有所创新和改进是很有必要的,本文主要围绕节约原材料的几个方面陈述如下。一、提高细胞种的利用率关于种子细胞的选择,经多种方珐试验可用人工同步筛选的方法培... 细胞培养在兽医生物制品中广泛应用。但是从它的培养条件而言,在培养技术上有所创新和改进是很有必要的,本文主要围绕节约原材料的几个方面陈述如下。一、提高细胞种的利用率关于种子细胞的选择,经多种方珐试验可用人工同步筛选的方法培养(见本刊1989年2期32—34)。 展开更多

关键词 传代细胞培养 细胞培养 原材料

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪瘟母源抗体对猪瘟ST传代细胞源疫苗免疫效果的影响

16

作者 章春燕 《现代农业》 2018年第8期72-73,共2页

通过近几年对朝阳地区部分养猪场和散户的猪群疫病流行病学调查发现，病死猪中因猪瘟引起直接死亡或猪瘟感染并发其他疫病引起间接死亡的病例占总死亡数的21％左右，对本地区的养猪业造成非常大经济损失。朝阳地区目前使用的猪瘟疫苗有... 通过近几年对朝阳地区部分养猪场和散户的猪群疫病流行病学调查发现，病死猪中因猪瘟引起直接死亡或猪瘟感染并发其他疫病引起间接死亡的病例占总死亡数的21％左右，对本地区的养猪业造成非常大经济损失。朝阳地区目前使用的猪瘟疫苗有猪瘟兔化弱毒脾淋苗、猪瘟兔化弱毒组织苗、猪瘟盯传代细胞源苗等，其中盯苗应用最多. 展开更多

关键词 猪瘟兔化弱毒 传代细胞 猪瘟疫苗 免疫效果 母源抗体 ST 流行病学调查 朝阳地区

在线阅读 下载PDF 职称材料

传代细胞制备流感病毒疫苗工艺研究进展 被引量：6

17

作者 吕宏亮 付秀花 郑明 《中国兽药杂志》 2009年第6期43-48,共6页

目前人及动物用流行性感冒病毒疫苗(流感疫苗)的生产大多采用鸡胚。这种传统的方法劳动强度大,鸡胚用量大,需要繁琐的纯化工艺去除鸡胚蛋白减少过敏反应,流感的大流行性以及新发流感的流行迫切需要一种新的疫苗生产方法:用哺乳动物细胞... 目前人及动物用流行性感冒病毒疫苗(流感疫苗)的生产大多采用鸡胚。这种传统的方法劳动强度大,鸡胚用量大,需要繁琐的纯化工艺去除鸡胚蛋白减少过敏反应,流感的大流行性以及新发流感的流行迫切需要一种新的疫苗生产方法:用哺乳动物细胞生产疫苗。细胞生产流感疫苗经过研究和发展,从可用于生产的Vero、MDCK、PER-C6细胞的生物学鉴定、分析到流感病毒的重配、适用、培养以及下游工艺的悬浮培养、浓缩、纯化、安全以及效果观察都取得长足进展。本文从细胞流感疫苗的细胞基质、病毒适用、重配、培养、浓缩、纯化及其疫苗的安全、效果观察方面综述了细胞流感疫苗的研发重点。 展开更多

关键词 传代细胞 流感疫苗 研究进展

在线阅读 下载PDF 职称材料

BT细胞在不同温度、时间下的维持及传代细胞生长试验 被引量：1

18

作者 田亚丽 张晓霞 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第3期37-38,共2页

为生产检验需要 ,将生长好的 BT细胞分别放在 37℃、2 5℃、1 5℃的温箱中 ,发现在 2 5℃下 ,细胞维持到需传代的最长天数为 50～ 60 d。传代前将 BT细胞在 37℃预热 1 6～ 2 4 h菌传代 。

关键词 BT细胞 维持 传代细胞 猪瘟 疫苗 生长细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

BHK21细胞带毒传代生产狂犬病弱毒冻干苗初步探讨

19

作者 钟大璋 张爱莲 +1 位作者 毛向群 张小梅 《中国兽药杂志》 北大核心 1991年第1期31-32,共2页

在生产狂犬病弱毒冻干苗的过程中,为了节约原材料,提高毒价,简化工序,我们进行了带毒传代,一次收毒和连续两次收毒试验,经与常规苗测毒对比,取得了较为满意的结果。现将初步试验结果简报如下。材料和方法一、毒种:中国兽药监察所提供的 ... 在生产狂犬病弱毒冻干苗的过程中,为了节约原材料,提高毒价,简化工序,我们进行了带毒传代,一次收毒和连续两次收毒试验,经与常规苗测毒对比,取得了较为满意的结果。现将初步试验结果简报如下。材料和方法一、毒种:中国兽药监察所提供的 Flury株狂犬病鸡胚低代冻干毒 F6。 展开更多

关键词 细胞带毒传代 生产 狂犬病 弱毒苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

带毒传代细胞生产猪瘟苗的初步总结

20

作者 高永锐 《中国兽药杂志》 北大核心 1990年第2期31-33,共3页

目前国内生产猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟细胞苗)的常规方法,是将原代细胞培养到3—4天,细胞在转瓶上形成致密单层后,进行换液接毒,以后每隔4天收获换液一次,收到第四或第五收时连同细胞全收,至此整个细胞生产工艺结束。... 目前国内生产猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟细胞苗)的常规方法,是将原代细胞培养到3—4天,细胞在转瓶上形成致密单层后,进行换液接毒,以后每隔4天收获换液一次,收到第四或第五收时连同细胞全收,至此整个细胞生产工艺结束。利用原代细胞培养猪瘟细胞苗,每次都要杀牛取睾丸。一些地方由于睾丸来源困难,难于进行大批量生产。另外。 展开更多

关键词 猪瘟苗 生产 带毒传代细胞 总结

在线阅读 下载PDF 职称材料