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利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究被引量：7: 1; 作者张玉兰柯晓静 +4 位作者郭红敏谷新晰田洪涛郭兴华罗云波《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期71-76,共6页; 为了探明乳酸菌电转化的最适条件,提高电转化效率,本试验以大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,以乳酸乳球菌ML23为受体,利用电转化方法研究了受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电场强度、复苏培养基组成与复苏培养... 展开更多; 关键词乳酸乳球菌ML23 组成型表达载体质粒pMG36e 电转化电转化效率; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析被引量：4: 2; 作者潘丽张永光 +8 位作者王永录王宝琴王文秀方玉珍蒋守田张维德董金杰吕建亮谢庆阁《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期841-844,905,共5页; 目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 O/China/99株多基因植物组成型表达载体基因序列可饲疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

植物乳杆菌高表达组成型表达载体构建: 3; 作者王雪尚晓敏 +1 位作者李桂玲刘琼《吉林畜牧兽医》 2018年第5期6-8,11,共4页; 乳酸菌宿主对表达载体的启动子具有高度的选择性,本研究利用PCR技术扩增嗜酸乳杆菌表面蛋白SlpA基因启动子,以诱导型表达载体pSIP409为基本框架删除其诱导型启动子,采用能快速连接的无缝克隆技术将SlpA基因启动子连接到gusA基因上游,获... 展开更多; 关键词嗜酸乳杆菌启动子组成型表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种酿酒酵母组成型分泌表达载体的构建及应用: 4; 作者王国平欧阳蓓 +2 位作者胡紫艳刘启铃赵喜华《江西师范大学学报(自然科学版)》北大核心 2024年第5期509-513,共5页; 该文利用重叠延伸PCR和无缝分子克隆技术构建酿酒酵母组成型分泌表达载体pYAT21,该载体由酿酒酵母组成型分泌表达组件(翻译延伸因子1组成型启动子、α因子N-末端分泌信号肽DNA序列和乙醇脱氢酶2终止子所组成)、2μ复制子、大肠杆菌复制... 展开更多; 关键词酿酒酵母组成型分泌表达载体异源蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

细菌素Bacteriocin E50-52(H)基因设计及其毕赤酵母表达载体构建被引量：2: 5; 作者余占桥马青山 +1 位作者韩冰张日俊《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期77-79,共3页; 设计及合成细菌素Bacteriocin E50-52(H)基因,克隆到组成型分泌表达质粒pGAPZαA中构建重组质粒pGAPZα-Bacteriocin E(H),经PCR、测序验证正确后,电转化整合到毕赤酵母基因组,基因组PCR、测序验证结果表明成功构建了细菌素组成型重组... 展开更多; 关键词 BacteriocinE50-52 基因设计毕赤酵母组成型表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

产白藜芦醇大肠杆菌基因工程菌的构建被引量：5: 6; 作者梁景龙郭丽琼 +2 位作者孙萍林俊芳何杨《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期138-142,共5页; 利用降落重叠延伸PCR和连接酶连接的方法,构建了组成型表达载体pMD18-VvRs-At4cl,该表达载体带有大肠杆菌甘油醛三磷酸脱氢酶启动子(pGAP),拟南芥(Arabidopsis thalianna)4-香豆酸辅酶A连接酶(At4CL)基因和葡萄(Vitis vinifera)白藜芦... 展开更多; 关键词白藜芦醇大肠杆菌原核表达 pGAP 组成型表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究被引量：7: 1; 作者张玉兰柯晓静郭红敏谷新晰田洪涛郭兴华罗云波; 机构河北农业大学食品科技学院河北农业大学研究生学院中国科学院微生物研究所中国农业大学食品科技与营养工程学院; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期71-76,共6页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2006AA10Z317); 文摘为了探明乳酸菌电转化的最适条件,提高电转化效率,本试验以大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,以乳酸乳球菌ML23为受体,利用电转化方法研究了受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电场强度、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响。结果表明:含2%甘氨酸和0.5 mol/L蔗糖的MRS培养基培养至对数生长中期的细胞,在电场强度11.0 kV/cm、电阻200Ω、电容25μF下电击转化,转化后细胞在SMRS培养基中培养2 h,获得了较高的电转化效率。采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率又提高了15倍以上,达1.05×105CFU/μg DNA。; 关键词乳酸乳球菌ML23 组成型表达载体质粒pMG36e 电转化电转化效率; Keywords Lactococcus lactis ML23 constitutive expression vector plasmid pMG36e electroporation electroporation efficiency; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析被引量：4: 2; 作者潘丽张永光王永录王宝琴王文秀方玉珍蒋守田张维德董金杰吕建亮谢庆阁; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期841-844,905,共5页; 基金 863国家高技术研究发展计划资助(2001AA213071); 文摘目的构建包含FMDV结构蛋白P1、非结构蛋白2A、3C以及部分2B的基因片段P12X3C的植物组成型表达载体,为FMDV可饲疫苗的研制奠定基础。方法通过PCR扩增法,从pGEM/P12A质粒和pGEM/3C质粒中扩增P12A及部分2B基因(P12X)、3C基因,将获得的P12X与3C片段经BamHI/SpeI和SpeI/SalI双酶切后,与经BamHI/SalI双酶切后的pUC18质粒大片段连接,得到重组质粒pUC18/P12X3C,pUC18/P12X3C质粒经BamHI/SalI双酶切后的大片段与经同样双酶切的植物表达载体pBin438连接,转化子经酶切、PCR及测序鉴定后,获得包含FMDV O/China/99株P12X3C片段的植物组成型表达载体pBin438/P12X3C,最后通过三亲交配法,将表达载体pBin438/P12X3C导入农杆菌。结论成功构建FMDV多基因的植物组成型表达载体。; 关键词口蹄疫病毒 O/China/99株多基因植物组成型表达载体基因序列可饲疫苗; Keywords FMDV constitutive-expression vector edible vaccine pBin438 triparental mating; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名植物乳杆菌高表达组成型表达载体构建: 3; 作者王雪尚晓敏李桂玲刘琼; 机构吉林工程技术师范学院食品工程学院; 出处《吉林畜牧兽医》 2018年第5期6-8,11,共4页; 基金吉林省教育厅科技研究项目(2016120) 吉林工程技术师范学院(2016)校科研发展基金项目; 文摘乳酸菌宿主对表达载体的启动子具有高度的选择性,本研究利用PCR技术扩增嗜酸乳杆菌表面蛋白SlpA基因启动子,以诱导型表达载体pSIP409为基本框架删除其诱导型启动子,采用能快速连接的无缝克隆技术将SlpA基因启动子连接到gusA基因上游,获得重组质粒409SlpA电转化至植物乳杆菌NC8中,Western Blot定性测定的gusA表达情况,同时利用MRS-X-gluC培养基特异性显色反应来鉴定阳性重组子表达gusA的活性,为利用该启动子表达外源蛋白研制新型基因工程微生态制剂奠定基础。; 关键词嗜酸乳杆菌启动子组成型表达载体; Keywords Lactobacillus acidophilus promoter constitutive expression vector; 分类号 S572 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种酿酒酵母组成型分泌表达载体的构建及应用: 4; 作者王国平欧阳蓓胡紫艳刘启铃赵喜华; 机构江西师范大学生命科学学院; 出处《江西师范大学学报(自然科学版)》北大核心 2024年第5期509-513,共5页; 基金国家自然科学基金(22068014,21666010)资助项目.; 文摘该文利用重叠延伸PCR和无缝分子克隆技术构建酿酒酵母组成型分泌表达载体pYAT21,该载体由酿酒酵母组成型分泌表达组件(翻译延伸因子1组成型启动子、α因子N-末端分泌信号肽DNA序列和乙醇脱氢酶2终止子所组成)、2μ复制子、大肠杆菌复制元件以及URA3筛选标记所组成.将草酸青霉16的β-葡萄糖苷酶与pYAT21连接并转化到酿酒酵母中,其发酵上清液粗酶活达到106.8 U·mL^(-1).酿酒酵母组成型分泌表达载体pYAT21可应用于异源蛋白的组成型分泌表达.; 关键词酿酒酵母组成型分泌表达载体异源蛋白; Keywords Saccharomyces cerevisiae constitutive secretory expression vector heterologous protein; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细菌素Bacteriocin E50-52(H)基因设计及其毕赤酵母表达载体构建被引量：2: 5; 作者余占桥马青山韩冰张日俊; 机构中国农业大学饲料生物技术实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第4期77-79,共3页; 基金国家自然科学基金(30972124); 文摘设计及合成细菌素Bacteriocin E50-52(H)基因,克隆到组成型分泌表达质粒pGAPZαA中构建重组质粒pGAPZα-Bacteriocin E(H),经PCR、测序验证正确后,电转化整合到毕赤酵母基因组,基因组PCR、测序验证结果表明成功构建了细菌素组成型重组表达载体,为在毕赤酵母中表达奠定了基础。; 关键词 BacteriocinE50-52 基因设计毕赤酵母组成型表达载体; Keywords Bacteriocin E50-52 gene design Pichia pastoris constitutive expression vector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产白藜芦醇大肠杆菌基因工程菌的构建被引量：5: 6; 作者梁景龙郭丽琼孙萍林俊芳何杨; 机构华南农业大学食品学院生物工程系; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期138-142,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31272217 31071837); 文摘利用降落重叠延伸PCR和连接酶连接的方法,构建了组成型表达载体pMD18-VvRs-At4cl,该表达载体带有大肠杆菌甘油醛三磷酸脱氢酶启动子(pGAP),拟南芥(Arabidopsis thalianna)4-香豆酸辅酶A连接酶(At4CL)基因和葡萄(Vitis vinifera)白藜芦醇合酶(VvRS)基因。表达载体转化大肠杆菌BW27784,并通过PCR鉴定和酶切鉴定后,获得重组菌株。对重组菌株进行发酵培养,对发酵液进行HPLC检测,发酵液中白藜芦醇含量为4.51mg/L。这表明,拟南芥的4cl基因与金手指葡萄的rs基因在重组大肠杆菌中成功得到了表达,并且表达产物利用对香豆酸为前体物质合成了白藜芦醇。; 关键词白藜芦醇大肠杆菌原核表达 pGAP 组成型表达载体; Keywords resveratrol Escherichia coli prokaryotic expression pGAP constitutive expression plasmid; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究	张玉兰柯晓静郭红敏谷新晰田洪涛郭兴华罗云波	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	口蹄疫病毒O/China/99株多基因植物组成型表达载体的构建及序列分析	潘丽张永光王永录王宝琴王文秀方玉珍蒋守田张维德董金杰吕建亮谢庆阁	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	植物乳杆菌高表达组成型表达载体构建	王雪尚晓敏李桂玲刘琼	《吉林畜牧兽医》	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种酿酒酵母组成型分泌表达载体的构建及应用	王国平欧阳蓓胡紫艳刘启铃赵喜华	《江西师范大学学报(自然科学版)》北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	细菌素Bacteriocin E50-52(H)基因设计及其毕赤酵母表达载体构建	余占桥马青山韩冰张日俊	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	产白藜芦醇大肠杆菌基因工程菌的构建	梁景龙郭丽琼孙萍林俊芳何杨	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料