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“五神针”对慢性疲劳大鼠线粒体自噬及骨骼肌中相关蛋白的影响
1
作者 牛骏崴 胡斌 +7 位作者 马巧琳 于冬冬 范宣强 崔家禾 王荣荣 赵蓉蓉 冯婉贞 付佳鑫 《世界中医药》 北大核心 2025年第14期2486-2491,共6页
目的:从线粒体自噬角度观察“五神针”对慢性疲劳模型大鼠的作用机制。方法:将40只无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠随机分为空白组、正常捆绑组、模型组、“五神针”组、非穴对照组,每组8只。除空白组和正常捆绑组外,另3组采用复合... 目的:从线粒体自噬角度观察“五神针”对慢性疲劳模型大鼠的作用机制。方法:将40只无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠随机分为空白组、正常捆绑组、模型组、“五神针”组、非穴对照组,每组8只。除空白组和正常捆绑组外,另3组采用复合因素造模方法制备慢性疲劳大鼠模型,“五神针”组取百会、四神聪,非穴对照组“后神聪”后5 mm取五穴,治疗7 d。正常捆绑组与模型组仅抓取固定不针刺。旷场实验检测大鼠行为能力,蛋白质印迹(WB)检测骨骼肌过氧化物酶体增殖物激活受体α(PGC1-α)、线粒体融合蛋白1(Mfn-1)蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)和核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA表达水平。结果:造模组旷场站立次数、支撑性站立时间、行走总路程高于正常组(P<0.05);治疗后,“五神针”组和非穴对照组的三项行为学指标均较模型组减少(P<0.05);五神针”组和非穴对照组Keap1 mRNA较模型组降低、Nrf2 mRNA及PGC1-α、Mfn-1蛋白表达升高(P<0.05);与“五神针”组比较,非穴对照组三项行为学指标均增加(P<0.05);Keap1 mRNA表达量升高(P<0.05),Nrf2 mRNA及PGC1-α、Mfn-1蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:“五神针”可能通过调控Keap1、Nrf2提高慢性疲劳大鼠抑制氧化应激能力,调控PGC1-α、Mfn-1维持机体线粒体能量代谢,从而起到改善慢性疲劳的作用。 展开更多
关键词 “五神针” 慢性疲劳 线粒体自噬 氧化应激 过氧化物酶体增殖物激活受体Α 线粒体融合蛋白1 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 核因子E2相关因子2
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线粒体分裂融合蛋白表达失衡在IgA肾病小鼠肾脏病理学变化中的作用 被引量：4
2
作者 张旭 刘乃萌 +2 位作者 马娇艳 林楠 孙珉丹 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期284-291,共8页
目的:探讨线粒体分裂融合蛋白表达失衡在IgA肾病(IgAN)小鼠肾脏病理学变化中的作用,为IgAN的治疗提供一定的实验依据。方法:20只健康SPF级雄性BALB/C小鼠,6~8周龄,随机分为对照组和模型组,每组10只。采用牛血清白蛋白(BSA)、脂多糖(LPS... 目的:探讨线粒体分裂融合蛋白表达失衡在IgA肾病(IgAN)小鼠肾脏病理学变化中的作用,为IgAN的治疗提供一定的实验依据。方法:20只健康SPF级雄性BALB/C小鼠,6~8周龄,随机分为对照组和模型组,每组10只。采用牛血清白蛋白(BSA)、脂多糖(LPS)和四氯化碳(CCl_4)联合给药的方式建立小鼠IgAN模型。采用免疫荧光技术检测肾小球中IgA沉积,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织病理形态表现,以评价模型是否构建成功。称量小鼠体质量和肾脏质量,计算各组小鼠肾脏指数;酶活性法检测小鼠血清中肌酐和尿素氮水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测小鼠肾组织中调控线粒体分裂融合的关键基因动力相关蛋白1 (Drp1)、线粒体融合蛋白1 (Mfn1)和线粒体融合蛋白2 (Mfn2) mRNA表达水平,Western blotting法检测小鼠肾组织中Drp1、Mfn1和Mfn2蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠肾小球出现明显的IgA沉积,伴随肾小球萎缩,肾小球系膜细胞和基质增生导致系膜区增宽,肾小管部分细胞肿胀坏死,表明IgAN模型构建成功。与对照组比较,模型组小鼠肾脏指数、血清肌酐和尿素氮水平均明显升高(P<0.05),小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高(P<0.05或P<0.01),小鼠肾组织中Drp1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而小鼠肾组织中Mfn1和Mfn2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:线粒体分裂融合蛋白表达失衡可能是IgAN发生发展的机制之一,以分裂融合稳态为靶点的研究可能为IgAN的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 免疫球蛋白A肾病 线粒体 动力相关蛋白1 线粒体融合蛋白1 线粒体融合蛋白2
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线粒体融合蛋白-1对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响 被引量：4
3
作者 翟启明 李蓓 +2 位作者 刘露 张青 金钫 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期172-177,共6页
目的:比较正常及炎症来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)中线粒体融合蛋白-1(mitofusion 1,Mfn1)的表达差异及其对PDLSCs成骨分化的影响。方法:分离培养PDLSCs,分别为正常来源(HPDLSCs)、牙周炎来源(P-PDLSCs... 目的:比较正常及炎症来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)中线粒体融合蛋白-1(mitofusion 1,Mfn1)的表达差异及其对PDLSCs成骨分化的影响。方法:分离培养PDLSCs,分别为正常来源(HPDLSCs)、牙周炎来源(P-PDLSCs)及应用IL-1β模拟炎症微环境诱导牙周膜干细胞(H-PDLSCs+IL-1β)。RT-PCR方法检测对比H-PDLSCs与P-PDLSCs、H-PDLSCs与H-PDLSCs+IL-1β中Mfn1表达差异;RT-PCR检测成骨基因、茜素红染色及氯化十六烷基吡啶定量,对比P-PDLSCs及si Mfn1下调Mfn1表达后的成骨分化能力。结果:与H-PDSLCs组相比,P-PDSLCs组及H-PDLSCs+IL-1β组中Mfn1表达量显著升高(P<0.05);si Mfn1下调P-PDSLCs中Mfn1表达量后,其成骨分化能力增强(P<0.05)。结论:炎症微环境下,PDLSCs中Mfn1表达量升高,导致成骨分化能力下降。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 炎症微环境 线粒体融合蛋白-1(Mfnl) 成骨分化
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甲基苯丙胺对体外培养SH-SY5Y细胞线粒体膜电位、超微结构及Mfn1、Fis1蛋白表达的影响 被引量：6
4
作者 牟登峰 郑丹 +4 位作者 王琪 黄仕美 官志忠 于燕妮 楼迪栋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期935-939,共5页
目的 评估甲基苯丙胺(METH)对体外培养的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位(MMP)、线粒体超微结构及Mfn1、Fis1蛋白表达的影响。方法 SH-SY5Y细胞中加入METH(0.0、1.0、1.5、2.0 mmol·L^-1 ),培养3、6、12、24 h;JC-1法检测SH-SY5Y细胞MMP;... 目的 评估甲基苯丙胺(METH)对体外培养的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位(MMP)、线粒体超微结构及Mfn1、Fis1蛋白表达的影响。方法 SH-SY5Y细胞中加入METH(0.0、1.0、1.5、2.0 mmol·L^-1 ),培养3、6、12、24 h;JC-1法检测SH-SY5Y细胞MMP;透射电镜观察SH-SY5Y细胞线粒体超微结构;Western blot检测Mfn1、Fis1蛋白表达。结果 METH作用SH-SY5Y细胞3、6、12、24 h,与对照组比较,METH组细胞MMP红绿荧光比值明显降低( P <0.05),Mfn1蛋白表达降低( P <0.05),Fis1蛋白表达升高( P <0.05);METH作用SH-SY5Y细胞24 h时,透射电镜观察见未处理组细胞线粒体呈椭圆形棒状双层膜结构,线粒体嵴正常、清晰,METH组细胞线粒体椭圆形棒状结构被分裂成小球状结构,并发现线粒体自噬小体及自噬溶酶体。结论 METH可引起SH-SY5Y细胞MMP下降、线粒体超微结构改变及Mfn1、Fis1蛋白表达水平改变,其改变可能参与METH致神经细胞损伤的发病机制。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 SH-SY5Y细胞 线粒体膜电位 线粒体超微结构 线粒体融合蛋白1 线粒体分裂蛋白1
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水陆二仙丹合抵挡汤加减方对糖尿病肾病小鼠线粒体自噬信号通路的影响
5
作者 张园 祁彤 +7 位作者 高飞 刘慧 纪品川 张亚超 高占华 孔令娟 常柏 郭建恩 《世界中医药》 北大核心 2025年第6期924-931,共8页
目的:探讨水陆二仙丹合抵挡汤加减方对糖尿病肾病小鼠线粒体自噬信号通路的影响。方法:将50只db/db小鼠通过简单随机化分为模型组、厄贝沙坦组(0.026 g/kg)、中药低、中、高剂量组(低剂量6.27 g/kg,中剂量为12.74 g/kg,高剂量25.48 g/kg... 目的:探讨水陆二仙丹合抵挡汤加减方对糖尿病肾病小鼠线粒体自噬信号通路的影响。方法:将50只db/db小鼠通过简单随机化分为模型组、厄贝沙坦组(0.026 g/kg)、中药低、中、高剂量组(低剂量6.27 g/kg,中剂量为12.74 g/kg,高剂量25.48 g/kg),db/m小鼠10只为正常组,连续灌胃8周。检测各组小鼠血糖(BG)、尿白蛋白/肌酐比值(UACR)、细胞活性氧、肾损伤分子1(KIM-1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、微管相关轻链蛋白1轻链3(LC3)、PTEN诱导假定激酶1(Pink1)、E3泛素连接酶(Parkin)、沉默信息调节因子1(Sirt1)、过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(PGC-1α)以及线粒体融合蛋白(MFN2)表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠BG、UACR、KIM-1、NGAL蛋白水平明显升高(P<0.05),Pink1、Parkin、LC3、Sirt1、PGC-1α以及MFN2蛋白表达水平明显下降(P<0.05),线粒体活性氧水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药低、中、高剂量组和厄贝沙坦组小鼠BG、UACR、KIM-1、NGAL蛋白水平均有不同程度的下降(P<0.05),Pink1、Parkin、LC3、Sirt1、PGC-1α以及MFN2表达水平有不同程度的上升(P<0.05),小鼠线粒体活性氧水平有不同程度的下降(P<0.05)。结论:水陆二仙丹合抵挡汤加减方能够减轻db/db小鼠肾损伤,其机制可能与上调肾脏Sirt1、PGC-1α以及MFN2的表达水平,恢复肾脏线粒体自噬有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏疾病 水陆二仙丹 抵挡汤 线粒体自噬 肾间质纤维化 肾小管 沉默信息调节因子1/线粒体融合蛋白信号通路 过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α
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MFN1在透镜诱导豚鼠近视模型视网膜上的表达及其意义 被引量：6
6
作者 曾官鹏 严丽英 +1 位作者 徐双 邹云春 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第1期1-3,11,共4页
目的建立豚鼠光学离焦近视动物模型,初步探索线粒体融合蛋白1(mitochondrial fusion protein 1,MFN1)在光学离焦豚鼠近视动物模型视网膜上的表达。方法给15只4周龄幼年豚鼠单眼配戴-7.00 D凹透镜,制作光学离焦性豚鼠近视模型,戴透镜眼... 目的建立豚鼠光学离焦近视动物模型,初步探索线粒体融合蛋白1(mitochondrial fusion protein 1,MFN1)在光学离焦豚鼠近视动物模型视网膜上的表达。方法给15只4周龄幼年豚鼠单眼配戴-7.00 D凹透镜,制作光学离焦性豚鼠近视模型,戴透镜眼作为实验眼,另一眼为自身对照眼。戴镜前及戴镜后1周、2周、3周分别进行检影验光和眼轴长度检查,同时于各时间点分别随机处死5只豚鼠,采用免疫组织化学染色检测视网膜中MFN1的表达,双眼眼球参数检查结果比较采用t检验,对免疫组织化学检查结果做描述定性分析。结果屈光度:豚鼠戴镜前屈光状态均为远视状态,实验眼和对照眼屈光度差异无统计学意义(P>0.05);用-7.00 D凹透镜经1周、2周、3周光学离焦可以造成豚鼠远视屈光度数逐渐下降,戴镜后1周两组比较差异无统计学意义(P=0.380);戴镜后2周及3周实验眼与对照眼比较,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。眼轴长度:戴镜前豚鼠双眼眼轴长度比较,差异无统计学意义(P>0.05);戴镜后1周、2周、3周对照眼和实验眼的眼轴均较戴镜前明显延长,实验眼与对照眼的眼轴长度比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫组织化学检测结果:双眼视网膜均可见部分视网膜神经节细胞胞浆及胞膜呈黄色或棕黄色着色,但实验眼免疫阳性细胞着色较深,阳性细胞数相对较多;早期豚鼠近视动物模型视网膜上MFN1阳性表达主要见于视网膜神经节细胞,随着透镜诱导时间的延长,MFN1在视锥视杆细胞中也出现表达,而对照眼无此现象。结论采用-7.00 D凹透镜能成功诱导光学离焦豚鼠近视动物模型,豚鼠视网膜上可见MFN1表达,随着透镜诱导时间的延长,表达强度和部位逐渐发生变化,提示MFN1可能在近视的发生发展过程中起着一定的作用。 展开更多
关键词 透镜诱导型近视 视网膜 线粒体融合蛋白1
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龙血复合物对人体皮肤细胞线粒体的作用研究 被引量：3
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作者 蒋丹丹 王风楼 +1 位作者 李慧 章漳 《日用化学工业》 CAS 北大核心 2021年第7期626-631,共6页
通过重建老化皮肤细胞的体外评估模型,评估龙血复合物(一种由4种活性成分复合而成的活性物)对正常人皮肤成纤维细胞和表皮角质形成细胞ATP含量和线粒体完整性(包括:线粒体形态、线粒体网络和线粒体融合蛋白-1的表达)的影响。ATP检测试... 通过重建老化皮肤细胞的体外评估模型,评估龙血复合物(一种由4种活性成分复合而成的活性物)对正常人皮肤成纤维细胞和表皮角质形成细胞ATP含量和线粒体完整性(包括:线粒体形态、线粒体网络和线粒体融合蛋白-1的表达)的影响。ATP检测试剂盒测定成纤维细胞和角质形成细胞内ATP含量,荧光探针染色结合显微镜图像半定量方法评估线粒体形态和线粒体网络结构的丰度,免疫细胞荧光染色方法分析线粒体融合蛋白-1(Mfn1)的表达。实验结果显示,龙血复合物显著促进成纤维细胞和角质形成细胞ATP含量,显著促进角质形成细胞线粒体网络的形成,龙血复合物处理的成纤维细胞线粒体形态完整、碎片较少、具有更加丰富的分支结构,Mfn1的表达水平更高。研究发现龙血复合物通过促进细胞ATP产生、保持线粒体完整性、增加线粒体网络数、促进Mfn1的表达,显示出对成纤维细胞和角质形成细胞的抗衰老作用。本研究中使用的评估方法也可用于筛选针对与线粒体衰老和生物能量相关功能的活性成分。 展开更多
关键词 皮肤衰老 龙血复合物 线粒体 线粒体网络 线粒体融合蛋白-1
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