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山羊传染性胸膜肺炎支原体C87001株菌种纯化克隆研究
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作者 王颖 伏小平 王栋 《中国兽药杂志》 2014年第4期10-14,共5页
为获得纯净山羊传染性胸膜肺炎支原体生产用菌种,将山羊传染性胸膜肺炎C87001株冻干肺组织(1980年),通过采用绵羊肺炎支原体代谢抑制试验结合固体培养基挑取单个克隆菌落方法,进行克隆纯化。结果表明,制苗用C87001株冻干肺组织(1... 为获得纯净山羊传染性胸膜肺炎支原体生产用菌种,将山羊传染性胸膜肺炎C87001株冻干肺组织(1980年),通过采用绵羊肺炎支原体代谢抑制试验结合固体培养基挑取单个克隆菌落方法,进行克隆纯化。结果表明,制苗用C87001株冻干肺组织(1980年)纯化后克隆株1~15代菌种均纯净、每代活菌滴度均≥10^9.0CCU/mL,经菌落形态和PCR鉴定,获得克隆纯化的F5代山羊传染性胸膜肺炎支原体生产用菌种。该菌种经本动物回归试验,4/4发病;按规程制备灭活疫苗免疫山羊,攻毒保护为4/4(100%),对照组3/3发病死亡。 展开更多
关键词 山羊传染性胸膜肺炎 支原体 菌种 纯化克隆
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利用单克隆抗体纯化酶联吸附试验检测猪瘟自然感染和免疫抗体 被引量:3
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作者 陈振华 《中国动物检疫》 CAS 2002年第3期33-33,共1页
关键词 猪瘟 自然感染 免疫抗体 检测 克隆抗体纯化酶联吸附试验
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牛AsiaⅠ型口蹄疫克隆纯化疫苗的免疫效果检验
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作者 杨鹏飞 李玉娟 霍清枝 《现代农业》 2008年第11期39-41,共3页
对牛AsiaⅠ口蹄疫克隆纯化疫苗的物理性状和无菌进行检验;采用豚鼠和小白鼠进行安全检验;并应用该疫苗在黄牛体内进行免疫效力检测。结果表明,应用克隆毒株研制的油乳剂灭活疫苗为乳白色,稳定、稀薄、无菌、安全而且在免疫效力方面克隆... 对牛AsiaⅠ口蹄疫克隆纯化疫苗的物理性状和无菌进行检验;采用豚鼠和小白鼠进行安全检验;并应用该疫苗在黄牛体内进行免疫效力检测。结果表明,应用克隆毒株研制的油乳剂灭活疫苗为乳白色,稳定、稀薄、无菌、安全而且在免疫效力方面克隆口蹄疫AsiaⅠ_AKT03毒株疫苗的PD50比普通疫苗提高2.4倍。 展开更多
关键词 牛AsiaⅠ型口蹄疫 克隆纯化 疫苗 免疫效果
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应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测 被引量:6
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作者 潘树德 何利昆 +1 位作者 李学俭 马兴元 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期114-116,共3页
用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克... 用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确。 展开更多
关键词 FA PPA—ELISA 猪瘟 免疫荧光抗体诊断 克隆抗体纯化酶联免疫吸附
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玉米赤霉烯酮降解酶基因mbZHD的原核表达及其降解毒素初步研究 被引量:5
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作者 柴成梁 常晓娇 +2 位作者 王楠希 伍松陵 孙长坡 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期29-33,38,共6页
玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是由镰刀菌属产生的次生代谢物,是极易污染粮食作物的真菌毒素之一。ZEN具有强烈的雌激素样效应及致癌性,给人类和动物的健康造成巨大威胁。本研究在NCBI数据库中进行同源比对,获得了一些ZHD101降解酶的... 玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是由镰刀菌属产生的次生代谢物,是极易污染粮食作物的真菌毒素之一。ZEN具有强烈的雌激素样效应及致癌性,给人类和动物的健康造成巨大威胁。本研究在NCBI数据库中进行同源比对,获得了一些ZHD101降解酶的同源基因,其中,1个来源于真菌——杨盘二孢菌(Marssonina brunnea)的蛋白序列与ZHD101具有32%的同源性,基因大小为861 bp。通过化学合成方法得到该全长基因,通过构建E.coli原核表达系统进行蛋白表达,蛋白经亲和色谱纯化后对ZEN分子进行降解活性验证,HPLC结果表明,该蛋白在6 h内对10μg ZEN分子的降解率为98%,酶活为200 U/m L,从而获得了1个新的ZEN降解酶基因。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮ZEN降解酶基因 克隆蛋白表达纯化
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