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贵州本地山羊线粒体转录因子B2基因5′调控区SNP筛查与生物信息学分析
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作者 谢海强 刘若余 +1 位作者 龚俞 焦仁刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期183-188,共6页
试验旨在筛选线粒体转录因子B2(mitochondrial transcription factor B2,TFB2M)基因启动子区SNP,并研究其对启动子功能元件的影响。选择贵州本地优良品种黔北麻羊、贵州白山羊及贵州黑山羊3种山羊构建不同DNA池,直接测序筛选SNP位点。TF... 试验旨在筛选线粒体转录因子B2(mitochondrial transcription factor B2,TFB2M)基因启动子区SNP,并研究其对启动子功能元件的影响。选择贵州本地优良品种黔北麻羊、贵州白山羊及贵州黑山羊3种山羊构建不同DNA池,直接测序筛选SNP位点。TFB2 M基因5′调控区存在4个SNPs位点,分别为:G-601C、C-381A、C-286T和G-283T。生物信息学软件预测得到TFB2 M基因核心启动子区和CpG岛,SNP位点导致附近大量转录因子新位点产生和原来结合位点消失,但并不改变CpG岛大小。TFB2 M基因5′调控区存在4个对启动子功能元件有较大影响的SNPs位点。本研究结果为进一步确定TFB2 M基因启动子功能奠定基础。 展开更多
关键词 线粒体转录因子b2基因 SNP 启动子 黔北麻羊 贵州白山羊 贵州黑山羊
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贵州白山羊线粒体转录因子B2基因在组织中的表达
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作者 崔治龙 崔真华 +2 位作者 肖旭东 罗卫星 孙岩岩 《贵州农业科学》 CAS 2015年第9期127-129,共3页
为探明线粒体转录因子B2(TFB2 M)基因在贵州白山羊组织中的表达规律,采用实时荧光定量PCR技术测定TFB2 M基因在贵州白山羊心、肝、脾、垂体和下丘脑组织中的表达量。结果表明:目的基因TFB2 M和内参基因β-actin的熔解曲线均呈单一峰形,... 为探明线粒体转录因子B2(TFB2 M)基因在贵州白山羊组织中的表达规律,采用实时荧光定量PCR技术测定TFB2 M基因在贵州白山羊心、肝、脾、垂体和下丘脑组织中的表达量。结果表明:目的基因TFB2 M和内参基因β-actin的熔解曲线均呈单一峰形,说明所选条件可准确定量TFB2 M基因在贵州白山羊各组织中的相对表达量。TFB2 M基因在贵州白山羊心、肝、脾、垂体和下丘脑组织中的相对表达量分别为1、0.5092、3.9228、1.9138和0.6744,表现为脾>垂体>心>下丘脑>肝。 展开更多
关键词 线粒体转录因子b2 Β-ACTIN 实时荧光定量PCR 贵州白山羊
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小尾寒羊TFB2M基因遗传变异分析
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作者 陈晓勇 王薇 +1 位作者 敦伟涛 赵兴波 《现代畜牧兽医》 2016年第2期15-20,共6页
试验旨在分析小尾寒羊线粒体基因转录因子B2(Mitochondrial Transcription Factors B2,TFB2M)基因遗传变异,采集小尾寒羊血液,采用直接测序方法,对该基因8个外显子、5’-UTR和3’-UTR多态位点进行分析。结果发现,编码区错义突变1个(G226... 试验旨在分析小尾寒羊线粒体基因转录因子B2(Mitochondrial Transcription Factors B2,TFB2M)基因遗传变异,采集小尾寒羊血液,采用直接测序方法,对该基因8个外显子、5’-UTR和3’-UTR多态位点进行分析。结果发现,编码区错义突变1个(G226A,GCC→ACC)导致76位苏氨酸变为丙氨酸,5’-UTR发现一处颠换(C58G);3’-UTR有三个突变位点(C98G、A206G和A429T)。生物学软件对启动子和5’-UTR转录因子预测结果显示共有54个转录因子结合位点,5’-UTR 58bp处没有结合位点,因此,该突变并没有改变结合位点。本研究为绵羊TFB2M基因变异及其功能研究奠定了分子生物学基础。 展开更多
关键词 线粒体转录因子b2 小尾寒羊 变异 转录因子
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线粒体转录复合物相关蛋白原核表达与纯化 被引量:1
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作者 刘光 杨瑞锋 +1 位作者 石秉炀 刘德培 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期638-643,共6页
目的获取人线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体转录因子B1(TFB1M)、线粒体转录因子B2(TFB2M)基因片段,高效表达和纯化带有谷胱甘肽转移酶(GST)标签的GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白。方法设计引物扩增得到TFAM、TFB1M、TFB2M的cDN... 目的获取人线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体转录因子B1(TFB1M)、线粒体转录因子B2(TFB2M)基因片段,高效表达和纯化带有谷胱甘肽转移酶(GST)标签的GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白。方法设计引物扩增得到TFAM、TFB1M、TFB2M的cDNA片段,通过引入的酶切位点克隆至表达载体pET42a,构建重组表达载体,并导入E.coliBL21宿主菌中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组的GST融合蛋白,谷胱甘肽琼脂糖珠纯化表达产物,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析鉴定。结果获得pET42a-TFAM、pET42a-TFB1M、pET42a-TFB2M表达质粒,测序结果与GenBank的基因序列一致。SDS-PAGE分析结果显示,重组GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白分别在相对分子质量56 000、67 000、69 000处出现特异性蛋白条带,经GST亲和层析纯化后,得到高纯度的融合蛋白。结论成功构建了基因重组体pET42a-TFAM、pET42a-TFB1M、pET42a-TFB2M,制备了GST-TFAM、GST-TFB1M、GST-TFB2M融合蛋白。 展开更多
关键词 线粒体转录因子A 线粒体转录因子b1 线粒体转录因子b2 融合蛋白 纯化
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