组蛋白去乙酰化酶6在宫颈癌组织中的表达及其临床意义 被引量：3

1

作者 华方方 夏永华 +4 位作者 陈瑞香 王玉红 潘莹 杨君 梁武风 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1507-1509,1531,共4页

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在宫颈癌组织中的表达及其临床价值。方法:采用免疫组织化学染色法检测63例宫颈癌组织、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和63例正常宫颈上皮组织中HDAC6蛋白的表达,并分析其与宫颈癌患者临床病理参数之... 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在宫颈癌组织中的表达及其临床价值。方法:采用免疫组织化学染色法检测63例宫颈癌组织、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和63例正常宫颈上皮组织中HDAC6蛋白的表达,并分析其与宫颈癌患者临床病理参数之间的关系。采用Western blotting随机检测4例宫颈癌组织及自身相对应正常宫颈上皮组织中HDAC6蛋白的表达。结果:宫颈癌组织中HDAC6蛋白表达的阳性率显著高于CIN组织和正常宫颈上皮组织(P<0.05)。HDAC6蛋白表达与宫颈癌患者年龄和组织学分化无关(P>0.05),但与临床分期、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.01或P<0.05)。进一步的Western blotting结果表明宫颈癌组织中HDAC6蛋白的表达均显著高于正常宫颈上皮组织(P<0.05)。结论:HDAC6有望成为评价宫颈癌恶性程度和预后的指标。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 宫颈肿瘤 预后

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组蛋白去乙酰化酶6在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达形态 被引量：2

2

作者 任媛 苏新明 +3 位作者 陆常玲 李朋 李孟露 康健 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期788-791,802,共5页

目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达形态变化。方法将BALB/C小鼠分为正常组和哮喘组,每组12只。应用卵蛋白致敏激发方法构建慢性哮喘模型。末次激发试验24 h后,收集各组小鼠肺组织标本。采用免疫组化方法检... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达形态变化。方法将BALB/C小鼠分为正常组和哮喘组,每组12只。应用卵蛋白致敏激发方法构建慢性哮喘模型。末次激发试验24 h后,收集各组小鼠肺组织标本。采用免疫组化方法检测HDAC6在肺组织中的表达定位,采用Western blotting定量分析肺组织中HDAC6表达水平的变化,采用比色法检测HDAC6酶活性的变化。结果与正常组相比,哮喘组小鼠肺组织HDAC6的表达水平和酶活性均显著升高(P<0.05);正常组小鼠肺组织结构细胞中HDAC6表达极少,哮喘组肺组织气道上皮细胞、气道血管周围炎症细胞、平滑肌细胞以及肺泡腔炎症细胞中HDAC6呈明显阳性表达。结论哮喘致病时肺组织中HDAC6的表达定位、表达水平和酶活性均发生不同程度改变。 展开更多

关键词 支气管哮喘 组蛋白去乙酰化酶6 气道炎症 气道重塑

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组蛋白去乙酰化酶6与神经变性疾病 被引量：2

3

作者 王飞 杜芸兰 李焰生 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期10-10,22,33,43,47,共5页

神经变性疾病是一组由于中枢神经系统特定区域神经元发生变性而引起的慢性进行性疾病，主要包括帕金森病（Parkinson＇s disease，PD）、阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）和亨廷顿舞蹈病（Huntington’s disease，HD）等，这... 神经变性疾病是一组由于中枢神经系统特定区域神经元发生变性而引起的慢性进行性疾病，主要包括帕金森病（Parkinson＇s disease，PD）、阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）和亨廷顿舞蹈病（Huntington’s disease，HD）等，这些疾病均以异常蛋白质聚集和神经元选择性丢失为特征。虽然细胞自身具备清除这种蛋白质的途径，但是当其产生速度超过清除速度时，将会聚集并干扰细胞的正常功能。因此，寻找降解异常蛋白质的有效途径，对于治疗神经变性疾病具有重要意义。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 神经变性疾病 聚集小体 自噬

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抑制组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白寡聚体的影响 被引量：1

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作者 王飞 杜芸兰 +1 位作者 卫立辛 李焰生 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期304-307,共4页

目的研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型中抑制组蛋白去乙酰化酶6(histone deacet ylase 6,HDAC6)对α-突触核蛋白寡聚体的影响及可能机制。方法将野生型pcDNA3.1-α-突触核蛋白真核表达质粒稳定转染人神经母细胞瘤SK-N... 目的研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型中抑制组蛋白去乙酰化酶6(histone deacet ylase 6,HDAC6)对α-突触核蛋白寡聚体的影响及可能机制。方法将野生型pcDNA3.1-α-突触核蛋白真核表达质粒稳定转染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,并加入蛋白酶体抑制剂lactacystin制作异常蛋白质聚集的PD模型;用不同浓度的选择性HDAC6抑制剂tubacin处理细胞24 h后,使用噻唑蓝比色法检测细胞存活率,蛋白免疫印迹法检测α-突触核蛋白寡聚体、热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)及HSP27表达水平。结果 Lactacystin组较对照组的细胞存活率降低(P<0.05)、寡聚体水平升高(P<0.05)、HSP70及HSP27的表达水平升高(P<0.05);Tubacin处理后的lactacystin组细胞存活率进一步降低(P<0.05)、寡聚体水平进一步升高(P<0.05)、而HSP70和HSP27表达水平降低(P<0.05)。结论 在蛋白酶体抑制剂制作的PD细胞模型中,抑制HDAC6可使细胞存活率降低、α-突触核蛋白寡聚体水平升高,其机制可能与HSP70和HSP27表达水平的降低有关。 展开更多

关键词 帕金森病 组蛋白去乙酰化酶6α-突触核蛋白 寡聚体 热休克蛋白

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组蛋白去乙酰化酶6对帕金森病细胞模型中α-突触核蛋白阳性包涵体的作用 被引量：1

5

作者 王飞 杜芸兰 李焰生 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1790-1794,共5页

目的研究帕金森病(PD)细胞模型中组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的表达水平及其对α-突触核蛋白阳性包涵体的影响。方法使用Lipofectamin 2000构建稳定过表达野生型α-突触核蛋白的人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,并加入蛋白酶体抑制剂lactacysti... 目的研究帕金森病(PD)细胞模型中组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的表达水平及其对α-突触核蛋白阳性包涵体的影响。方法使用Lipofectamin 2000构建稳定过表达野生型α-突触核蛋白的人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,并加入蛋白酶体抑制剂lactacystin制作α-突触核蛋白异常聚集的PD模型;采用Western blotting检测HDAC6的表达水平;使用HDAC6特异性抑制剂tubacin处理后,免疫荧光染色检测α-突触核蛋白阳性的包涵体水平。结果 Lactacystin处理细胞的HDAC6表达水平较对照细胞明显升高,且α-突触核蛋白阳性的包涵体增多,而经tubacin处理后包涵体减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在蛋白酶体抑制剂制作的PD细胞模型中,抑制升高的HDAC6可使α-突触核蛋白阳性的包涵体水平降低;其机制可能与HDAC6参与α-突触核蛋白从寡聚体向包涵体形式的转化从而起保护作用有关。 展开更多

关键词 帕金森病 组蛋白去乙酰化酶6 Α-突触核蛋白 包涵体

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组蛋白去乙酰化酶6:异常蛋白降解的关键调控因子 被引量：1

6

作者 苏敏 孙雪 刘春风 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期112-116,共5页

组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)是位于胞浆中的一种去乙酰化酶,参与调控细胞内多种重要的生物活性,可使α-微管蛋白(α-tubulin)、热休克蛋白90(Hsp90)和皮肌动蛋白(cortactin)去乙酰化,并与多种蛋白质缔结形成复合物。在细胞培养中,当产生... 组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)是位于胞浆中的一种去乙酰化酶,参与调控细胞内多种重要的生物活性,可使α-微管蛋白(α-tubulin)、热休克蛋白90(Hsp90)和皮肌动蛋白(cortactin)去乙酰化,并与多种蛋白质缔结形成复合物。在细胞培养中,当产生的错误折叠蛋白超过了分子伴侣再折叠及泛素蛋白酶体系统(UPS)处理能力时,HDAC6可将其特异转运到细胞核周结构——异常蛋白包涵体(aggresome)中,从而使之被自噬有效降解,因此认为HDAC6在异常蛋白降解中发挥了关键的调控功能,是"蛋白构象病"的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 异常蛋白包涵体 自噬 泛素蛋白酶体

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微小RNA-362通过调控组蛋白去乙酰化酶6抑制大鼠骨癌痛 被引量：2

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作者 郭池华 王湘 +4 位作者 刘焕 赵妍 郭玉芳 王爽 王文涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期706-712,共7页

目的探讨骨癌痛(BCP)大鼠模型中微小RNA(miR)-362和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的表达变化,以及上调miR-362产生的镇痛效应和潜在作用机制。方法大鼠骨髓腔内注射Walker 256乳腺癌细胞建立BCP模型。用质粒转染方法调控miR-362和HDAC6表达,... 目的探讨骨癌痛(BCP)大鼠模型中微小RNA(miR)-362和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的表达变化,以及上调miR-362产生的镇痛效应和潜在作用机制。方法大鼠骨髓腔内注射Walker 256乳腺癌细胞建立BCP模型。用质粒转染方法调控miR-362和HDAC6表达,用Van Frey纤维丝和热痛刺激仪检测大鼠机械缩足阈值(PWT)和热缩组潜伏期(PWL)变化,用qRT-PCR检测脊髓miR-362和HDAC6 mRNA表达,Western blotting检测HDAC6和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达,用ELISA检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平,最后用荧光素酶活性实验明确miR-362与HDAC6的上下游关系。结果与sham组相比,BCP组大鼠PWT和PWL显著下降,脊髓miR-362表达显著减少,HDAC6 mRNA和蛋白显著增加(均P<0.05)。与BCP组相比,BCP+LV-miR-362组大鼠出现PWT和PWL显著上升,脊髓HDAC6 mRNA和蛋白显著减少(均P<0.05)。与BCP+LV-miR-362组比较,BCP+LV-miR-362+LV-HDAC6组大鼠PWT和PWL显著下降(均P<0.05)。此外,与BCP组相比,BCP+LV-HDAC6 siRNA组大鼠脊髓NF-κB p65、IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白显著减少(均P<0.05)。最后,与mimic miR-362+HDAC63’UTR^(MUT)组相比,mimic miR-362+HDAC63’UTR^(WT)组荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。结论在大鼠BCP模型中,miR-362可通过“HDAC6-NF-κB p65”通路抑制BCP,提示miR-362有可能成为BCP分子治疗的新靶点。 展开更多

关键词 骨癌痛 镇痛 miR-362 组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)

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糖皮质激素对其受体、热休克蛋白90和组蛋白去乙酰化酶6的影响及中药干预研究 被引量：2

8

作者 王雪 耿龙 +3 位作者 季永智 周鸿波 葛露 王艳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期607-609,共3页

目的检测应用肾上腺糖皮质激素后激素受体(GR)、热休克蛋白90(HSP90)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的变化及应用中药后对其干预情况。方法采用实时定量PCR方法检测正常对照组、地塞米松组及地塞米松加中药组的GR、HSP90和HDAC6的mRNA表达... 目的检测应用肾上腺糖皮质激素后激素受体(GR)、热休克蛋白90(HSP90)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)的变化及应用中药后对其干预情况。方法采用实时定量PCR方法检测正常对照组、地塞米松组及地塞米松加中药组的GR、HSP90和HDAC6的mRNA表达情况。结果与正常对照组相比,地塞米松组和地塞米松加中药组GR的表达水平均明显降低,差异有统计学意义。地塞米松组HSP90β mRNA表达水平与正常对照组相比明显降低,地塞米松加中药组HSP90β mRNA表达水平比地塞米松组升高,而比正常对照组低。地塞米松加中药组HDAC6 mRNA明显高于正常对照组和地塞米松组,差异有统计学意义。结论应用糖皮质激素后GR减少;应用糖皮质激素后HSP90β减少,右归丸对其略有改善;应用糖皮质激素后再应用右归丸HDAC6升高。 展开更多

关键词 糖皮质激素受体 热休克蛋白90 组蛋白去乙酰化酶6

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组蛋白去乙酰化酶6对畜禽热应激和脂代谢的调节作用

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作者 李秋艳 许宏 +1 位作者 贺德勇 赵素梅 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第15期132-136,共5页

组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)是位于细胞质中的一种具有特殊结构和功能的去乙酰化酶,通过蛋白质泛素化以及蛋白质赖氨酸乙酰化共同调控细胞内的异常蛋白降解,影响细胞的周期、增殖、迁移和凋亡等过程。文章综述了HDAC6作为细胞内管理错误... 组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)是位于细胞质中的一种具有特殊结构和功能的去乙酰化酶,通过蛋白质泛素化以及蛋白质赖氨酸乙酰化共同调控细胞内的异常蛋白降解,影响细胞的周期、增殖、迁移和凋亡等过程。文章综述了HDAC6作为细胞内管理错误折叠蛋白质的关键者,间接调控了畜禽热应激以及脂代谢过程,为动物养殖生产过程中防治热应激以及脂肪代谢研究提供参考。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 去乙酰化 泛素化 错误折叠蛋白 热应激 脂代谢

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂tubastatin A促进嗜肺军团菌感染RAW264.7细胞自噬的机制 被引量：1

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作者 杨晓辰 曹秀琴 +1 位作者 盛琳琳 杨志伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期693-701,共9页

目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在嗜肺军团菌干扰巨噬细胞自噬中的作用及机制。方法采用(10、5、2.5)μmol/L tubastatin A(TubA)处理RAW264.7巨噬细胞,CCK-8法检测RAW264.7巨噬细胞的增殖活性确定TubA的半数抑制浓度(IC50)。建立嗜... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在嗜肺军团菌干扰巨噬细胞自噬中的作用及机制。方法采用(10、5、2.5)μmol/L tubastatin A(TubA)处理RAW264.7巨噬细胞,CCK-8法检测RAW264.7巨噬细胞的增殖活性确定TubA的半数抑制浓度(IC50)。建立嗜肺军团菌感染RAW264.7巨噬细胞感染模型,实验分为无TubA组(每组设细胞对照组、灭活菌组、活菌组),(10、5、2.5)μmol/L TubA处理组(每组均设细胞对照组、灭活菌组、活菌组)。嗜肺军团菌感染6、12、24、48 h,收集各组细胞。细菌增殖实验检测嗜肺军团菌在RAW264.7巨噬细胞内增殖的情况;pmCherry-C1-EGFP-LC3B质粒转染RAW264.7小鼠巨噬细胞检测各组内自噬流变化;实时定量PCR和Western blot法检测组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)、P62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、α微管蛋白(α-tubulin)、含缬酪肽蛋白(p97/VCP)、热休克蛋白90(HSP90)、HSP70、热休克转录因子1(HSF1)和纤维型肌动蛋白(F-actin)的mRNA及蛋白表达水平。结果TubA的IC50为50μmol/L。与RAW264.7细胞正常对照组相比,加入TubA后,嗜肺军团菌在小鼠巨噬细胞内增殖明显减少。在无HDAC6抑制剂组中,与正常对照组相比,活菌组比灭活菌组对自噬流的抑制作用更强。在HDAC6抑制剂TubA组中,活菌组的绿色荧光亮点均减少,自噬流增加。嗜肺军团菌的灭活菌和活菌分别作用于RAW264.7巨噬细胞6、12、24、48 h,与正常对照RAW264.7细胞相比,TubA嗜肺军团菌干扰组HDAC6、α-tubulin、p97/VCP、P62 mRNA和蛋白表达均降低。结论嗜肺军团菌干扰RAW264.7巨噬细胞自噬与HDAC6/P62/LC3B和HDAC6/p97/HSF1信号通路有关。 展开更多

关键词 嗜肺军团菌 组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6) Tubastatin A(TubA)

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HDAC6通过介导FLOT2去乙酰化维持其在鼻咽癌中的稳定及促瘤作用

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作者 罗辰骅 温彬斌 +1 位作者 刘洁 杨文龙 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期687-697,共11页

目的:浮舰蛋白(flotillin-2,FLOT2)是典型的致瘤蛋白和潜在的肿瘤治疗靶点,但靶向FLOT2的干预策略仍未确定。翻译后修饰作为表观调控的重要方式,对蛋白质的活性、定位和稳定性等特性具有重要的调控作用,揭示蛋白质翻译后修饰的调控机制... 目的:浮舰蛋白(flotillin-2,FLOT2)是典型的致瘤蛋白和潜在的肿瘤治疗靶点,但靶向FLOT2的干预策略仍未确定。翻译后修饰作为表观调控的重要方式,对蛋白质的活性、定位和稳定性等特性具有重要的调控作用,揭示蛋白质翻译后修饰的调控机制和功能是靶向治疗开发的一种有效手段。本研究旨在研究鼻咽癌中FLOT2赖氨酸乙酰化修饰的调控机制及其功能,为靶向FLOT2的肿瘤干预手段提供新思路。方法:利用PhosphoSitePlus数据库分析FLOT2的赖氨酸乙酰化位点,并构建赖氨酸乙酰化位点突变的FLOT2突变体[FLOT2(K211R)];用组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylases, HDAC)抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)、 Sirt家族去乙酰化酶抑制剂烟酰胺(nicotinamide,NAM)处理鼻咽癌细胞,TSA处理转染FLOT2突变体质粒的人胚肾细胞(human embryonic kidney,HEK)-293T细胞;利用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)检测FLOT2的总赖氨酸乙酰化水平以及特定赖氨酸(K)位点突变对FLOT2总赖氨酸乙酰化水平的影响。用蛋白质印迹法检测TSA处理未转染/转染FLOT2突变体质粒后的鼻咽癌细胞中FLOT2/FLAG-FLOT2的蛋白质表达,实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)检测TSA处理后鼻咽癌细胞中FLOT2 mRNA的表达。用TSA分别联合MG132或氯喹(chloroquine,CQ)处理鼻咽癌细胞后,检测FLOT2的蛋白质表达。用放线菌酮(cycloheximide,CHX)分别处理已转染FLAG-FLOT2(WT)或FLAG-FLOT2(K211R)质粒的HEK-293T细胞,检测FLAG-FLOT2、FLOT2(K211R)的蛋白质表达水平以反映蛋白质的降解速率。通过BioGrid数据库查询FLOT2与HDAC6之间是否可能存在相互作用,并采用Co-IP验证。用FLAG-FLOT2(WT)/FLAG-FLOT2(K211R)质粒分别联合空白对照(Vector)/HDAC6质粒转染HEK-293T细胞,分为FLAG-FLOT2(WT)+Vector、 FLAG-FLOT2(WT)+HDAC6、 FLAG-FLOT2(K211R)+Vector、 FLAG-FLOT2(K211R)+HDAC6共4组,分析K211R突变对FLOT2总赖氨酸乙酰化水平的影响。在6-0B细胞中,分别过表达FLOT2(WT)和FLOT2(K211R),用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成和Transwell侵袭检测FLOT2乙酰化位点突变体的生物学功能。结果:PhosphoSitePlus数据库显示FLOT2的K211位点存在乙酰化修饰,Co-IP结果证实FLOT2蛋白存在明显的乙酰化修饰,且TSA可以显著上调FLOT2的总乙酰化修饰水平,而NAM则无此作用;K211位点突变后FLOT2的总赖氨酸乙酰化水平显著下降,且不受TSA影响。TSA下调鼻咽癌细胞中FLOT2的蛋白质表达水平,而不影响FLOT2 mRNA的表达水平,也不影响转染FLAG-FLOT2(K211R)的鼻咽癌细胞中FLOT2(K211R)的蛋白质表达水平。FLOT2(K211R)的蛋白质降解速率显著慢于FLOT2(WT)的降解速率。蛋白酶体抑制剂MG132可以阻止TSA引起的FLOT2降解,溶酶体抑制剂CQ则无此功能。BioGrid数据库数据显示FLOT2与HDAC6可能存在相互作用,Co-IP结果证实FLOT2与HDAC6抗体可以相互共沉淀对方蛋白。在敲减HDAC6表达的鼻咽癌细胞中,FLOT2的总赖氨酸乙酰化水平显著提高;共转染HDAC6和FLAG-FLOT2(WT)可显著降低总赖氨酸乙酰化水平,而共转染HDAC6和FLAG-FLOT2(K211R)不影响总赖氨酸乙酰化水平。敲减HDAC6可以显著下调FLOT2的蛋白质水平而不影响其mRNA水平;MG132可以阻止敲减HDAC6引起的FLOT2降解。敲减HDAC6,FLOT2的降解速率显著加快。转染FLOT2(K211R)突变体的鼻咽癌细胞增殖速度和侵袭能力显著强于转染FLOT2(WT)的细胞。结论:FLOT2 K211位点存在乙酰化修饰,HDAC6通过介导FLOT2 K211的去乙酰化修饰抑制FLOT2经蛋白酶体途径降解,维持其在鼻咽癌中的稳定和促瘤功能。 展开更多

关键词 浮舰蛋白2 赖氨酸乙酰化 鼻咽癌 组蛋白去乙酰化酶6

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EGCG阻断HDAC6-PI3K/AKT/mTOR轴以激活自噬促进小胶质细胞清除Aβ

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作者 林雨 黄凯文 +4 位作者 洪宏海 朱丹 莫友胜 李冬莉 方淑环 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第3期486-497,共12页

【目的】为明确表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否参与小胶质细胞对β-淀粉样蛋白(Aβ)的清除和自噬诱导,以探讨EGCG在防治阿尔茨海默病(AD)的潜在机制。【方法】将6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组和EGCG组,另将野生型小鼠作为对照组... 【目的】为明确表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否参与小胶质细胞对β-淀粉样蛋白(Aβ)的清除和自噬诱导,以探讨EGCG在防治阿尔茨海默病(AD)的潜在机制。【方法】将6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组和EGCG组,另将野生型小鼠作为对照组,每组15只,EGCG组持续灌胃给药[5 mg/(kg·d)]8周后,进行旷场实验及Y迷宫检测小鼠学习记忆能力,硫磺素-S染色评价小鼠脑实质中Aβ的含量及分布,免疫荧光检测小鼠海马组织Aβ1-42、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙结合适配器分子1(Iba1)表达水平;同时予20μmol/L Aβ1-42诱导N9小鼠胶质细胞模型,检测不同浓度EGCG(5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)处理后的细胞活力,Western blot检测Aβ1-42、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、淀粉样前体蛋白(APP)、胰岛素降解酶(IDE)、脑啡肽酶(NEP)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)水平;最后通过小胶质细胞与神经元SH-SY5Y细胞共培养,检测细胞活力及Caspase-3水平,验证EGCG介导Aβ清除对神经元的保护作用。【结果】EGCG增加APP/PS1小鼠在旷场中央区域活动时间及次数(P<0.05),提高Y迷宫测试交替百分比(P<0.01);EGCG减少APP/PS1小鼠海马组织中Aβ沉积,增加小胶质细胞数量;体外实验显示EGCG可提高Aβ诱导N9细胞的存活率(P<0.01),并上调RAGE活性(P<0.05),促进Aβ的内化吞噬(P<0.01),通过下调HDAC6水平(P<0.05),抑制PI3K、AKT、mTOR的磷酸化(P<0.001)而增加LC3-Ⅱ/LC3-I比值(P<0.001)激活小胶质细胞自噬;EGCG通过小胶质细胞对Aβ1-42的清除,提高SH-SY5Y细胞存活率(P<0.05),降低Caspase-3的活性(P<0.01),对神经元具有保护作用。【结论】EGCG通过靶向阻断HDAC6-PI3K/AKT/mTOR轴,激活小胶质细胞自噬清除Aβ。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 小胶质细胞 自噬 组蛋白去乙酰化酶6

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HDAC6调控骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化研究进展

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作者 拦玉鑫 曹林忠 +4 位作者 刘德孙 马小成 张勇杰 蒋玮 胡康一 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第4期570-574,共5页

骨髓间充质干细胞是人体内具有多向分化功能的细胞,在骨代谢和骨稳态调节过程中发挥着极为重要的作用。骨髓间充质干细胞分化是一个多机制协同调控的复杂过程,组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)与骨髓间充质干细胞分化功... 骨髓间充质干细胞是人体内具有多向分化功能的细胞,在骨代谢和骨稳态调节过程中发挥着极为重要的作用。骨髓间充质干细胞分化是一个多机制协同调控的复杂过程,组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)与骨髓间充质干细胞分化功能密切相关,并通过影响Runx2、Osx、PPAR-γ和C/EBPα的表达水平,调节下游信号通路,调控骨髓间充质干细胞的成骨-成脂分化。笔者就HDAC6调控骨髓间充质干细胞成脂分化和成骨分化的相关机制进行综述。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 骨髓间充质干细胞 成骨分化 成脂分化

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下调HDAC6促进人白血病细胞K562凋亡的实验研究 被引量：1

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作者 刘泽洪 郭兵 +5 位作者 秦观海 袁英 王渝东 周一刃 宋世卿 侯彦华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1626-1631,共6页

目的:研究组蛋白去乙酰化转移酶6(Histone deacetylase 6,HDAC6)对人白血病细胞促凋亡作用及其机制。方法:采用siRNA干扰技术抑制HDAC6基因的表达;应用RT-PCR和Western blot分别检测白血病细胞中HDAC6和相关信号通路蛋白的表达;流式细... 目的:研究组蛋白去乙酰化转移酶6(Histone deacetylase 6,HDAC6)对人白血病细胞促凋亡作用及其机制。方法:采用siRNA干扰技术抑制HDAC6基因的表达;应用RT-PCR和Western blot分别检测白血病细胞中HDAC6和相关信号通路蛋白的表达;流式细胞术和Hoechest染色检测K562细胞的凋亡及形态改变。结果:与健康志愿者的外周单核细胞和骨髓基质细胞株比较,白血病细胞系的HDAC6表达量均明显增高(P <0. 05);流式细胞术和Hoechest染色显示,干扰HDAC6基因后K562细胞凋亡率增加,且呈凋亡形态发生改变; Western blot显示,干扰HDAC6能增加Bax/Bcl-2的比例和cleaved Caspase-3的表达,并激活MAPK、ATK、ERK信号通路。结论:干扰HDAC6促进人白血病细胞K562细胞的凋亡,其凋亡的机制可能与激活MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 白血病 组蛋白去乙酰化转移酶6 细胞凋亡 K562细胞

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HDAC6抑制剂通过保护肾小球内皮细胞线粒体稳态和EMT改善糖尿病肾病

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作者 陈小丽 罗富里 童梦瑶 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期71-80,共10页

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylases 6,HDAC6)特异性小分子抑制剂Tubastatin A对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)小鼠肾损伤的保护作用和机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、DN组和Tubastatin A组。DN组和... 目的 探讨组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylases 6,HDAC6)特异性小分子抑制剂Tubastatin A对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)小鼠肾损伤的保护作用和机制。方法 C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、DN组和Tubastatin A组。DN组和Tubastatin A组行包膜下肾切除术以切除右肾,并通过腹膜内注射STZ诱导DN。Tubastatin A组接受Tubastatin A治疗,每3 d 1次,连续治疗8周。RNA测序分析DN组和Tubastatin A组肾组织中差异表达基因。通过透射电子显微镜评估线粒体受损情况,以及DHE染色估计肾组织中的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平。将小鼠肾小球内皮细胞(mice glomerular endothelial cell, mGEC)暴露于高葡萄糖(high glucose, HG)培养基或40 mmol/L甘露醇(对照),加入或不加入Tubastatin A处理。采用蛋白质印迹分析HDAC6、肾损伤标志物KIM1和上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)标志物的表达情况,以及流式细胞仪检测细胞中线粒体ROS和细胞凋亡情况。结果 DN小鼠肾组织和暴露于HG的mGEC细胞中HDAC6表达上调,并与KIM1水平升高一致。组织学分析显示DN小鼠的显著形态学变化,包括肾小球肥大、肾小球系膜基质积聚、肾小球基底膜增厚、肾小管基底膜增厚和出现肾小球、肾小管间质纤维化;Tubastatin A治疗缓解了这些不良改变。与对照DMSO相比,Tubastatin A在HG处理下显著降低了mGEC细胞中肾损伤分子1(kidney injury molecular1,KIM1)、HDAC6、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、N-钙粘蛋白、波形蛋白表达(P<0.05),并上调E-钙粘蛋白表达(P<0.05)。透射电子显微镜显示Tubastatin A组小鼠的肾小球内皮细胞受损线粒体的比例较DN组显著降低(P<0.01)。Tubastatin A组小鼠肾组织中ROS水平较DN组降低(P<0.01)。RNA测序结果表明,与DN组小鼠相比,Tubastatin A组小鼠肾组织中与ECM-受体相互作用和与三羧酸(TCA)循环相关的基因富集。在mGEC细胞中,Tubastatin A处理下调了HG诱导的mGEC细胞中的线粒体ROS水平(P<0.01),以及减少了细胞凋亡(P<0.05)。结论 Tubastatin A改善了HG诱导的肾小球内皮细胞损伤和DN进展,其作用机制与保护线粒体稳态和抑制EMT发生相关。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶6 Tubastatin A 糖尿病肾病 线粒体 肾小球内皮细胞

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SIRT6与心血管、肿瘤及代谢性疾病 被引量：4

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作者 何延浩 王维蓉 林蓉 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期271-275,共5页

SIRT6是酵母Sir2在哺乳动物中的同源物Sirtuins家族SIRT1-SIRT7中的一员,主要存在于细胞核中,具有组蛋白去乙酰化酶及ADP-核糖基转移酶活性。人类SIRT6在其生理、病理过程中具有重要作用,参与机体生长、发育、代谢及炎症反应等过程。最... SIRT6是酵母Sir2在哺乳动物中的同源物Sirtuins家族SIRT1-SIRT7中的一员,主要存在于细胞核中,具有组蛋白去乙酰化酶及ADP-核糖基转移酶活性。人类SIRT6在其生理、病理过程中具有重要作用,参与机体生长、发育、代谢及炎症反应等过程。最新研究发现,SIRT6还涉及多种重大疾病的发生和发展。本文将从SIRT6与心血管、肿瘤、代谢等相关疾病的关系作一介绍,揭示了SIRT6与相关疾病的内在联系。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶SIRT6 心血管 肿瘤 代谢 疾病

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基于雄激素受体通路的PROTAC分子研究进展

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作者 张心玥 史雨豪 +2 位作者 叶宇航 陈聪 孟祥国 《化学研究与应用》 CAS 北大核心 2024年第11期2465-2477,共13页

雄激素受体(androgen receptor,AR)在前列腺癌的发生和发展过程中扮演着至关重要的角色。在临床长期雄激素剥夺治疗中,AR过度表达、AR基因突变和AR剪接体等现象的出现,可能会导致雄激素受体通路再度激活,并不可避免地进展为去势抵抗性... 雄激素受体(androgen receptor,AR)在前列腺癌的发生和发展过程中扮演着至关重要的角色。在临床长期雄激素剥夺治疗中,AR过度表达、AR基因突变和AR剪接体等现象的出现,可能会导致雄激素受体通路再度激活,并不可避免地进展为去势抵抗性前列腺癌。蛋白降解靶向嵌合体(proteolysis targetingchimera,PROTAC)在靶向AR降解方面进展显著,针对AR的PROTAC降解剂通过促进AR降解来阻断雄激素受体信号通路,有望为前列腺癌的临床治疗带来新的突 破。本文对基于雄激素受体通路的PROTAC分子进行论述。 展开更多

关键词 雄激素受体 蛋白降解靶向嵌合体 组蛋白去乙酰化酶6 前列腺癌

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