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大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块法培养及鉴定 被引量:14
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作者 任立群 张秀云 +1 位作者 孙波 王金凤 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期135-137,共3页
目的 :建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块培养法。方法 :取大鼠胸主动脉 ,切成1 mm× 1 mm× 1 mm的小块 ,均匀地种植于培养瓶壁上 ,约 5 0 min后加入含有 2 0 %小牛血清的PRMI- 1 640培养基进行培养。结果 :培养第 5天时 ... 目的 :建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块培养法。方法 :取大鼠胸主动脉 ,切成1 mm× 1 mm× 1 mm的小块 ,均匀地种植于培养瓶壁上 ,约 5 0 min后加入含有 2 0 %小牛血清的PRMI- 1 640培养基进行培养。结果 :培养第 5天时 ,可见少量梭形或长梭形细胞自组织块周围游出 ,至培养 3周细胞融合成片 ,呈“峰、谷”状生长。肌动蛋白免疫组化染色 ,>98%的细胞染色阳性 ,透射电镜观察 ,于基膜下和胞浆内可见密斑和密体。 VG染色也证实几乎所有的细胞均为平滑肌细胞。结论 :应用细胞贴块法培养大鼠平滑肌细胞 ,操作简单 ,结果稳定 ,纯度较高 。 展开更多
关键词 平滑肌细胞 组织培养 胸主动脉 鉴定 动物实验 心血管疾病 发病机制
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人支气管上皮细胞原代培养方法的对比研究 被引量:8
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作者 高元妹 张平 +2 位作者 夏旸 赵海金 蔡绍曦 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第15期2698-2700,共3页
目的:探索简单有效的人支气管上皮细胞原代培养方法。方法:通过组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法分离获得人的支气管上皮细胞,用无血清培养基进行细胞培养。结果:组织贴块法可获得纯度高、存活率高、数量多的支气管上... 目的:探索简单有效的人支气管上皮细胞原代培养方法。方法:通过组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法分离获得人的支气管上皮细胞,用无血清培养基进行细胞培养。结果:组织贴块法可获得纯度高、存活率高、数量多的支气管上皮细胞,蛋白酶消化+机械刮刷法获得支气管上皮细胞中混杂较多的成纤维细胞,纤支镜刷检法获得的支气管上皮数量少且易老化,其中混杂大量的红细胞,影响上皮细胞的贴壁和生长。结论:组织贴块法是一种简便、有效的培养人的支气管上皮细胞的方法,无血清培养基可提供满意的生长条件,提高上皮细胞的纯度,为进一步研究不同的呼吸系统疾病提供了良好的基础。 展开更多
关键词 上皮细胞 支气管 细胞培养 组织贴块法
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仔猪小肠平滑肌细胞体外培养方法的建立
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作者 田梦 黄勇 +5 位作者 瞿俊勇 欧阳芬 邓梁 张玲 潘多 张明军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期38-40,共3页
为了建立简便、高效的仔猪小肠平滑肌细胞体外培养方法,为相关研究提供试验材料,采用组织贴块法和酶消化法进行原代培养,胰酶消化传代,并应用倒置显微镜和SABC试剂盒对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果采用组织块贴块法培养的仔猪肠... 为了建立简便、高效的仔猪小肠平滑肌细胞体外培养方法,为相关研究提供试验材料,采用组织贴块法和酶消化法进行原代培养,胰酶消化传代,并应用倒置显微镜和SABC试剂盒对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果采用组织块贴块法培养的仔猪肠平滑肌细胞有90%的组织块接种存活,初次传代后的平滑肌细胞纯度达95%以上。免疫组化染色显示胞浆内α平滑肌肌动蛋白阳性表达。而酶消化法培养的仔猪肠平滑肌细胞,生长缓慢甚至死亡。表明组织块贴块法是为简便、可靠,短期内可获大量高纯度的仔猪小肠平滑肌细胞的原代培养方法。 展开更多
关键词 仔猪 小肠平滑肌细胞 组织贴块法 酶消化 细胞培养
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低氧处理增强体外培养小鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖和迁移能力 被引量:6
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作者 沈慧 张丽娜 +2 位作者 姚德山 张振刚 龚开政 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期39-45,共7页
目的改良并建立小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)原代培养方法,探讨低氧条件对其增殖、迁移及凋亡的影响。方法无菌条件下分离肺动脉,胰蛋白酶酶解组织贴块法体外培养PASMC。倒置相差显微镜观察细胞形态、细胞计数法绘制细胞生长曲线;采用... 目的改良并建立小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)原代培养方法,探讨低氧条件对其增殖、迁移及凋亡的影响。方法无菌条件下分离肺动脉,胰蛋白酶酶解组织贴块法体外培养PASMC。倒置相差显微镜观察细胞形态、细胞计数法绘制细胞生长曲线;采用α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色法鉴定细胞类型及纯度;运用CCK-8法检测不同氧含量对细胞增殖活力的影响,在低氧条件下,划痕实验检测细胞迁移能力, Western blot法检测细胞BAX蛋白水平。结果培养的原代PASMC呈长梭形,具有典型的"峰-谷"状, 9 d后细胞生长迅速呈单层致密排列,细胞生长曲线近似"S"形;α-SMA阳性的细胞可达96%。与常氧组相比,缺氧组在各时间点的PASMC增殖活性和迁移距离均明显增加,在10 mL/L氧含量条件下细胞增殖和迁移活力最强,细胞BAX蛋白水平也明显降低,且具有时间依赖性。结论采用酶解组织贴块法可获取高纯度高活力的原代PASMC,在10 mL/L氧含量条件下细胞增殖和迁移活力强,不易凋亡。 展开更多
关键词 组织贴块法 低氧 肺动脉平滑肌细胞(PASMC) 增殖 迁移
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