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半月板纤维软骨细胞接种脱钙松质骨支架构建组织工程半月板的方法选择
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作者 张正政 王少杰 +3 位作者 齐岩松 张继英 江东 余家阔 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期5-10,共6页
目的:探讨半月板纤维软骨细胞(MFCs)接种脱钙松质骨(DCB)支架的最佳接种方法。方法:实验分静滴法、注射法、离心法、负压法等4组。取兔MFCs,采用上述4种方法对孔隙率为80%、平均孔径为268μm的DCB支架进行细胞接种。Live/Dead染... 目的:探讨半月板纤维软骨细胞(MFCs)接种脱钙松质骨(DCB)支架的最佳接种方法。方法:实验分静滴法、注射法、离心法、负压法等4组。取兔MFCs,采用上述4种方法对孔隙率为80%、平均孔径为268μm的DCB支架进行细胞接种。Live/Dead染色检测其细胞活性,并通过软件分析其细胞分布情况。CCK-8法和Hoechst 33258法检测支架内MFCs增殖情况和支架内DNA含量。结果:通过Live/Dead染色显示,离心法接种细胞后其存活率优于其他3组(P〈0.05);细胞分布均匀,由浅至深各层细胞比例无明显统计学差异(P〉0.05);1~5天细胞增殖能力优于其他3组(P〈0.05),14~21天支架DNA含量亦优于其他3组(P〈0.05)。结论:离心法可以明显提高MFCs在DCB上的细胞分布和细胞增殖能力,是一种简单、高效的,利于组织工程半月板(TEM)构建的接种方法。 展开更多
关键词 组织工程半月板 接种方法 纤维软骨细胞 脱钙松质骨
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数字成型脱矿皮质骨组织工程学半月板支架的制备与检测 被引量:1
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作者 谢兴 朱敬先 +1 位作者 胡小青 敖英芳 《中国运动医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期553-556,560,共5页
目的:探寻新的异种异体半月板移植物。方法:使用牛胫骨皮质骨板作为移植物原料,通过测量实验动物的实际膝关节半月板数据,经过三维建模重建半月板形态,利用数控机床对脱钙皮质骨进行加工。对加工成型的半月板进行生物力学检测,同时观察... 目的:探寻新的异种异体半月板移植物。方法:使用牛胫骨皮质骨板作为移植物原料,通过测量实验动物的实际膝关节半月板数据,经过三维建模重建半月板形态,利用数控机床对脱钙皮质骨进行加工。对加工成型的半月板进行生物力学检测,同时观察其大体结构及超微结构。结果:该方法制备的异种异体半月板移植物能够很好地进行塑形改建,具有接近正常猪半月板的生物力学性质。同时含有大量I型胶原网络,利于新生组织长入及替代。该移植物有细胞长入的空隙,同时具有一定的初始支撑强度。结论:该移植物具有细胞长入的空隙,同时具有一定的初始支撑强度,可作为半月板的替代材料。 展开更多
关键词 移植 脱钙皮质骨 数字成型 组织工程半月板
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半月板纤维软骨细胞与壳聚糖/聚磷酸钙体外复合培养的实验研究 被引量:6
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作者 付维力 王践云 +4 位作者 李箭 万昌秀 叶京兵 罗大辉 李棋 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期53-58,共6页
目的:观察半月板纤维软骨细胞在不同配比壳聚糖/聚磷酸钙(chitosan/calciumpolyphosphate,CS/CPP)支架材料上的生长状况,优选最佳配比CS/CPP生物材料作为组织工程半月板支架材料。方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔... 目的:观察半月板纤维软骨细胞在不同配比壳聚糖/聚磷酸钙(chitosan/calciumpolyphosphate,CS/CPP)支架材料上的生长状况,优选最佳配比CS/CPP生物材料作为组织工程半月板支架材料。方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔半月板纤维软骨细胞,单层培养传代至第3代,并对其进行表型鉴定。采用共混-化学交联固化-冷冻干燥法将CS、醛基化海藻酸钠(aldehyde alginate,ADA)、CPP有机地结合起来,制备4种不同配比的新型组织工程半月板复合支架材料。将体外分离培养的第3代半月板细胞,通过二次沉淀接种法将其种植于不同配比的CS/CPP支架上,体外培养7天,采用相差倒置显微镜、SEM、HE染色观察细胞在支架上的形态、黏附、生长情况。结果:体外分离培养的第3代半月板细胞基本维持纤维软骨细胞的表型。相差倒置显微镜下可见,细胞在支架上黏附良好;扫描电镜下可见,细胞在支架上均匀分布,细胞多数呈多角形,并有基质分泌;HE染色结果显示,有细胞长入到三维支架材料内部。其中,半月板细胞在3:7的CS/CPP支架材料上单位面积内数目最多,生长最旺盛,细胞外基质分泌最多。结论:三维多孔的CS/CPP复合材料能促进半月板纤维软骨细胞的黏附、生长和增殖,其中3:7的CS/CPP支架材料细胞相容性和生物活性最好,最适于半月板纤维软骨细胞粘附和生长,并且能促进半月板细胞增殖和维持其表型,有望成为组织工程半月板良好的支架载体。 展开更多
关键词 纤维软骨细胞 壳聚糖/聚磷酸钙 复合支架材料 组织工程半月板
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