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Notch1基因转染对人肝癌细胞Hep3B生长的影响及作用机制的研究 被引量：3
1
作者 齐润姿 厉永建 +3 位作者 安华章 于益芝 杨小妍 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第3期180-184,共5页
目的 :研究逆转录病毒介导的Notch1(ICN)基因转染对人肝癌细胞生长的影响 ,并对其作用机制进行了探讨。方法 :采用磷酸钙沉淀法质粒共转染 2 93T细胞 ,制备出表达组成性活化形式的Notch1(ICN)和 /或绿色荧光蛋白 (GFP)的逆转录病毒载体M... 目的 :研究逆转录病毒介导的Notch1(ICN)基因转染对人肝癌细胞生长的影响 ,并对其作用机制进行了探讨。方法 :采用磷酸钙沉淀法质粒共转染 2 93T细胞 ,制备出表达组成性活化形式的Notch1(ICN)和 /或绿色荧光蛋白 (GFP)的逆转录病毒载体MSCV ICN/GFP及对照逆转录病毒载体MSCV GFP ,并检测病毒滴度。用逆转录病毒感染人肝癌细胞Hep3B ,观察病毒的感染效率 ,MTT比色法测定瞬时表达Notch1(ICN)对Hep3B人肝癌细胞生长的影响 ,利用流式细胞仪分析细胞周期分布的变化 ,Westernblot方法检测细胞周期调控蛋白的变化。结果 :通过质粒共转染可获得具有较高滴度的重组逆转录病毒。MTT比色法显示瞬时表达Notch1(ICN)基因可以抑制人肝癌细胞Hep3B的生长 ,瞬时表达Notch1(ICN)基因可使Hep3B细胞周期停滞在G0 /G1期并上调细胞周期调控蛋白P5 3的表达水平。结论 :Notch1基因可通过影响细胞周期分布和P5 3蛋白的表达水平而抑制人肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 肝癌细胞 组成性活化形式的notchl(icn) 重组逆转录病毒载体 生长 细胞周期
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