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用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原
被引量：
6
1
作者
古努尔·吐尔逊
米晓云
+8 位作者
张壮志
石保新
吐尔洪·依米提
张旭
巫剑
赵莉
阿曼古丽·马木提
金映红
张文宝
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期845-850,共6页
利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接...
利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。
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关键词
细粒棘球绦虫成虫表膜抗原抗体
双
抗体
夹心ELISA
粪
抗原
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职称材料
细粒棘球绦虫表膜糖抗原HSP70基因的克隆、表达及免疫特性分析
被引量：
1
2
作者
古努尔.吐尔逊
米晓云
+6 位作者
赵莉
张旭
张壮志
石保新
吐尔洪.依米提
艾力麦麦提.麦麦提力
马合木提.塔力普
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期949-958,共10页
【目的】克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70(HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性。【方法】以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70。构建EgHSP70基因的原核表...
【目的】克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70(HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性。【方法】以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70。构建EgHSP70基因的原核表达载体pET28a-EgHSP70,诱导表达重组蛋白,纯化,免疫鼠,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测血清抗体效价、特异性及抗原在虫体组织中的位置。【结果】从Eg成虫cDNA文库中筛选获得特异性EgHSP70基因,酶切和测序结果均表明该基因已克隆到pET28a。EgHSP70融合蛋白在A600=0.6,0.4 mmol IPTG,37℃表达5 h为最佳表达。经His亲和层析法纯化获得了HSP70融合蛋白相对分子质量约为33 kDa。免疫小鼠可产生高滴度(最高1:640 000)特异性抗体。Westernblot分析结果表明,制备的抗血清与EgHSP70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、Eg虫体蛋白和Eg虫体表面蛋白均能特异性结合,其他带科绦虫有此蛋白表达IFA检测结果证实EgHSP70在细粒棘球绦虫成虫体表膜及体表内有表达。【结论】实验得到的EgHSP7O融合蛋白具有较好的免疫原性和抗原性,可用于研制包虫病疫苗及相关诊断试剂为包虫病的防控提供技术支持。
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关键词
细
粒
棘
球
绦虫
成虫
cDNA文库
细
粒
棘
球
绦虫
表
膜
糖
抗原
热休克蛋白HSP70
EgHSP70融合蛋白
免疫学特性
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职称材料
题名
用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原
被引量：
6
1
作者
古努尔·吐尔逊
米晓云
张壮志
石保新
吐尔洪·依米提
张旭
巫剑
赵莉
阿曼古丽·马木提
金映红
张文宝
机构
新疆畜牧科学院兽医研究所
自治区动物卫生监督所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期845-850,共6页
基金
新疆畜牧科学院青年科研基金项目(2008QJ03)
公益性行业(农业)科研专题项目(200903036-12)
文摘
利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。
关键词
细粒棘球绦虫成虫表膜抗原抗体
双
抗体
夹心ELISA
粪
抗原
Keywords
Echinococcus granulosus adult worm tegument Ag
copro-ELISA
coproantigen
分类号
S852.734 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
细粒棘球绦虫表膜糖抗原HSP70基因的克隆、表达及免疫特性分析
被引量：
1
2
作者
古努尔.吐尔逊
米晓云
赵莉
张旭
张壮志
石保新
吐尔洪.依米提
艾力麦麦提.麦麦提力
马合木提.塔力普
机构
新疆畜牧科学院兽医研究所
乌鲁木齐米东区动物卫生监督所
乌鲁木齐市绒山羊研究所
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期949-958,共10页
基金
新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目(201023108)
文摘
【目的】克隆细粒棘球绦虫(Eg)表膜糖抗原的热休克蛋白70(HSP70)基因,构建原核表达载体,鉴定EgHSP70蛋白的免疫学特性。【方法】以Eg表膜糖抗原高免鼠血清为探针,从Eg成虫cDNA文库中筛选得到阳性克隆EgHSP70。构建EgHSP70基因的原核表达载体pET28a-EgHSP70,诱导表达重组蛋白,纯化,免疫鼠,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测血清抗体效价、特异性及抗原在虫体组织中的位置。【结果】从Eg成虫cDNA文库中筛选获得特异性EgHSP70基因,酶切和测序结果均表明该基因已克隆到pET28a。EgHSP70融合蛋白在A600=0.6,0.4 mmol IPTG,37℃表达5 h为最佳表达。经His亲和层析法纯化获得了HSP70融合蛋白相对分子质量约为33 kDa。免疫小鼠可产生高滴度(最高1:640 000)特异性抗体。Westernblot分析结果表明,制备的抗血清与EgHSP70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、Eg虫体蛋白和Eg虫体表面蛋白均能特异性结合,其他带科绦虫有此蛋白表达IFA检测结果证实EgHSP70在细粒棘球绦虫成虫体表膜及体表内有表达。【结论】实验得到的EgHSP7O融合蛋白具有较好的免疫原性和抗原性,可用于研制包虫病疫苗及相关诊断试剂为包虫病的防控提供技术支持。
关键词
细
粒
棘
球
绦虫
成虫
cDNA文库
细
粒
棘
球
绦虫
表
膜
糖
抗原
热休克蛋白HSP70
EgHSP70融合蛋白
免疫学特性
Keywords
Echinococcus granulosus adult cDNA
Echinococcus granulosus tegument surface glycoantigen
heat shock protein 70
EgHSP70 fusion protein
the immune characteristics
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原
古努尔·吐尔逊
米晓云
张壮志
石保新
吐尔洪·依米提
张旭
巫剑
赵莉
阿曼古丽·马木提
金映红
张文宝
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
细粒棘球绦虫表膜糖抗原HSP70基因的克隆、表达及免疫特性分析
古努尔.吐尔逊
米晓云
赵莉
张旭
张壮志
石保新
吐尔洪.依米提
艾力麦麦提.麦麦提力
马合木提.塔力普
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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