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苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备
被引量：
3
1
作者
耿超
牟安丽
+2 位作者
刘志强
李向东
周涛
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期755-758,I0002,共5页
【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免...
【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。
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关键词
苹果褪绿叶斑病毒
外壳蛋白基因
原核表达
抗血清
组织印迹分析
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职称材料
题名
苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备
被引量：
3
1
作者
耿超
牟安丽
刘志强
李向东
周涛
机构
山东农业大学植物保护学院植物病理学系
中国农业大学植病系
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期755-758,I0002,共5页
基金
山东省自然科学基金(ZR2011CM019)
文摘
【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。
关键词
苹果褪绿叶斑病毒
外壳蛋白基因
原核表达
抗血清
组织印迹分析
Keywords
Apple chlorotic leaf spot virus （ACLSV）
CP gene
Prokaryotic expression
Antiserum
Tissue printing assays
分类号
S661.1 [农业科学—果树学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备
耿超
牟安丽
刘志强
李向东
周涛
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
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