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长链非编码RNA AI662270调控衰老小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制研究
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作者 张一凡 胡雅琪 +2 位作者 王锐 王淑文 袁成福 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第8期999-1007,共9页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)AI662270调控衰老小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制。方法(1)20只雄性C57BL/6小鼠随机分为青年组与老年组(n=10),青年组小鼠饲养至4月龄后采用乌拉糖麻醉后眼球取血处死,老年组饲养至18月龄后采用相同处死方... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)AI662270调控衰老小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制。方法(1)20只雄性C57BL/6小鼠随机分为青年组与老年组(n=10),青年组小鼠饲养至4月龄后采用乌拉糖麻醉后眼球取血处死,老年组饲养至18月龄后采用相同处死方式,分离附睾白色脂肪组织(eWAT)和肝组织。采用Western blotting检测肿瘤抑制基因1(p16ink4a)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21(p21kip1)的表达情况,RT-qPCR检测4个差异lncRNAs(C4a、AI662270、BATE1、Gm29719)的表达情况。取小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,设置正常对照组(诱导分化为成熟脂肪细胞后不做处理)与衰老模型组[即阿霉素处理(ADR)组,采用0.2μmol/L阿霉素诱导构建衰老脂肪细胞模型],采用β-半乳糖苷酶染色检测脂肪细胞的染色情况;RT-qPCR检测AI662270和衰老标志物(p16ink4a、p21kip1、p53)的表达情况;Western blotting检测磷酸化H2A组蛋白家族成员X(gama-H2AX)、p16ink4a、p21kip1蛋白的表达情况。(2)采用己糖激酶法检测小鼠血清和3T3-L1脂肪细胞培养基中的葡萄糖含量;RT-qPCR检测小鼠eWAT和脂肪细胞中胰岛素敏感性关键基因蛋白激酶B(Akt)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运体4(GLUT4)mRNA的表达情况;Western blotting检测IRS1、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达情况。(3)采用Spearman相关分析探讨AI662270表达水平与IRS1、PI3K mRNA表达水平的相关性;构建衰老脂肪细胞AI662270低表达模型,采用RT-qPCR验证AI662270的敲低效率;采用己糖激酶法检测衰老脂肪细胞敲低AI662270后,细胞培养基中的葡萄糖含量,RT-qPCR检测Akt、IRS1、IRS2、PI3K mRNA的表达情况,Western blotting检测Akt、p-Akt蛋白的表达情况。(4)采用生物信息学分析预测AI662270的下游靶基因及二者的结合位点,RTqPCR和Western blotting验证AI662270敲低后,其下游靶基因的表达情况。结果(1)与青年组比较,老年组小鼠e WAT中p16ink4a、p21kip1蛋白表达水平明显增高,eWAT和肝组织中C4a、AI662270、BATE1、Gm29719的表达水平明显增高(P<0.05)。β-半乳糖苷酶染色结果显示,与正常对照组比较,阿霉素处理的衰老脂肪细胞中蓝绿色增强,呈扩大、扁平的细胞形态;与正常对照组比较,ADR组脂肪细胞中AI662270及p16ink4a、p21kip1 mRNA表达水平明显增高,gama-H2AX、p16ink4a、p21kip1蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。(2)与青年组比较,老年组小鼠血清中葡萄糖含量明显增加(P<0.01);与正常对照组比较,ADR组脂肪细胞培养基中葡萄糖含量明显增加(P<0.05);与青年组比较,老年组小鼠eWAT中IRS1、PI3K等的表达水平明显降低(P<0.01);与正常对照组比较,ADR组脂肪细胞中IRS1、PI3K等的表达水平也明显降低(P<0.05)。(3)Spearman相关分析结果显示,AI662270表达水平与IRS1、PI3K mRNA表达水平均呈负相关(P<0.05);RTqPCR检测结果显示,与siNC组比较,siAI662270组脂肪细胞中AI662270的表达水平明显降低(P<0.05),即成功构建了衰老脂肪细胞AI662270低表达模型;己糖激酶法检测结果显示,衰老脂肪细胞敲低AI662270后,细胞培养基中的葡萄糖含量明显降低(P<0.05);敲低AI662270后,衰老脂肪细胞中IRS1、IRS2、PI3K mRNA的表达水平(P<0.05)以及p-Akt/Akt比值明显增高(P<0.01)。(4)生物信息学预测结果显示,AI662270下游的靶基因为miR-3073b-3p;血红素加氧酶1(Hmox1)为miR-3073b-3p的靶基因;与siNC组比较,siAI662270组衰老脂肪细胞中miR-3073b-3p的表达水平明显增高,Hmox1 m RNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论衰老可增加小鼠eWAT中AI662260的表达,且AI662260的表达与胰岛素敏感性呈负相关;AI662260敲低可降低衰老脂肪细胞培养基中的葡萄糖含量,上调IRS1、PI3K的表达,增加衰老脂肪细胞的胰岛素敏感性,其机制可能与AI662270/miR-3073b-3p/Hmox1通路有关。 展开更多
关键词 衰老 附睾白色脂肪组织 胰岛素抵抗 长链编码rna AI662270
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低氧诱导的长链非编码RNA 68在肝癌中的功能及其作用机制
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作者 谭露 沈少明 何平 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期702-712,共11页
目的·探究肝癌细胞系中受低氧诱导的长链非编码RNA 68(hypoxia-induced long non-coding RNA 68,HILRNA68)的功能以及其相关机制。方法·利用长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)芯片研究低氧(hypoxia)与常氧(normoxia... 目的·探究肝癌细胞系中受低氧诱导的长链非编码RNA 68(hypoxia-induced long non-coding RNA 68,HILRNA68)的功能以及其相关机制。方法·利用长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)芯片研究低氧(hypoxia)与常氧(normoxia)分别处理12 h的肝癌细胞系SMMC-7721中表达变化的lncRNA,通过R语言DEseq2程序包分析低氧下表达显著变化的lncRNA,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证差异lncRNA。通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)稳定敲除细胞内的低氧诱导因子(hypoxia inducible factors,HIFs)用以研究低氧下HILRNA68转录是否受HIFs的调控。通过细胞核浆分离,结合qRT-PCR检测以及RNA荧光原位杂交技术(RNA fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)实验研究HILRNA68的亚细胞定位。通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)分别在SMMC-7721和MHCC-97H细胞中敲低HILRNA68以研究其在低氧下的细胞功能。通过细胞生长计数实验以及Transwell细胞侵袭实验分别探究低氧下HILRNA68对肝癌细胞的生长增殖以及侵袭转移能力的影响。此外,通过双荧光素酶报告基因实验研究敲低HILRNA68后是否抑制HIF1α的转录活性。结果·通过对lncRNA芯片的结果进行差异基因分析,共得到247个升高和17个降低的lncRNA[定义为倍数变化(fold change)≥4,伪发现率(false discovery rate,FDR)≤0.05]。在差异基因中发现HILRNA68在多个经低氧处理的细胞系中均稳定升高约10倍。低氧下敲低HIF1α、HIF2α、HIF1β均显著抑制HILRNA68的升高(均P<0.05),荧光素酶报告基因实验表明其转录受到HIFs的调控。亚细胞定位研究表明HILRNA68主要定位于细胞核。细胞功能实验结果表明敲低HILRNA68显著抑制肝癌细胞SMMC-7721与MHCC-97H在低氧下的增殖以及侵袭能力(均P<0.05)。机制研究表明,敲低HILRNA68显著抑制低氧下HIF1α的转录活性(P<0.05);HIF1α靶基因在低氧下的升高在敲低HILRNA68后被显著抑制(P<0.05)。结论·研究鉴定出一批低氧下表达显著变化的lncRNA,并功能注释了其中升高的HILRNA68。HILRNA68受HIFs调控而升高,升高后促进细胞低氧下的增殖以及侵袭转移能力;机制上,HILRNA68低氧下表达升高后促进HIF1α的转录活性。 展开更多
关键词 低氧 低氧诱导因子 长链编码rna 细胞增殖 细胞侵袭 TCONS_00027424
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非编码RNA对牛前体脂肪细胞分化的研究进展
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作者 何瑞莹 吴章情 +3 位作者 昝林森 张涛平 马伟东 杨武才 《中国畜禽种业》 2024年第1期60-69,共10页
肌内脂肪含量是评价牛肉等级和价值的重要指标,其取决于肌内前体脂肪细胞的增殖与分化。前体脂肪细胞分化是一个高度协调的过程,受到激素、转录因子、细胞因子及表观调控等多种因素调控。非编码RNA(Non-coding RNA,ncRNA)是一类不编码... 肌内脂肪含量是评价牛肉等级和价值的重要指标,其取决于肌内前体脂肪细胞的增殖与分化。前体脂肪细胞分化是一个高度协调的过程,受到激素、转录因子、细胞因子及表观调控等多种因素调控。非编码RNA(Non-coding RNA,ncRNA)是一类不编码蛋白质的表观遗传学调节因子,在前体脂肪细胞分化过程中发挥重要作用,其鉴定、功能和调节机制研究已成为牛脂肪沉积的研究热点。该文在简单介绍ncRNA分类、作用机制的基础上,详细阐述了miRNA、lncRNA和circRNA等3种类型的ncRNAs在不同品种、不同性别牛脂肪组织中的表达规律及在前体脂肪细胞分化中的研究进展,以期为解析ncRNA调控牛脂肪细胞分化机制奠定理论基础,并为今后ncRNA在肉牛分子育种提高肌内脂肪含量方面的应用提供理论参考。 展开更多
关键词 前体脂肪细胞 编码rna 细胞分化
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长链非编码RNA MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞分化及肌纤维转化的影响 被引量:1
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作者 杨玉铭 赵鑫铭 +6 位作者 谭宝华 肖丽窈 芦格言 翟立君 黄奕扬 洪林君 顾婷 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期453-461,共9页
[目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞(PSCs)成肌分化及不同类型肌纤维转化的影响。[方法]选择3头6月龄杜洛克猪,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、背最长肌、腿肌、比目鱼肌和趾长伸肌组织,利用... [目的]探究长链非编码RNA(lncRNA)MSTRG.14200对猪骨骼肌卫星细胞(PSCs)成肌分化及不同类型肌纤维转化的影响。[方法]选择3头6月龄杜洛克猪,屠宰后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、背最长肌、腿肌、比目鱼肌和趾长伸肌组织,利用实时荧光定量PCR检测MSTRG.14200在不同组织中的表达情况。构建MSTRG.14200过表达载体pcDNA3.1-14200并转染PSCs细胞,诱导分化3 d后收集细胞。通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测肌球蛋白重链(MyHC)、肌细胞生成素(MyoG)和肌分化因子(MyoD)、MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx mRNA和蛋白表达情况;利用免疫荧光法检测MyHC、MyHCⅠ和MyHCⅡb阳性细胞比率。[结果]MSTRG.14200在杜洛克猪不同组织中均有表达,且在背最长肌中表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),在趾长伸肌和比目鱼肌中的表达量存在显著差异(P<0.05)。过表达MSTRG.14200后,细胞分化相关基因MyoD和MyHC的mRNA水平极显著升高(P<0.01),MyoD、MyoG和MyHC蛋白水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),MyHC阳性细胞比率极显著升高(P<0.01);肌纤维类型转化相关基因MyHCⅠ的mRNA和蛋白表达量及阳性细胞比例率均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),MyHCⅡb基因mRNA和蛋白表达量以及阳性细胞比率均显著升高(P<0.05)。[结论]MSTRG.14200具有促进猪骨骼肌成肌分化以及促进慢肌纤维向快肌纤维转化的作用。研究结果为探究猪骨骼肌纤维类型转化的分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 长链编码rna(lncrna) MSTRG.14200 成肌分化 肌纤维转化
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糖基化终末产物刺激下长链非编码RNA H19通过WNT/β-catenin信号通路调控MC3T3细胞骨向分化
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作者 邓超 强诗雨 +3 位作者 马一凡 阮晓旭 孙翼 李雪雪 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期765-769,共5页
目的:探究长链非编码RNA H19(LncRNA H19)在糖基化终末产物(AGEs)刺激下对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的调控作用及其可能的机制。方法:10μg/mL AGEs浓度刺激下培养MC3T3-E1细胞,7 d后碱性磷酸酶染色、21 d后茜素红染色观察细胞矿... 目的:探究长链非编码RNA H19(LncRNA H19)在糖基化终末产物(AGEs)刺激下对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的调控作用及其可能的机制。方法:10μg/mL AGEs浓度刺激下培养MC3T3-E1细胞,7 d后碱性磷酸酶染色、21 d后茜素红染色观察细胞矿化情况;RT-PCR检测细胞中ALP、Runx-2、OCN、SP7以及LncRNA H19 mRNA的表达水平,Western blotting检测细胞中Runx-2蛋白表达水平;采用细胞转染技术过表达LncRNA H19,RT-PCR检测LncRNA H19的转染效率;并检测转染LncRNA H19后细胞中骨基因的表达水平、ALP染色情况以及β-catenin的表达情况。结果:AGEs刺激下MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶染色变浅、钙化结节形成减少,ALP、Runx-2、OCN、SP7、LncRNA H19基因表达水平降低(P<0.05),Runx-2蛋白水平表达下降;转染过表达LncRNA H19(lv-H19)后,LncRNA H19表达水平显著上调(P<0.05),ALP、Runx-2、OCN、SP7基因表达水平上升(P<0.05),碱性磷酸酶染色变深,β-catenin的表达增加。结论:AGEs刺激下,LncRNA H19可能通过WNT/β-catenin的表达影响了MC3T3-E1细胞的骨向分化。 展开更多
关键词 糖基化终末产物 长链编码rna H19 小鼠前成骨细胞 骨向分化
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长链非编码RNA与细胞多向分化 被引量:5
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作者 卢旱云 左长清 吴铁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期746-751,共6页
本文重点概述LncRNA参与细胞分化的相关机制,列举了LncRNA在不同细胞系中参与调控的各种作用方式,如LncRNA参与维持胚胎干细胞多潜能状态、胚胎干细胞分化、神经细胞分化、肌肉分化、表皮细胞分化、成骨细胞分化、脂肪生成的机制等.
关键词 长链编码rna 细胞分化 机制
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长链非编码RNA调控神经干细胞分化的研究进展 被引量:3
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作者 胡国文 周翔 +1 位作者 汪泱 邓志锋 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1087-1091,共5页
长链非编码RNAs(lncRNA)是一类转录本长度在200至数千个核苷酸且不表现任何蛋白质编码潜能的非编码RNAs(ncRNA),它是ncRNAs家族中最大的一类。多项研究表明lncRNAs可以通过一系列机制在表观遗传水平、转录水平及转录后水平对基因表达进... 长链非编码RNAs(lncRNA)是一类转录本长度在200至数千个核苷酸且不表现任何蛋白质编码潜能的非编码RNAs(ncRNA),它是ncRNAs家族中最大的一类。多项研究表明lncRNAs可以通过一系列机制在表观遗传水平、转录水平及转录后水平对基因表达进行调控。而越来越多的研究发现lncRNAs在中枢神经系统的发育中起着重要的作用。某些类型的lncRNAs可以调控神经干细胞(NSCs)定向分化为神经元,而另外一些类型的lncRNAs可以调控NSCs向胶质细胞分化。文章就lncRNAs调控NSCs分化的研究新进展进行综述,以期为研究神经系统发育提供新的思路。 展开更多
关键词 长链编码rnas 神经干细胞 细胞分化
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宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA CCAT1的表达水平及意义 被引量:2
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作者 王圣坦 朱根海 +4 位作者 纪武 洪澜 王雁 陈春英 王康 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期583-587,593,共6页
目的:研究宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2015年1月至2017年6月接受宫颈癌根治术的48例宫颈癌患者的癌组织、对应癌旁正常组织(距癌<3 cm)以... 目的:研究宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2015年1月至2017年6月接受宫颈癌根治术的48例宫颈癌患者的癌组织、对应癌旁正常组织(距癌<3 cm)以及人正常宫颈鳞状细胞系ECT1/E6E7、宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达,并分析其临床意义;应用小分子RNA(siRNA)分别转染人宫颈癌细胞系Hela、C33A,构建CCAT1低表达细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞周期,蛋白印迹(Western blot)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞中RAS相关区域家族1A蛋白(RASSF1A)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。结果:与癌旁正常组织相比,人宫颈癌组织中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);与正常宫颈细胞ECT1/E6E7相比,宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);TMN分期较晚、肿瘤大、有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中CCAT1相对表达量更高(P<0.05);不同年龄、分化程度患者中CCAT1的表达无显著性差异(P>0.05);与siRNA-NC组相比,转染siRNA-CCAT1的Hela、C33A细胞中CCAT1、细胞增殖活性、cyclin D1蛋白的表达显著降低,RASSF1A蛋白的表达显著升高。结论:CCAT1的表达上调与宫颈癌发生发展密切相关,沉默CCAT1的表达会抑制宫颈癌细胞的增殖,可能与上调RASSF1A的表达、下调cyclin D1的表达有关。 展开更多
关键词 宫颈癌组织 HELA C33A 长链编码rna 肠癌相关转录因子1
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DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)下调MMP2表达抑制人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移 被引量:1
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作者 吴凯 刘圆 +3 位作者 张辉 王艳华 张慧萍 姜怡邓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期736-742,共7页
目的探讨DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)通过调控迁移相关因子基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达对人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移的影响。方法收集子痫前期(PE)患者和正常孕妇的胎盘组织(对照组)各20例,Masson染色观察胎盘组织结构改变,... 目的探讨DNA损伤诱导的长链非编码RNA(DINO)通过调控迁移相关因子基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达对人绒毛膜滋养层细胞侵袭与迁移的影响。方法收集子痫前期(PE)患者和正常孕妇的胎盘组织(对照组)各20例,Masson染色观察胎盘组织结构改变,免疫荧光组织化学染色检测胎盘组织滋养层细胞MMP2的表达;实时荧光定量PCR检测DINO的表达;将HTR-8/SVneo人绒毛膜滋养层细胞转染DINO小干扰片段(si-DINO)后,实时荧光定量PCR验证DINO、MMP2 mRNA表达,Western blot法检测MMP2蛋白表达;Transwell^(TM)侵袭实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭、迁移情况。结果与对照组相比,PE患者血压、蛋白尿水平明显增高;胎盘组织可见纤维素样坏死,绒毛膜绒毛减少;免疫荧光显示胎盘滋养层细胞MMP2表达减弱、DINO表达增加;转染si-DINO后,DINO表达降低,而MMP2 mRNA及蛋白表达增加,HTR-8/SVneo细胞侵袭和迁移能力显著增加。结论DINO下调MMP2表达,抑制胎盘滋养层细胞的侵袭与迁移。 展开更多
关键词 子痫前期 DNA损伤诱导长链编码rna(DINO) 基质金属蛋白酶2(MMP2) 侵袭 迁移
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KCNQ1OT1靶向miR-218对脂多糖诱导的人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响
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作者 王思青 张茂奇 +1 位作者 胡婷婷 叶芳 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第6期559-564,共6页
目的探究KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)靶向miR-218对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖和成骨分化的影响。方法体外培养hPDLSC,随机分为hPDLSC组、LPS组、pcDNA-KCNQ1OT1组、pcDNA组、miR-218组、miR-NC组。观察各组细胞增殖... 目的探究KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)靶向miR-218对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖和成骨分化的影响。方法体外培养hPDLSC,随机分为hPDLSC组、LPS组、pcDNA-KCNQ1OT1组、pcDNA组、miR-218组、miR-NC组。观察各组细胞增殖和茜素红染色情况,分别检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,KCNQ1OT1和miR-218表达水平,白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,以及细胞中骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨形态发生蛋白2(BMP2)表达水平。双萤光素酶实验验证KCNQ1OT1和miR-218的关系。结果LPS组与hPDLSC组相比,miR-218组与pcDNA-KCNQ1OT1组相比,细胞增殖率、ALP活性、KCNQ1OT1以及OPN、OCN、RUNX2、BMP2表达水平降低,miR-218表达水平以及IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05);pcDNA-KCNQ1OT1组与LPS组相比,细胞增殖率、ALP活性、KCNQ1OT1以及OPN、OCN、RUNX2、BMP2表达水平升高,miR-218表达水平以及IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05)。hPDLSC组、pcDNA-KCNQ1OT1组、miR-NC组钙化结节较多,为暗红色,LPS组、pcDNA组、miR-218组暗红色钙化结节较少。KCNQ1OT1和miR-218间有靶向关系。KCNQ1OT1-WT+miR-218组萤光素酶活性低于KCNQ1OT1-WT+miR-NC组(P<0.05)。结论KCNQ1OT1能够下调miR-218,促进LPS诱导的hPDLSC的增殖和成骨分化。 展开更多
关键词 长链编码rna KCNQ1重叠转录物1 MIR-218 人牙周膜干细胞 成骨分化 脂多糖
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长链非编码RNA BC200在非小细胞肺癌患者组织中的表达及作用 被引量:8
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作者 孟腾 徐美林 +2 位作者 耿华 王菁 高国政 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期223-227,共5页
目的:分析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)BC200在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达情况,并探讨其临床意义及其与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、N-... 目的:分析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)BC200在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达情况,并探讨其临床意义及其与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin及Snail之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测2014年1月至2018年6月天津市胸科医院60例癌组织及60例对应的正常肺组织中BC200表达情况,40例癌组织及40例正常肺组织中E-cadherin、N-cadherin及Snail m RNA表达水平,统计分析NSCLC中BC200与E-cadherin、N-cadherin及Snail m RNA表达水平以及两者的相关性,分析BC200与临床病理特征(性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型水平)的关系,应用受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线鉴别诊断NSCLC的效能;采用免疫组织化学法检测E-cadherin、N-cadherin及Snail蛋白在40例NSCLC组织及20例正常肺组织中表达情况,分析其与BC200表达情况的关系。结果:1)肺癌组织中的BC200、N-cadherin及Snail m RNA的表达水平显著高于正常肺组织中的表达水平(P<0.05),E-cadherin m RNA的表达量低于正常肺组织(P<0.05);2)E-cadherin、N-cadherin及Snail在NSCLC组织中阳性表达率分别为40.0%(16/40)、57.5%(23/40)、57.5%(23/40),在正常肺组织中的阳性表达率为95%(19/20)、5%(1/20)、10%(2/20),表达差异具有统计学意义(P<0.05);3)肺癌组织中BC200的高表达与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关(P<0.05),BC200的表达与E-cadherin m RNA的表达呈负相关(r=-0.31,P<0.05),与Snail、N-cadherin m RNA的表达呈正相关(r=0.305、r=0.257,P<0.05);4)ROC曲线分析表明,组织lnc RNA表达水平对NSCLC的诊断敏感度和特异度均较满意。结论:BC200在NSCLC组织中高表达,且与淋巴结转移、临床分期、E-cadherin、N-cadherin及Snail阳性率相关,BC200的表达与E-cadherin m RNA的表达呈负相关,与Snail、N-cadherin m RNA的表达呈正相关,提示BC200可能通过上皮间质转化调节肺癌细胞侵袭和迁移能力。在NSCLC诊断上,lncRNA BC200水平有较高的价值,可考虑作为NSCLC诊断的潜在标记物。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 组织 长链编码rna BC200
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胃癌患者癌组织及血浆中长链非编码RNAXIST的表达与临床意义 被引量:3
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作者 李江 史征 +3 位作者 罗天航 聂明明 袁士杰 毕建威 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1403-1409,共7页
目的探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA-XIST)在胃癌患者癌组织和血浆中的表达水平及其临床意义。方法收集2017年2月至7月于第二军医大学长海医院就诊的40例胃癌患者手术切除的胃癌组织及癌旁组织标本,抽取同期90例胃癌患者的术前血浆样本... 目的探讨长链非编码RNA XIST(lncRNA-XIST)在胃癌患者癌组织和血浆中的表达水平及其临床意义。方法收集2017年2月至7月于第二军医大学长海医院就诊的40例胃癌患者手术切除的胃癌组织及癌旁组织标本,抽取同期90例胃癌患者的术前血浆样本和90例健康体检者血浆样本。利用实时定量PCR(qPCR)检测上述标本中lncRNA-XIST的表达水平。采用非参数检验分析lncRNA-XIST表达水平与胃癌患者临床病理参数(年龄、性别、TNM分期、肿瘤最大径、淋巴结转移、分化程度、Ki-67阳性率)的关系。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价lncRNA-XIST在诊断胃癌时的效能。结果胃癌组织中lncRNA-XIST表达较癌旁组织升高,胃癌患者血浆lncRNAXIST表达高于健康体检者,差异均有统计学意义[0.150(0.094,0.247)vs 0.085(0.041,0.193)、0.189(0.119,0.256)vs 0.144(0.095,0.180),P均<0.05]。胃癌组织及血浆中的lncRNA-XIST表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移、分化程度相关(癌组织:Z=3.147、2.729、2.393,血浆:Z=2.769、2.431、2.144;P均<0.05)。血浆lncRNAXIST诊断胃癌ROC曲线下面积(AUC)为0.753(95%CI:0.681~0.825,P<0.001),截断(cut-off)值为0.197时灵敏度为51.1%、特异度为95.6%;诊断TNMⅠ~Ⅱ期胃癌AUC为0.694(95%CI:0.592~0.796,P<0.01),灵敏度为38.5%,特异度为95.6%;均高于癌胚抗原(CEA)和糖类抗原(CA)19-9、CA72-4单独及联合检测。结论 lncRNAXIST在胃癌组织及胃癌患者血浆中表达升高,可能是胃癌的一个潜在的肿瘤标志物。 展开更多
关键词 长链编码rna lncrna-XIST 胃肿瘤 血浆 组织
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人骨髓间充质干细胞成骨分化早期相关的长链非编码RNA的初步研究 被引量:4
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作者 胡伟涛 赵建江 +5 位作者 孙翔 贾搏 韩久松 邱小玲 褚洪星 郑相淮 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期384-389,共6页
【目的】筛选与人骨髓间充质干细胞(h MSC)成骨分化早期相关的长链非编码RNA(lnc RNA),分析其对于h MSC成骨分化早期的影响。【方法】将成骨诱导分化7 d前后的h MSC作为研究对象,利用Agilent lnc RNA芯片技术筛选出成骨诱导分化前后表... 【目的】筛选与人骨髓间充质干细胞(h MSC)成骨分化早期相关的长链非编码RNA(lnc RNA),分析其对于h MSC成骨分化早期的影响。【方法】将成骨诱导分化7 d前后的h MSC作为研究对象,利用Agilent lnc RNA芯片技术筛选出成骨诱导分化前后表达量具有2倍差异的lnc RNA,选取其中1条表达量差异较大的lnc RNA利用UCSC Genome Browser分析此lnc RNA邻近蛋白编码基因。【结果】h MSC经过成骨分化诱导7 d后具有明显成骨细胞特征;Agilent lnc RNA芯片技术筛选结果表明,h MSC成骨分化诱导7 d后表达上调的lnc RNA有923条,表达下调的有993条;选择表达上调中表达量差异较大的1条lnc RNA ENST00000585537.1,UCSC Genome Browser生物信息学分析显示其与MAPK蛋白相关。【结论】h MSC成骨分化诱导7 d后lnc RNA表达发生改变,部分表达差异较大的lnc RNA可能通过与相关蛋白编码基因联系影响h MSC的早期成骨分化功能。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 成骨分化早期 长链编码rna 生物信息学分析
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长链非编码RNA-ANCR对小鼠血管平滑肌细胞成骨样分化的影响 被引量:4
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作者 陈秀鹃 孙琳 +5 位作者 张正军 李懂 宋敏 王娜 张波 梁秋华 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 2017年第3期252-259,共8页
目的观察长链非编码RNA-抗分化非编码RNA(anti-differentiation non-coding RNA,ANCR)对动脉钙化细胞模型的影响,探讨其可能的作用机制。方法以10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠(beta-glycerophosphate,β-GP)诱导小鼠血管平滑肌细胞(vascular sm... 目的观察长链非编码RNA-抗分化非编码RNA(anti-differentiation non-coding RNA,ANCR)对动脉钙化细胞模型的影响,探讨其可能的作用机制。方法以10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠(beta-glycerophosphate,β-GP)诱导小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)成骨样分化以建立动脉钙化细胞模型,构建ANCR过表达慢病毒载体并感染小鼠VSMCs,q PCR检测Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2),骨形成蛋白-2(bone morphology protein-2,BMP-2)和ANCR的表达,Western blot检测胞质蛋白Runx2、BMP-2及核内核转录因子-Kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65的表达,茜素红染色观察矿化结节的形成。结果 (1)β-GP刺激后小鼠VSMCs中Runx2和BMP-2的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),茜素红染色可见明显的矿化结节。(2)β-GP刺激后小鼠VSMCs中ANCR的表达显著降低,Runx2和BMP-2的mRNA表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)ANCR过表达慢病毒感染后与对照组相比,Runx2和BMP-2的mRNA水平和蛋白水平均显著下降,NF-κBp65的蛋白表达显著降低,钙化结节形成显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ANCR能抑制Runx2和BMP-2的表达,且可能通过削弱NF-κB信号通路抑制β-GP诱导的小鼠VSMCs成骨样分化。 展开更多
关键词 动脉钙化 血管平滑肌细胞 成骨样分化 长链编码rna 核转录因子-KAPPA B
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长链非编码RNA-MIAT在转化生长因子β2诱导的晶状体上皮-间质转化中的作用 被引量:4
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作者 岳秀娟 苏胜 +3 位作者 王丽媛 吕嘉 王林 刘平 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期508-513,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)-心肌梗死相关转录物(MIAT)在转化生长因子β2(TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(LECs)纤维化过程中的作用及其对后发性白内障形成的影响。 方法对LECs永生系SRA01/04细胞进行培养,将培养的细胞... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)-心肌梗死相关转录物(MIAT)在转化生长因子β2(TGF-β2)诱导的晶状体上皮细胞(LECs)纤维化过程中的作用及其对后发性白内障形成的影响。 方法对LECs永生系SRA01/04细胞进行培养,将培养的细胞分为正常对照组和TGF-β2组,分别用DMEM培养液和含10 ng/ml TGF-β2DMEM培养液培养48 h,光学显微镜下观察TGF-β2诱导的各组细胞形态学变化,采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测细胞中MIAT及上皮-间质转化(EMT)相关标志物E-钙黏素(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和胶原蛋白Ⅰ(CollⅠ)蛋白及其mRNA相对表达量变化;分别用siRNA空载体和siRNA-MIAT转染DMEM培养的(siNRA空载体组、siRNA-MIAT转染组)或用含10 ng/ml TGF-β2 DMEM培养的(siNRA+TGF-β2组、siRNA-MIAT+TGF-β2组)SRA01/04细胞48 h,光学显微镜下观察各组细胞形态学变化,采用实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测细胞中MIAT、E-cad、α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA的表达变化。结果正常对照组培养细胞呈圆形和多角形,TGF-β2诱导组细胞呈长梭形。与正常对照组比较,TGF-β2诱导组细胞中MIAT mRNA、α-SMA mRNA和CollⅠmRNA相对表达量明显升高(2.497±0.644 vs.0.827±0.062;2.951±0.146 vs.1.085±0.517;2.115±0.090 vs.1.002±0.088),而E-Cad mRNA相对表达量明显下降(0.102±0.027 vs.1.020±0.262),差异均有统计学意义(P=0.045、0.004、0.000、0.025),上述因子的蛋白水平表达趋势与mRNA相同。与siRNA空载体组比较,siRNA-MIAT转染组均能明显下降细胞内MIAT含量,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。与siRNA+TGF-β2组比较,siRNA-MIAT+TGF-β2组细胞中α-SMA、CollⅠ蛋白及其mRNA相对表达量均明显下降,差异均有统计学意义(均P〈0.01),E-cad蛋白及其mRNA相对表达量明显增加,差异有统计学意义(P=0.008、0.000)。结论MIAT参与TGF-β2诱导的SRA01/04细胞EMT过程,下调MIAT可抑制晶状体上皮-间质转化的发生。 展开更多
关键词 心肌梗死相关转录物 长链编码rna 晶状体上皮细胞 上皮-间质转分化 后发性白内障
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长链非编码RNA介导Wnt/β-catenin信号通路调控骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量:4
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作者 袁灵青 颜春鲁 +8 位作者 安方玉 金华 蒋国凤 石瑶 王嘉玉 吕栋辉 赵延真 郑文瑞 车文轩 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第3期296-303,共8页
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种以骨密度降低,骨微结构破坏,而引起骨脆性和骨折风险增加的代谢性骨病。在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的定向分化中,成骨与成脂之间分化的比例失衡可能是骨质疏松症... 骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种以骨密度降低,骨微结构破坏,而引起骨脆性和骨折风险增加的代谢性骨病。在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的定向分化中,成骨与成脂之间分化的比例失衡可能是骨质疏松症发生的主要发病机制。而在BMSCs定向分化为成骨细胞的过程中,长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)介导的Wnt/β-catenin信号通路对其起着非常重要的调控作用。鉴于此,本文主要围绕LncRNA介导的Wnt/β-catenin信号通路对BMSCs定向成骨分化的分子调控机制进行综述,以期为临床骨质疏松防治药物有效靶点的筛选提供新的思路。 展开更多
关键词 长链编码rna WNT/Β-CATENIN 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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长链非编码RNA调节成骨分化的研究进展 被引量:5
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作者 庞新岗 包倪荣 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第11期1216-1221,共6页
骨髓间充质干细胞是成骨细胞的主要来源,由于其成骨分化潜能而被视作骨修复、骨再生的种子细胞。促进骨髓间充质干细胞成骨分化、增加骨形成能力为骨质疏松的治疗提供可能。长链分编码RNA(lncRNA)被证实能够在转录及转录后水平调节编码... 骨髓间充质干细胞是成骨细胞的主要来源,由于其成骨分化潜能而被视作骨修复、骨再生的种子细胞。促进骨髓间充质干细胞成骨分化、增加骨形成能力为骨质疏松的治疗提供可能。长链分编码RNA(lncRNA)被证实能够在转录及转录后水平调节编码基因的表达,并参与细胞分化、个体发育等重要过程,其异常表达与包括骨质疏松在内的多种疾病的发生密切相关。文章围绕lncRNA的研究进行综述,以期为干预成骨分化、促进骨形成、治疗骨质疏松提供新的靶点。 展开更多
关键词 长链编码rna 成骨分化 调控机制
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冷刺激小鼠脂肪组织差异表达长链非编码RNA的初步研究 被引量:1
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作者 黄素娟 陶聪 +7 位作者 甄二东 王亚君 魏刚 白立景 杨述林 王彦芳 李奎 敖红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期2867-2872,共6页
脂肪组织主要有白色脂肪组织(WAT)和褐色脂肪组织(BAT)两种类型;WAT储存能量,BAT通过特异性表达解耦联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)消耗能量产热。与BAT不同,WAT具有很强的可塑性,在寒冷刺激下,呈现褐色脂肪表型、获得褐色脂肪的... 脂肪组织主要有白色脂肪组织(WAT)和褐色脂肪组织(BAT)两种类型;WAT储存能量,BAT通过特异性表达解耦联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)消耗能量产热。与BAT不同,WAT具有很强的可塑性,在寒冷刺激下,呈现褐色脂肪表型、获得褐色脂肪的产热活性("褐色化")。根据对冷刺激组(6℃)和对照组(28℃)小鼠的肩胛区褐色脂肪组织(iBAT)和皮下白色脂肪组织(sWAT)的RNA转录组测序分析结果,初步筛选出1个差异明显的长链非编码RNA(lncRNA-6030408B16Rik)。通过qRT-PCR检测lncRNA-6030408B16Rik在野生型小鼠的脾脏、肌肉、肾脏、十二指肠、大脑、肝脏、sWAT和iBAT中的表达;24只雄性C57BL/6野生型小鼠随机分成冷刺激组(6℃)和对照组(28℃),两组小鼠分别在6和28℃环境下处理10d,分别采集两组的iBAT和sWAT;并分离出生1d的野生型小鼠褐色前脂肪细胞,诱导分化后,收集0、1、3、5d的细胞,检测UCP1基因和lncRNA-6030408B16Rik在分化过程中的时空表达。qRT-PCR结果显示iBAT和sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量均明显高于其他组织;与对照组相比,冷刺激组iBAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量极显著上调(P<0.01),冷刺激组sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量显著上调(P<0.05);前脂肪细胞诱导分化的过程中,lncRNA-6030408B16Rik的表达量呈先上调后下调的趋势。lncRNA-6030408B16Rik在脂肪组织中特异性高表达。lncRNA-6030408B16Rik可能对白色脂肪组织"褐色化"及褐色前脂肪细胞的分化具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 小鼠 白色脂肪组织 褐色脂肪组织 前脂肪细胞分化 长链编码rna
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长链非编码RNAs与细胞分化 被引量:3
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作者 吴文桢 王开娟 王家伟 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第10期1127-1130,共4页
随着遗传学及生物信息学技术的快速发展,曾被称为转录"噪音"的长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)越来越受到学者们的广泛关注。研究发现,LncRNAs在生物体各种生命活动中具有重要的调节作用,其对基因表达的调控作... 随着遗传学及生物信息学技术的快速发展,曾被称为转录"噪音"的长链非编码RNAs(Long non-coding RNAs,LncRNAs)越来越受到学者们的广泛关注。研究发现,LncRNAs在生物体各种生命活动中具有重要的调节作用,其对基因表达的调控作用已成为生命科学研究的热点问题。研究证实,LncRNAs通过信号分子、诱饵分子、引导分子、支架分子等方式,对遗传、转录及转录后等进行水平调控,如细胞分化等生物学过程。本文就LncRNAs与细胞分化的关系作一综述,包括LncRNAs与多能干细胞多能性的维持及分化、与神经细胞分化、与肌肉分化、与成骨细胞分化的机制,以及LncRNAs与口腔鳞状细胞癌的关系。 展开更多
关键词 长链编码rnas 细胞分化 机制
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非编码RNA在人牙周膜来源细胞成骨分化中的作用 被引量:2
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作者 温佳慧 吴燕岷 陈莉丽 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期330-337,共8页
人牙周膜来源细胞是牙周再生的重要种子细胞,其成骨潜能密切影响牙槽骨修复和牙周再生。非编码RNA(ncRNA)积极参与调控人牙周膜来源细胞的成骨基因,其主要包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)等。本文就ncRNA... 人牙周膜来源细胞是牙周再生的重要种子细胞,其成骨潜能密切影响牙槽骨修复和牙周再生。非编码RNA(ncRNA)积极参与调控人牙周膜来源细胞的成骨基因,其主要包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA)等。本文就ncRNA在人牙周膜来源细胞成骨分化的调控靶点、作用通路及发挥功能的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 微小rna 长链编码rna 环状rna 牙周膜细胞 牙周膜干细胞 成骨分化
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