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线粒体受体转位蛋白靶向光动力学治疗对结肠癌的作用 被引量：1
1
作者 肖日姣 廖照辉 +2 位作者 韩赫 魏房 李震 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期699-703,共5页
目的探讨线粒体受体转位蛋白(TSPO)靶向光动力学治疗(PDT)对结肠癌的作用。方法采用免疫组织化学及Western blotting方法检测氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导的小鼠结肠癌组织及14个结肠癌细胞系中TSPO的表达,使用TSPO靶向光敏... 目的探讨线粒体受体转位蛋白(TSPO)靶向光动力学治疗(PDT)对结肠癌的作用。方法采用免疫组织化学及Western blotting方法检测氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导的小鼠结肠癌组织及14个结肠癌细胞系中TSPO的表达,使用TSPO靶向光敏剂IR700DX-6T对14个结肠癌细胞系进行PDT。建立小鼠皮下移植瘤模型,进行PDT。结果免疫组织化学结果显示,小鼠结肠癌组织中TSPO的表达明显高于癌旁正常黏膜组织。Western blotting结果证实14个结肠癌细胞系、AOM/DSS诱导的小鼠结肠癌组织及皮下移植瘤组织中的TSPO表达水平明显高于正常结肠黏膜上皮组织。以TSPO为靶向的PDT (TSPO-PDT)可诱导结肠癌细胞死亡,并呈现明显的时间及浓度依赖性(P <0.01)。动物实验证实TSPO-PDT后原发肿瘤和远端肿瘤的生长速度明显小于对照组(P <0.01)。结论 TSPO在结肠癌细胞系和癌组织中均呈高表达,TSPO-PDT可有效抑制结肠癌细胞生长。 展开更多
关键词 结肠癌 线粒体受体转位蛋白 光动力学治疗
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线粒体内膜转位酶8A基因敲除小鼠的构建及其内耳功能研究
2
作者 洪晗馨 王龙昊 +3 位作者 刘辉辉 彭浒 吴皓 杨涛 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期261-268,共8页
目的·通过构建线粒体内膜转位酶8A (translocase of inner mitochondrial membrane 8A,Timm8a)基因敲除小鼠(即Timm8a^(-/-)小鼠),探究其听力表型及该基因在内耳的功能。方法·设计并构建Timm8a^(-/-)小鼠,采用PCR及蛋白质印迹... 目的·通过构建线粒体内膜转位酶8A (translocase of inner mitochondrial membrane 8A,Timm8a)基因敲除小鼠(即Timm8a^(-/-)小鼠),探究其听力表型及该基因在内耳的功能。方法·设计并构建Timm8a^(-/-)小鼠,采用PCR及蛋白质印迹法(Western blotting)验证是否构建成功。观察并比较1月龄时Timm8a^(-/-)小鼠与野生型(wild type,WT)小鼠的体型及体质量。采用免疫荧光染色观察WT小鼠耳蜗组织中TIMM8A的表达分布。通过听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)比较Timm8a^(-/-)小鼠和WT小鼠的听力阈值。采用甲苯胺蓝染色法观察该2种小鼠内耳螺旋器、螺旋神经节与血管纹形态。通过透射电镜观察该2种小鼠的内耳毛细胞、螺旋神经节细胞与血管纹细胞中的线粒体超微结构,并统计异常线粒体所占比例。结果·PCR结果显示Timm8a基因已成功敲除,Western blotting结果显示Timm8a^(-/-)小鼠的耳蜗、大脑、心肌、骨骼肌组织中已无TIMM8A表达,表明Timm8a^(-/-)小鼠构建成功。免疫荧光染色结果提示TIMM8A在WT小鼠耳蜗组织中呈泛表达,且高表达于螺旋器、螺旋神经节与血管纹区域。与WT小鼠相比,1月龄时的Timm8a^(-/-)小鼠发育较慢,体质量明显偏轻,且ABR阈值有所升高(均P<0.05);该小鼠的ABR的Ⅰ波波幅出现下降、Ⅰ波潜伏期有所延长。甲苯胺蓝染色结果显示,与WT小鼠相比,Timm8a^(-/-)小鼠的螺旋神经节细胞的形态与数量均无明显改变,耳蜗中圈及底圈的血管纹厚度减薄(均P<0.05)。透射电镜的观察结果显示,与WT小鼠相比,Timm8a^(-/-)小鼠内耳毛细胞、螺旋神经节细胞与血管纹细胞中线粒体结构出现异常,且异常线粒体比例明显增多(均P<0.05)。结论·该研究成功构建了Timm8a^(-/-)小鼠,其听力阈值的升高可能与其内耳线粒体超微形态结构异常有关。 展开更多
关键词 线粒体内膜转位酶8A Mohr-Tranebjaerg综合征 听神经病谱系障碍 线粒体
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埃克替尼对ACC-M细胞凋亡的影响
3
作者 杨彩玲 张景航 +2 位作者 任铭新 张应花 崔卫刚 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第5期681-683,共3页
目的:研究埃克替尼对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M细胞凋亡的影响及可能机制。方法:ACC-M细胞分为6组,即对照组,低、中、高剂量(10、20、40μmol/L)埃克替尼组,MnTMPyP组以及MnTMPyP+埃克替尼组。采用MTT法检测各组细胞的活性,Caspase-3... 目的:研究埃克替尼对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M细胞凋亡的影响及可能机制。方法:ACC-M细胞分为6组,即对照组,低、中、高剂量(10、20、40μmol/L)埃克替尼组,MnTMPyP组以及MnTMPyP+埃克替尼组。采用MTT法检测各组细胞的活性,Caspase-3活力检测试剂盒检测Caspase-3蛋白的活力,DCFH-DA荧光探针检测ROS水平,Western blot检测线粒体和胞质MnSOD蛋白的表达。结果:与对照组相比,埃克替尼低、中、高剂量组细胞活性降低,Caspase-3蛋白活力增强,ROS水平升高,线粒体中MnSOD蛋白表达减少,胞质中MnSOD蛋白表达增加(P均<0.05);MnTMPyP能拮抗上述变化(P均<0.05)。结论:埃克替尼可能通过ROS介导的MnSOD线粒体转位诱导ACC-M细胞凋亡。 展开更多
关键词 埃克替尼 线粒体转位 凋亡 活性氧 ACC-M细胞
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蛋白激酶Cδ在6-OHDA诱导大鼠多巴胺能神经元损伤过程中的作用 被引量：2
4
作者 韩飞 夏克明 +3 位作者 杨斌 李成朋 吴昌学 禹文峰 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2021年第3期323-328,共6页
目的:探究蛋白激酶Cδ(PKCδ)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元损伤的影响及其机制。方法:50只2月龄雄性SD大鼠,随机分为对照组(control)和6-羟基多巴胺注射组(6-OHDA)。通过大鼠右侧纹状体注射6-OHDA... 目的:探究蛋白激酶Cδ(PKCδ)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元损伤的影响及其机制。方法:50只2月龄雄性SD大鼠,随机分为对照组(control)和6-羟基多巴胺注射组(6-OHDA)。通过大鼠右侧纹状体注射6-OHDA溶液构建PD模型。运用旋转实验和圆筒实验检测平均旋转速率和右上肢使用率,利用免疫组化染色观察大鼠黑质致密部(SNc)酪氨酸羟化酶(TH)的表达,利用Western Blot检测大鼠SNc部位线粒体中PKCδ和胞质中细胞色素c(Cyt c)及TH的表达情况,通过免疫荧光染色观察PKCδ定位。结果:6-OHDA组大鼠平均旋转速率及右上肢使用率明显增加,TH阳性神经元形态及分布异常且TH蛋白表达减少,线粒体PKCδ表达增多,胞质中Cyt c增多,免疫荧光染色显示PKCδ与线粒体蛋白发生共定位现象。结论:PKCδ可能通过线粒体转移参与调节6-OHDA诱导的大鼠多巴胺能神经元损伤。 展开更多
关键词 蛋白激酶Cδ 线粒体转位 6-羟基多巴胺 帕金森病 大鼠
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