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mitoTALENs植物线粒体基因编辑载体的构建方法
1
作者
周家伟
武志强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期172-180,共9页
【目的】mitoTALENs植物线粒体基因编辑技术能够高效地实现线粒体基因的敲除,进而有效实现线粒体基因功能的研究,但mitoTALENs载体构建过程非常的繁琐复杂且目前仍没有较为系统完整的载体构建方法作为参考。为解决这个问题,结合前人已...
【目的】mitoTALENs植物线粒体基因编辑技术能够高效地实现线粒体基因的敲除,进而有效实现线粒体基因功能的研究,但mitoTALENs载体构建过程非常的繁琐复杂且目前仍没有较为系统完整的载体构建方法作为参考。为解决这个问题,结合前人已发表的及本实验室摸索出的方法对mitoTALENs载体构建的完整过程进行了详尽描述,为之后利用mitoTALENs技术进行植物线粒体基因功能研究的研究者们提供重要参考。【方法】以水稻线粒体WA352基因作为目的基因,利用其序列特异性区域设计了靶点TAL,首先采用Platinum gate TALEN assembly的两步组装技术分别构建了mitoTALENs的TALEN-left和TALEN-right载体,然后利用multisite LR反应将TALEN-left、TALEN-right及含有其他功能元件的进入载体和目的载体进行反应,生成最终的表达载体。【结果】第一步组装构建10个载体,第二步组装构建2个载体,最后通过multisite LR反应构建1个终表达载体。【结论】详细介绍了mitoTALENs载体的构建过程,为该技术使用者提供重要参考,以促进植物线粒体基因编辑研究领域的发展。
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关键词
线粒体基因编辑
mitoTALENs载体
Platinum
gate
TALEN
assembly
multisite
LR
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职称材料
植物细胞器基因编辑研究进展
被引量：
7
2
作者
武志强
周家伟
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第10期1654-1664,共11页
基因编辑(gene editing),又称基因组编辑或基因组工程,是一种以插入、删除或碱基替换的形式引起DNA序列突变的技术。基因编辑技术有多种类型,如锌指核酸酶技术(zinc-finger nucleases,ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶技术(transcript...
基因编辑(gene editing),又称基因组编辑或基因组工程,是一种以插入、删除或碱基替换的形式引起DNA序列突变的技术。基因编辑技术有多种类型,如锌指核酸酶技术(zinc-finger nucleases,ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶技术(transcription activator-like effector nucleases,TALENs),以及近几年迅速发展起来的规律成簇短回文重复序列及其核酸酶9技术(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9,CRISPR/Cas9)。基因编辑技术的出现加速了植物功能基因组学的发展,并将在作物精准育种方面具有巨大的开发潜力。植物细胞器基因编辑主要是指对植物线粒体和叶绿体基因组的编辑。植物线粒体和叶绿体分别被称为细胞的“动力工厂”和“生产车间”,对于细胞及整个植株的生长发育及各种生命活动具有非常重要的作用。对线粒体和叶绿体基因组进行编辑将有利于了解其遗传规律从而开发它们在作物改良和工业生产上的应用。目前,细胞器基因编辑技术已经开始崭露头角,具有非常广阔的应用前景。该文将从基因编辑技术的发展、植物细胞器基因组的结构和特点、线粒体基因编辑和叶绿体遗传转化等方面进行总结,并对植物细胞器基因编辑的研究前景进行展望。
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关键词
基因
编辑
TALENs
细胞器
基因
组
线粒体基因编辑
叶绿体遗传转化
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职称材料
题名
mitoTALENs植物线粒体基因编辑载体的构建方法
1
作者
周家伟
武志强
机构
农业农村部合成生物学重点实验室中国农业科学院深圳农业基因组研究所(岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心)
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期172-180,共9页
基金
国家自然科学基金项目(32170238)
广东省“珠江人才计划”青年拔尖计划(20210N02N792)
中国农业科学院青年英才计划(11024316000100)。
文摘
【目的】mitoTALENs植物线粒体基因编辑技术能够高效地实现线粒体基因的敲除,进而有效实现线粒体基因功能的研究,但mitoTALENs载体构建过程非常的繁琐复杂且目前仍没有较为系统完整的载体构建方法作为参考。为解决这个问题,结合前人已发表的及本实验室摸索出的方法对mitoTALENs载体构建的完整过程进行了详尽描述,为之后利用mitoTALENs技术进行植物线粒体基因功能研究的研究者们提供重要参考。【方法】以水稻线粒体WA352基因作为目的基因,利用其序列特异性区域设计了靶点TAL,首先采用Platinum gate TALEN assembly的两步组装技术分别构建了mitoTALENs的TALEN-left和TALEN-right载体,然后利用multisite LR反应将TALEN-left、TALEN-right及含有其他功能元件的进入载体和目的载体进行反应,生成最终的表达载体。【结果】第一步组装构建10个载体,第二步组装构建2个载体,最后通过multisite LR反应构建1个终表达载体。【结论】详细介绍了mitoTALENs载体的构建过程,为该技术使用者提供重要参考,以促进植物线粒体基因编辑研究领域的发展。
关键词
线粒体基因编辑
mitoTALENs载体
Platinum
gate
TALEN
assembly
multisite
LR
Keywords
mitochondrial gene editing
mitoTALENs vector
Platinum gate TALEN assembly
multisite LR
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
植物细胞器基因编辑研究进展
被引量：
7
2
作者
武志强
周家伟
机构
岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心
华中农业大学植物科学技术学院
出处
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第10期1654-1664,共11页
基金
国家自然科学基金(31970244)
深圳市优秀科技创新人才培养-优秀青年基础研究(STIC:RCYX20200714114538196)
中国农业科学院深圳农业基因组研究所启动资金(SJXW19073)。
文摘
基因编辑(gene editing),又称基因组编辑或基因组工程,是一种以插入、删除或碱基替换的形式引起DNA序列突变的技术。基因编辑技术有多种类型,如锌指核酸酶技术(zinc-finger nucleases,ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶技术(transcription activator-like effector nucleases,TALENs),以及近几年迅速发展起来的规律成簇短回文重复序列及其核酸酶9技术(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated nuclease 9,CRISPR/Cas9)。基因编辑技术的出现加速了植物功能基因组学的发展,并将在作物精准育种方面具有巨大的开发潜力。植物细胞器基因编辑主要是指对植物线粒体和叶绿体基因组的编辑。植物线粒体和叶绿体分别被称为细胞的“动力工厂”和“生产车间”,对于细胞及整个植株的生长发育及各种生命活动具有非常重要的作用。对线粒体和叶绿体基因组进行编辑将有利于了解其遗传规律从而开发它们在作物改良和工业生产上的应用。目前,细胞器基因编辑技术已经开始崭露头角,具有非常广阔的应用前景。该文将从基因编辑技术的发展、植物细胞器基因组的结构和特点、线粒体基因编辑和叶绿体遗传转化等方面进行总结,并对植物细胞器基因编辑的研究前景进行展望。
关键词
基因
编辑
TALENs
细胞器
基因
组
线粒体基因编辑
叶绿体遗传转化
Keywords
gene editing
TALENs
organelle genome
mitochondrial gene editing
chloroplast genetic transformation
分类号
Q943 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
mitoTALENs植物线粒体基因编辑载体的构建方法
周家伟
武志强
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
植物细胞器基因编辑研究进展
武志强
周家伟
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2021
7
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职称材料
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