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组织工程与修复重建技术在小儿外科的应用进展
1
作者
赵卫华
朱光辉
《临床小儿外科杂志》
CAS
2020年第11期961-966,共6页
儿童创伤、畸形、肿瘤、炎症等疾病可导致组织缺损,给组织工程与修复重建外科带来新的挑战。在过去30年里,组织工程与修复重建技术在小儿外科领域得到了长足发展。组织工程在皮肤、骨与软骨、肌腱、血管、肝脏、肾脏、膀胱、神经等领域...
儿童创伤、畸形、肿瘤、炎症等疾病可导致组织缺损,给组织工程与修复重建外科带来新的挑战。在过去30年里,组织工程与修复重建技术在小儿外科领域得到了长足发展。组织工程在皮肤、骨与软骨、肌腱、血管、肝脏、肾脏、膀胱、神经等领域应用广泛,相关器官的修复重建领域也有新的研究进展。各种新技术在种子细胞、生物材料和组织构建中的应用是组织工程与修复重建发展的基础,但应用到儿童群体,需要考虑其特殊性,如持续生长发育、免疫器官的逐步成熟、重建组织的再血管化及如何达到功能重建等。此外,有关组织工程与修复重建的伦理学问题也亟需解决。本文将介绍组织工程与修复重建技术在小儿外科领域的应用进展。
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关键词
组织工程/方法
修复外科手术
小儿外科
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职称材料
小鼠胚胎干细胞条件培养液培养的人角膜内皮细胞在脱细胞猪角膜基质上单层细胞片的构建
被引量：
1
2
作者
鹿晓燕
王智崇
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期705-709,共5页
背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞（HCECs）难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基（ESC-CM）能够促进体外HCECs...
背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞（HCECs）难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基（ESC-CM）能够促进体外HCECs的增生,脱细胞猪角膜基质（APCS）是较好的支架材料,但ESC-CM培养的HCECs是否能在APCS上融合成单层细胞鲜见研究. 目的 研究ESC-CM培养的HCECs在APCS上是否能够形成单层细胞. 方法 用小鼠ESC-CM培养液培养小鼠ES-E14细胞,收集培养上清液,离心后按体积比1∶3与人角膜内皮细胞培养液（CEM）混合,制备体积分数25％ ESC-CM液.取穿透角膜移植术后剩余的供体人角巩膜缘组织,采用组织块培养法用ESC-CM对HCECs进行培养和传代,采用逆转录PCR法检测HCECs中Ⅷ型胶原蛋白（ColⅧ）与神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达以鉴定细胞.取猪角膜,利用磷脂酶A2和碳酸氢盐溶液脱细胞法制备APCS,将第2代HCECs混合液按照800/mm2的密度种植于灭菌的APCS上进行培养,于倒置相差显微镜下观察细胞形态,采用苏木精-伊红染色法观察培养细胞的组织结构;采用免疫荧光法检测构建的HCECs单细胞片中闭锁小带蛋白-1（ZO-1）和Na＋-K＋-ATP酶的表达. 结果 体外培养的HCECs呈典型的六角形,内皮特异性标志物ColⅧ和NSE mRNA表达阳性.脱细胞APCS呈白色透明状,苏木精-伊红染色显示APCS中无角膜细胞,但角膜胶原纤维排列规则.第2代HCECs复水后可在APCS上生长并贴附,培养后7d融合成单层细胞片,细胞片上HCECs的细胞密度为（2 694± 143）/mm2.构建的HCECs片中内皮细胞泵功能相关蛋白ZO-1和Na＋-K＋-ATP酶均呈阳性表达,呈红色荧光. 结论 25％ESC-CM可促进HCECs的生长并维持细胞的正常形态,APCS可为HCECs片的构建提供支架和较好的生存微环境.在APCS形成的HCECs单细胞片可表达HCECs泵功能,是角膜移植的良好供体.
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关键词
角膜基质/移植
角膜内皮细胞
人
组织工程/方法
组织
支架
条件培养液
小鼠胚胎干细胞
猪脱细胞角膜基质
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职称材料
体外家兔骺板软骨细胞和复合支架材料构建人工骺板软骨
3
作者
尹飞
郭丽
+3 位作者
吕佳音
王金成
高中礼
段德生
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期23-25,F0002,共4页
目的:探讨采用复合支架材料构建人工骺板软骨的可行性。方法:分离获得骺板软骨细胞,加入 0．3％I型胶原酸性溶液、1 000 U·mL-1凝血酶溶液及20 g·L-1人血冻干纤维蛋白原混匀,成为胶冻样软骨组织培养物。定期取培养块固定,常...
目的:探讨采用复合支架材料构建人工骺板软骨的可行性。方法:分离获得骺板软骨细胞,加入 0．3％I型胶原酸性溶液、1 000 U·mL-1凝血酶溶液及20 g·L-1人血冻干纤维蛋白原混匀,成为胶冻样软骨组织培养物。定期取培养块固定,常规石蜡切片,行HE染色、甲苯胺蓝染色及免疫组化检查。结果:新制成的以胶原-纤维蛋白混合凝胶为支架材料的软骨细胞培养物呈浅粉红色胶冻样,细胞均匀分布于其中。培养3 d 后悬浮物呈乳白色,透光度降低。逐渐缩小至直径约7 mm大小,硬度逐渐增加。HE染色见软骨细胞位于软骨陷窝内,软骨细胞培养物有一定层次感,但没有象骺板样排列成柱状。甲苯胺蓝染色显示胞体周围有丰富的软骨基质。免疫组织化学染色可见Ⅱ型胶原阳性细胞。结论:利用混合支架构建的人工骺板软骨在大小及可塑性等方面结果较满意。
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关键词
生长面/损伤
人工骺板
组织工程/方法
软骨细胞
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职称材料
题名
组织工程与修复重建技术在小儿外科的应用进展
1
作者
赵卫华
朱光辉
机构
湖南省儿童医院
出处
《临床小儿外科杂志》
CAS
2020年第11期961-966,共6页
基金
湖南省发展和改革委员会2019年创新研发项目(编号:湘发改投资【2019】875号)。
文摘
儿童创伤、畸形、肿瘤、炎症等疾病可导致组织缺损,给组织工程与修复重建外科带来新的挑战。在过去30年里,组织工程与修复重建技术在小儿外科领域得到了长足发展。组织工程在皮肤、骨与软骨、肌腱、血管、肝脏、肾脏、膀胱、神经等领域应用广泛,相关器官的修复重建领域也有新的研究进展。各种新技术在种子细胞、生物材料和组织构建中的应用是组织工程与修复重建发展的基础,但应用到儿童群体,需要考虑其特殊性,如持续生长发育、免疫器官的逐步成熟、重建组织的再血管化及如何达到功能重建等。此外,有关组织工程与修复重建的伦理学问题也亟需解决。本文将介绍组织工程与修复重建技术在小儿外科领域的应用进展。
关键词
组织工程/方法
修复外科手术
小儿外科
Keywords
Tissue Engineering/MT
Reconstructive Surgical Procedures
Pediatric Surgery
分类号
R726 [医药卫生—儿科]
R321-3 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
小鼠胚胎干细胞条件培养液培养的人角膜内皮细胞在脱细胞猪角膜基质上单层细胞片的构建
被引量：
1
2
作者
鹿晓燕
王智崇
机构
郑州大学第一附属医院眼科
中山大学中山眼科中心、眼科学国家重点实验室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期705-709,共5页
文摘
背景 目前角膜供体来源短缺,且体外培养的人角膜内皮细胞（HCECs）难以再生和扩增,为临床上角膜移植的开展带来了很大困难,组织工程角膜的构建仍是研究的主要课题.前期研究已证实,小鼠胚胎干细胞条件培养基（ESC-CM）能够促进体外HCECs的增生,脱细胞猪角膜基质（APCS）是较好的支架材料,但ESC-CM培养的HCECs是否能在APCS上融合成单层细胞鲜见研究. 目的 研究ESC-CM培养的HCECs在APCS上是否能够形成单层细胞. 方法 用小鼠ESC-CM培养液培养小鼠ES-E14细胞,收集培养上清液,离心后按体积比1∶3与人角膜内皮细胞培养液（CEM）混合,制备体积分数25％ ESC-CM液.取穿透角膜移植术后剩余的供体人角巩膜缘组织,采用组织块培养法用ESC-CM对HCECs进行培养和传代,采用逆转录PCR法检测HCECs中Ⅷ型胶原蛋白（ColⅧ）与神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达以鉴定细胞.取猪角膜,利用磷脂酶A2和碳酸氢盐溶液脱细胞法制备APCS,将第2代HCECs混合液按照800/mm2的密度种植于灭菌的APCS上进行培养,于倒置相差显微镜下观察细胞形态,采用苏木精-伊红染色法观察培养细胞的组织结构;采用免疫荧光法检测构建的HCECs单细胞片中闭锁小带蛋白-1（ZO-1）和Na＋-K＋-ATP酶的表达. 结果 体外培养的HCECs呈典型的六角形,内皮特异性标志物ColⅧ和NSE mRNA表达阳性.脱细胞APCS呈白色透明状,苏木精-伊红染色显示APCS中无角膜细胞,但角膜胶原纤维排列规则.第2代HCECs复水后可在APCS上生长并贴附,培养后7d融合成单层细胞片,细胞片上HCECs的细胞密度为（2 694± 143）/mm2.构建的HCECs片中内皮细胞泵功能相关蛋白ZO-1和Na＋-K＋-ATP酶均呈阳性表达,呈红色荧光. 结论 25％ESC-CM可促进HCECs的生长并维持细胞的正常形态,APCS可为HCECs片的构建提供支架和较好的生存微环境.在APCS形成的HCECs单细胞片可表达HCECs泵功能,是角膜移植的良好供体.
关键词
角膜基质/移植
角膜内皮细胞
人
组织工程/方法
组织
支架
条件培养液
小鼠胚胎干细胞
猪脱细胞角膜基质
Keywords
Corneal stroma/transplantation
Endothelial cells,corneal/cytology
Humans
Tissue engineering/methods
Tissue scaffolds
Culture media,conditioned
Embryonic stem cells,mouse
Acellular corneal stroma,porcine
分类号
R779.65 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
体外家兔骺板软骨细胞和复合支架材料构建人工骺板软骨
3
作者
尹飞
郭丽
吕佳音
王金成
高中礼
段德生
机构
吉林大学中日联谊医院骨科
吉林大学公共卫生学院毒理学教研室
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期23-25,F0002,共4页
基金
国家自然科学基金资助课题(39970741)吉林大学青年教师基金资助课题(2003QN045)
文摘
目的:探讨采用复合支架材料构建人工骺板软骨的可行性。方法:分离获得骺板软骨细胞,加入 0．3％I型胶原酸性溶液、1 000 U·mL-1凝血酶溶液及20 g·L-1人血冻干纤维蛋白原混匀,成为胶冻样软骨组织培养物。定期取培养块固定,常规石蜡切片,行HE染色、甲苯胺蓝染色及免疫组化检查。结果:新制成的以胶原-纤维蛋白混合凝胶为支架材料的软骨细胞培养物呈浅粉红色胶冻样,细胞均匀分布于其中。培养3 d 后悬浮物呈乳白色,透光度降低。逐渐缩小至直径约7 mm大小,硬度逐渐增加。HE染色见软骨细胞位于软骨陷窝内,软骨细胞培养物有一定层次感,但没有象骺板样排列成柱状。甲苯胺蓝染色显示胞体周围有丰富的软骨基质。免疫组织化学染色可见Ⅱ型胶原阳性细胞。结论:利用混合支架构建的人工骺板软骨在大小及可塑性等方面结果较满意。
关键词
生长面/损伤
人工骺板
组织工程/方法
软骨细胞
Keywords
growth plate/injuries
artificial epiphyseal plate
tissue engineering/methods
chondrocytes
分类号
R-332 [医药卫生]
R681.4 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
组织工程与修复重建技术在小儿外科的应用进展
赵卫华
朱光辉
《临床小儿外科杂志》
CAS
2020
0
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职称材料
2
小鼠胚胎干细胞条件培养液培养的人角膜内皮细胞在脱细胞猪角膜基质上单层细胞片的构建
鹿晓燕
王智崇
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
3
体外家兔骺板软骨细胞和复合支架材料构建人工骺板软骨
尹飞
郭丽
吕佳音
王金成
高中礼
段德生
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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