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人组织激肽释放酶基因重组腺病毒转染对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响被引量：2: 1; 作者谢良地余惠珍 +3 位作者朱鹏立许昌声王华军李体远《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期662-668,共7页; 目的:探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCSHR)增殖和迁移的影响。方法:自行构建双顺反子重组腺病毒载体,携带强绿色荧光蛋白(EGFP... 展开更多; 关键词组织激肽释放酶1 基因转移细胞增殖细胞迁移血管平滑肌细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

人组织激肽释放酶基因转移对血管平滑肌细胞迁移的影响被引量：2: 2; 作者余惠珍谢良地 +1 位作者朱鹏立许昌声《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期746-749,共4页; 目的探讨重组腺病毒介导的人激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)的血管平滑肌细胞(VSMCSHR)迁移的影响。方法自行构建携带目的基因hKLK1和强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双顺反子重... 展开更多; 关键词人组织激肽释放酶1 基因转移血管平滑肌细胞细胞迁移缓激肽受体; 在线阅读下载PDF 职称材料

组织激肽释放酶改善大鼠心肌重塑的实验研究被引量：1: 3; 作者余惠珍朱鹏立 +4 位作者黄舒洁向红潘玮张枫林帆《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期830-835,共6页; 目的探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶(h TK1)基因过表达对大鼠心肌梗死后心肌结构、心肌胶原纤维以及新生血管的影响。方法结扎雄性Sprague-Dawley大鼠的左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型。将含h TK1基因的重组腺病毒(Ad-h ... 展开更多; 关键词人组织激肽释放酶1 重组腺病毒心肌梗死心室重构; 在线阅读下载PDF 职称材料

人组织激肽释放酶在Pichia pastoris酵母中的表达: 4; 作者王安平姚黎平孙怀昌《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第6期49-52,共4页; 通过将人组织激肽释放酶(hKLK1)原编码序列克隆入Pichiapastoris酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组表达质粒pPIC9K-KLK1。分别用SalⅠ及BglⅡ酶切线性化后电转化酵母菌株GS115,经MD平板及含不同抗性浓度G418的YPD平板上培养筛选,获得... 展开更多; 关键词人组织激肽释放酶(hKLK1) PICHIA pastoris酵母表达条件重组菌株; 在线阅读下载PDF 职称材料

TK-1和TIMP-1过表达对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响被引量：3: 5; 作者郑熙余惠珍 +1 位作者高洁朱鹏立《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期403-414,共12页; 【目的】探讨重组腺病毒介导的人TK-1和TIMP-1基因过表达对大鼠心肌梗死后的左室(LV)功能、炎症因子表达的影响及其机制。【方法】通过结扎Sprague-Dawley雄性大鼠冠脉左前降支诱导心肌梗死模型。观察假手术组(10只)、生理盐水组(13只)... 展开更多; 关键词组织激肽释放酶1 基质金属蛋白酶抑制物1 巨噬细胞迁移抑制因子核转录因子ΚB 心肌梗死心室重塑; 在线阅读下载PDF 职称材料

TK1和TIMP1基因共表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达被引量：1: 6; 作者余惠珍向红 +3 位作者黄舒洁朱鹏立潘玮张枫《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1072-1078,共7页; 目的构建含人组织激肽释放酶1(hTK1)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP1)基因的重组腺病毒载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达。方法选择相对应酶切位点,酶切含人TIMP1基因片段的原始质粒和腺病毒穿梭质粒pDC316,经连接... 展开更多; 关键词组织激肽释放酶1基因基质金属蛋白酶组织抑制物1基因重组腺病毒载体血管重构; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人组织激肽释放酶基因重组腺病毒转染对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响被引量：2: 1; 作者谢良地余惠珍朱鹏立许昌声王华军李体远; 机构福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所福建省立医院干部特诊二科深圳市人民医院; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期662-668,共7页; 基金福建省医学创新基金资助项目(No.2007-CX-14) 福建省科委课题资助项目(No.2008KJB-02); 文摘目的:探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCSHR)增殖和迁移的影响。方法:自行构建双顺反子重组腺病毒载体,携带强绿色荧光蛋白(EGFP)标志基因和目的基因hKLK1;用细胞计数法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞生长周期;蛋白免疫印迹法(Western blotting)测定细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27Kip1、p21Cip1的表达。采用改良Boyden微孔膜双槽法测定VSMCSHR迁移。结果:(1)hKLK1基因转移呈感染复数依赖性(20-100MOI)抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR生长,100MOI时抑制率为39.3%;呈时间依赖性抑制VSMCSHR生长,第5d时达高峰,抑制率为35.2%。(2)hKLK1基因转移可显著抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR增殖,峰值抑制率为30.2%(P<0.01);细胞周期阻滞于G0/G1期的VSMCSHR明显增多,最大阻滞率为36.4%(P<0.01),而缓激肽B2受体特异性阻断剂Hoe140逆转了hKLK的抑制作用。(3)hKLK1基因转移明显上调PDGF-BB诱导VSMCSHR的p27Kip1、p21Cip1表达,Hoe140明显降低p27Kip1、p21Cip1表达。(4)hKLK1基因转移可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR细胞迁移,抑制率为34.6%,且Hoe140不影响该抑制作用。结论:hKLK1基因转移可抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR增殖,主要由缓激肽B2受体介导的,通过上调细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27Kip1、p21Cip1表达的途径。而hKLK1基因转移抑制VSMCSHR迁移效应可能不通过B2受体。; 关键词组织激肽释放酶1 基因转移细胞增殖细胞迁移血管平滑肌细胞; Keywords Tissue kallikrein 1 Gene transfer Cell proliferation Cell migration Vascular smooth muscle cells; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人组织激肽释放酶基因转移对血管平滑肌细胞迁移的影响被引量：2: 2; 作者余惠珍谢良地朱鹏立许昌声; 机构福建医科大学附属第一医院福建医科大学省立临床医院干部特诊二科; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期746-749,共4页; 基金福建省医学创新基金(2007-CX-14) 福建省科委课题(2008KJB-02); 文摘目的探讨重组腺病毒介导的人激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)的血管平滑肌细胞(VSMCSHR)迁移的影响。方法自行构建携带目的基因hKLK1和强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双顺反子重组腺病毒载体。采用组织贴块法培养SHR胸主动脉血管平滑肌细胞,接种第3～6代VSMCSHR于6孔板,分别加入含hKLK1重组腺病毒和对照病毒干预,3d后加入PDGF-BB诱导24h,采用改良Boyden微孔膜双槽法测定VSMCSHR迁移,并加入缓激肽受体B2特异性阻断剂Hoe140。RT-PCR法测定缓激肽B1受体、B2受体的mRNA表达。结果hKLK1基因转移可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR细胞迁移,抑制率为34.6%,且Hoe140干预不产生影响。PDGF-BB诱导的VSMCSHR缓激肽B2受体mRNA表达明显增加(P<0.001),而Hoe140可明显降低其表达(P<0.01)。结论重组腺病毒介导的hKLK1基因转移可抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR迁移,这一效应可能不通过B2受体途径介导。; 关键词人组织激肽释放酶1 基因转移血管平滑肌细胞细胞迁移缓激肽受体; Keywords human tissue kallikrein 1 gene transfer migration vascular smooth muscle cells; 分类号 R543 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组织激肽释放酶改善大鼠心肌重塑的实验研究被引量：1: 3; 作者余惠珍朱鹏立黄舒洁向红潘玮张枫林帆; 机构福建省立医院老年医学研究室; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期830-835,共6页; 基金福建省自然科学基金(2011J01134 2010J01127) 福建省卫生厅青年骨干培养人才项目(2013-ZQN-ZD-2); 文摘目的探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶(h TK1)基因过表达对大鼠心肌梗死后心肌结构、心肌胶原纤维以及新生血管的影响。方法结扎雄性Sprague-Dawley大鼠的左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型。将含h TK1基因的重组腺病毒(Ad-h TK1)和对照病毒(1×1010PFU)注射到心肌梗死部位及其周边区域。4周后处死大鼠,取出心脏、称量、切片;通过荧光显微镜观察心肌组织的绿色荧光表达;Western blot测定h TK1蛋白表达;HE染色观察心肌组织结构,天然猩红染色观察胶原含量、分布,免疫组化法检测新生血管密度。结果仅在Ad-h TK1组大鼠的心肌既有绿色荧光,又有h TK1蛋白表达。假手术组大鼠的心脏质量、左室质量、心肌胶原分布显著低于心梗模型组,新生血管密度明显高于模型组。但与对照病毒组相比,Ad-h TK1组大鼠的心脏质量、左室质量、左室质量指数和心肌胶原纤维含量明显降低(P<0.05),心肌结构和新生血管密度明显改善(P<0.05)。结论重组腺病毒介导的组织激肽释放酶基因过表达可改善心肌结构,增加梗死周围心肌的新生血管形成,改善梗死后心肌重构。; 关键词人组织激肽释放酶1 重组腺病毒心肌梗死心室重构; Keywords human tissue kallikrein 1 adenovirus myocardial infarction ventricular remodeling; 分类号 R541.4 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人组织激肽释放酶在Pichia pastoris酵母中的表达: 4; 作者王安平姚黎平孙怀昌; 机构江苏畜牧兽医职业技术学院扬州大学兽医学院; 出处《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第6期49-52,共4页; 文摘通过将人组织激肽释放酶(hKLK1)原编码序列克隆入Pichiapastoris酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组表达质粒pPIC9K-KLK1。分别用SalⅠ及BglⅡ酶切线性化后电转化酵母菌株GS115,经MD平板及含不同抗性浓度G418的YPD平板上培养筛选,获得抗3mg/mlG418Mut+型分泌表达hKLK1的重组酵母菌4株,抗1mg/mlG418Muts型分泌表达hKLK1的酵母菌3株。酶活性测定数据表明:高拷贝转化子重组蛋白表达量高于低拷贝转化子;Mut+型转化子重组蛋白表达量高于Muts型转化子;且当甲醇诱导体积分数为2%时,重组蛋白的表达量最高。进一步的Western-blotting分析证明,表达的重组hKLK1分子质量正确,能被特异的抗体识别。; 关键词人组织激肽释放酶(hKLK1) PICHIA pastoris酵母表达条件重组菌株; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TK-1和TIMP-1过表达对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响被引量：3: 5; 作者郑熙余惠珍高洁朱鹏立; 机构福建省立医院心血管内三科福建省立医院南院内科福建医科大学省立临床医学院老年医学研究室福建省临床老年病研究所; 出处《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期403-414,共12页; 基金国家自然科学基金(81670258,81873515) 福建省自然科学基金(2017J01247)。; 文摘【目的】探讨重组腺病毒介导的人TK-1和TIMP-1基因过表达对大鼠心肌梗死后的左室(LV)功能、炎症因子表达的影响及其机制。【方法】通过结扎Sprague-Dawley雄性大鼠冠脉左前降支诱导心肌梗死模型。观察假手术组(10只)、生理盐水组(13只)、对照病毒组(13只)、TK-1组(13只)、TIMP-1组(13只)、联合基因组(13只)的大鼠术后的心功能参数改变、心肌梗死面积、及各组大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、核因子-κB(NF-κB)和巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的表达水平。【结果】与假手术组相比,对照病毒组大鼠的各项心功能参数(左室舒张期内径LVIDd、左室收缩期内径LVIDs、短轴缩短率FS、射血分数EF)差(P<0.01),心肌梗死面积大(P<0.01),心肌细胞凋亡指数高(P<0.01),各炎症因子(NF-κB、MIF、MMP-2、MMP-9)的表达水平上升(P<0.01)。与对照病毒组相比,单基因组或联合基因组的心功能改善明显;心肌梗死的面积明显减少;心肌细胞凋亡指数显著下降;炎症因子的表达明显下降。相比于单基因组,联合基因组各项指标改善更显著。【结论】hTK-1或hTIMP-1单基因过表达可改善大鼠心肌梗死后的心功能,抑制炎症因子表达与心肌细胞凋亡,联合基因过表达(hTK-1和hTIMP-1)呈协同效应、改善更显著,可能的机制为hTK-1或hTIMP-1均可部分抑制MIF/NF-κB/MMP-2/9炎症信号通路。; 关键词组织激肽释放酶1 基质金属蛋白酶抑制物1 巨噬细胞迁移抑制因子核转录因子ΚB 心肌梗死心室重塑; Keywords tissue kallikrein 1 matrix metalloproteinase inhibitor 1 macrophage migration inhibitory factor nu-clear factorκB myocardial infarction ventricular remodeling; 分类号 R541.4 [医药卫生—心血管疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TK1和TIMP1基因共表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达被引量：1: 6; 作者余惠珍向红黄舒洁朱鹏立潘玮张枫; 机构福建医科大学省立临床医学院干部二科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1072-1078,共7页; 基金福建省自然科学基金(2011J01134,2013J01273); 文摘目的构建含人组织激肽释放酶1(hTK1)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMP1)基因的重组腺病毒载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达。方法选择相对应酶切位点,酶切含人TIMP1基因片段的原始质粒和腺病毒穿梭质粒pDC316,经连接、热激、转化等亚克隆而构建成重组穿梭质粒。之后,应用限制性内切酶BglⅡ/SalⅠ,酶切含启动子和hTIMP1基因片段,再通过回收片段以及连接、热激等步骤亚克隆至pDC316-hTK1载体中,构建含双基因(hTK1和hTIMP1)的重组病毒穿梭质粒。利用AdMax腺病毒Cre/loxP重组酶系统,将该质粒和骨架病毒质粒于293A细胞中同源重组包装产生双基因的重组腺病毒载体。采用Western blot测定在VSMCs中的表达。结果经PCR、双酶切和测序证实,重组病毒穿梭质粒pDC316-hTIMP1-EGFP和pDC316-hTK1-hTIMP1构建正确。在293A细胞里成功包装产生含双基因的重组腺病毒载体Ad5-hTK1-hTIMP1感染VSMCs后,hTK1和hTIMP1蛋白呈独立高表达,表达水平呈浓度依赖性增加。结论首次成功构建并包装了含双基因(hTK1和hTIMP1)的重组腺病毒载体,目的蛋白在VSMCs中呈现独立高表达。; 关键词组织激肽释放酶1基因基质金属蛋白酶组织抑制物1基因重组腺病毒载体血管重构; Keywords tissue kallikrein 1 gene tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 1 gene recombinant adenovirus vector vascular re- modeling; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人组织激肽释放酶基因重组腺病毒转染对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响	谢良地余惠珍朱鹏立许昌声王华军李体远	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人组织激肽释放酶基因转移对血管平滑肌细胞迁移的影响	余惠珍谢良地朱鹏立许昌声	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	组织激肽释放酶改善大鼠心肌重塑的实验研究	余惠珍朱鹏立黄舒洁向红潘玮张枫林帆	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人组织激肽释放酶在Pichia pastoris酵母中的表达	王安平姚黎平孙怀昌	《江苏农业科学》 CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	TK-1和TIMP-1过表达对大鼠心肌梗死后心室重塑的影响	郑熙余惠珍高洁朱鹏立	《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	TK1和TIMP1基因共表达载体的构建及其在大鼠血管平滑肌细胞中的表达	余惠珍向红黄舒洁朱鹏立潘玮张枫	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料