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同源重组法构建副干酪乳杆菌组氨酸蛋白激酶基因缺失突变株 被引量:3
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作者 岳元春 王洋 +3 位作者 由田 高冬妮 平文祥 葛菁萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期15-20,共6页
构建副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)组氨酸蛋白激酶prcK基因缺失突变株,为prcK基因功能研究提供实验工具。采用同源重组技术构建质粒p KLKRT(含prcK::Tet^r基因),将其电转化进入L.paracaseiHD1.7中,使prcK::Tet^r基因同源重组到... 构建副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)组氨酸蛋白激酶prcK基因缺失突变株,为prcK基因功能研究提供实验工具。采用同源重组技术构建质粒p KLKRT(含prcK::Tet^r基因),将其电转化进入L.paracaseiHD1.7中,使prcK::Tet^r基因同源重组到L.paracasei HD1.7的染色体上,通过四环素耐药、氨苄青霉素敏感等特性筛选出含有prcK::Tet^r基因的新L.paracasei HD1.7。结果表明,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证及酶切验证后确定质粒p KLKRT构建成功,并成功转化入L.paracasei HD1.7中,经PCR确认L.paracasei HD1.7 prcK基因缺失突变株构建成功。该突变株产生的细菌素效价比出发菌株低23.61%。采用同源重组方法成功构建L.paracasei HD1.7 prcK基因缺失突变株,为研究L.paracasei HD1.7群体效应相关基因的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 副干酪乳杆菌 细菌素 组氨酸蛋白激酶基因 同源重组
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