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CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用
被引量：
1
1
作者
张洋逸
黄伟峰
+3 位作者
何楠
李佳欢
陈文锋
黄少康
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期703-709,共7页
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridi...
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。
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关键词
西方蜜蜂
东方蜜蜂微孢子虫
组织透明化技术
肠道
激光共聚焦显微镜
原位杂交
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职称材料
6种光学透明化方法在大鼠脑组织块的透明效果比较
被引量：
6
2
作者
欧毅超
冯展鹏
+5 位作者
武广森
张源
包赟
邱炳辉
刘亚伟
漆松涛
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第4期7-14,共8页
目的比较6种光学透明化方法对大鼠脑组织块的透明效果。方法选取14只SD大鼠脑分别采用iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、Passive-CLARITY的方法进行透明化处理。结果对照组PBS透明灰度值为13.031±0.586,iDISCO...
目的比较6种光学透明化方法对大鼠脑组织块的透明效果。方法选取14只SD大鼠脑分别采用iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、Passive-CLARITY的方法进行透明化处理。结果对照组PBS透明灰度值为13.031±0.586,iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、passiveCLARITY分别为6.447±0.574、11.690±0.909、2.318±0.986、8.118±1.026、8.591±0.384、4.198±0.182,除SeeDB组外(P=0.185),其余各组均较PBS组差异均有显著性(P<0.01),CUBIC分别与各组有显著性差异(P<0.01)。透明化处理后,iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、Passive-CLARITY面积改变分别为(-30.02±2.39)%、(19.74±4.09)%、(14.7±3.92)%、(10.7±5.55)%、(23.01±4.19)%、(66.51±5.68)%,各组面积改变均较iDISCO组、Passive-CLARITY组有显著性差异(P<0.01)。结论除SeeDB外,各组方法均能达到透明效果,CUBIC方法在大鼠脑组织块的透明效果优于其他各组,iDISCO处理后面积缩小,而Passive-CLARITY处理后变得膨胀。
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关键词
组织
光学
透明化
技术
方法比较
大鼠脑
组织
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职称材料
题名
CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用
被引量：
1
1
作者
张洋逸
黄伟峰
何楠
李佳欢
陈文锋
黄少康
机构
福建农林大学蜂学学院
福州大学生命科学研究所
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期703-709,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31772681)
福建农林大学科研发展基金(KFA17245A)
福建农林大学蜂学学院创新团队基金(13290001003)
文摘
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。
关键词
西方蜜蜂
东方蜜蜂微孢子虫
组织透明化技术
肠道
激光共聚焦显微镜
原位杂交
Keywords
Apis mellifera
Nosema ceranae
CLARITY
gut
confocal laser scanning microscopy
in situ hybridization
分类号
Q965.8 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
6种光学透明化方法在大鼠脑组织块的透明效果比较
被引量：
6
2
作者
欧毅超
冯展鹏
武广森
张源
包赟
邱炳辉
刘亚伟
漆松涛
机构
南方医科大学南方医院神经外科
南方医科大学第一临床医学院
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018年第4期7-14,共8页
基金
广东省省级科技计划项目(2016A020213006)
国家自然科学基金(81372692)
国家科技支撑计划(2014BAI04B01)
文摘
目的比较6种光学透明化方法对大鼠脑组织块的透明效果。方法选取14只SD大鼠脑分别采用iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、Passive-CLARITY的方法进行透明化处理。结果对照组PBS透明灰度值为13.031±0.586,iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、passiveCLARITY分别为6.447±0.574、11.690±0.909、2.318±0.986、8.118±1.026、8.591±0.384、4.198±0.182,除SeeDB组外(P=0.185),其余各组均较PBS组差异均有显著性(P<0.01),CUBIC分别与各组有显著性差异(P<0.01)。透明化处理后,iDISCO、SeeDB、CUBIC、SCALEVIEW-A2、CLARITY-CUBIC、Passive-CLARITY面积改变分别为(-30.02±2.39)%、(19.74±4.09)%、(14.7±3.92)%、(10.7±5.55)%、(23.01±4.19)%、(66.51±5.68)%,各组面积改变均较iDISCO组、Passive-CLARITY组有显著性差异(P<0.01)。结论除SeeDB外,各组方法均能达到透明效果,CUBIC方法在大鼠脑组织块的透明效果优于其他各组,iDISCO处理后面积缩小,而Passive-CLARITY处理后变得膨胀。
关键词
组织
光学
透明化
技术
方法比较
大鼠脑
组织
Keywords
optical tissue clearing
comparison
histology
brain
rat
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用
张洋逸
黄伟峰
何楠
李佳欢
陈文锋
黄少康
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
6种光学透明化方法在大鼠脑组织块的透明效果比较
欧毅超
冯展鹏
武广森
张源
包赟
邱炳辉
刘亚伟
漆松涛
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2018
6
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