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纤维结合素对HBV感染原代培养人胎肝细胞的影响 被引量：1
1
作者 王方 王宇明 +3 位作者 王小红 汤勃 刘国栋 刘俊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期400-402,共3页
目的　研究纤维结合素对HBV体外感染原代培养人胎肝细胞的影响。方法　用纤维结合素包被培养皿 ,利用从HBV阳性血清纯化的HBV病毒颗粒感染体外培养的人胎肝细胞。应用ELISA法检测培养上清中HBsAg和HBeAg,免疫组化法检测细胞核中HBcAg,... 目的　研究纤维结合素对HBV体外感染原代培养人胎肝细胞的影响。方法　用纤维结合素包被培养皿 ,利用从HBV阳性血清纯化的HBV病毒颗粒感染体外培养的人胎肝细胞。应用ELISA法检测培养上清中HBsAg和HBeAg,免疫组化法检测细胞核中HBcAg,荧光定量PCR法检测细胞中HBVDNA ,巢式PCR法检测细胞中cccDNA ,并和未包被的胎肝细胞进行对照。结果　未包被时上清中HBsAg和HBeAg于第 5日出现阳性 ,包被后自第 1日起出现阳性 ;未包被时胎肝细胞核中HBcAg于感染后第 2日起出现阳性 ,阳性率为 10 %～ 15 % ,包被后自第 1日起出现阳性 ,阳性率达 90 %以上 ;未包被时细胞中HBVDNA定量自第 4日起检出 ,包被后自第 1日起检出 ;未包被时细胞中HBVcccDNA自第 8日出现阳性 ,包被后自第 2日起出现阳性。结论　纤维结合素包被可以促进HBV体外感染原代培养人胎肝细胞 ,使HBV感染胎肝细胞的时间提前 。 展开更多
关键词 纤维结合素 肝炎病毒 乙型 人胎肝细胞 细胞培养
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肝炎后肝硬化患者血浆纤维结合素浓度与虚证关系的初步观察 被引量：1
2
作者 刘成 《辽宁中医杂志》 CAS 1987年第7期24-24,共1页
纤维结合素(Fibronectin·Fn)在人体内的作用,近年来已引起重视。肝硬化患者一般呈现低水平状态,我们检测了43例肝炎后肝硬化患者血浆Fn的浓度,结果和所引用的文献一致,同时发现虚证患者降低尤为明显,现将观察结果报告如下。
关键词 纤维结合素 FN 虚证 真虚假实 肝炎后肝硬化 患者 血浆
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纤维结合素分子中Asp1961～Glu1978序列对三结构域多肽在大肠杆菌中表达的影响
3
作者 冯作化 李东 +2 位作者 张桂梅 张慧 范曲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期122-127,共6页
构建了人纤维结合素（ＦＮ）的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒，分别编码两个重组多肽：ＣＨ６２（ＦＮ的Ｐｒｏ１２３９～Ｓｅｒ１５１５经Ｍｅｔ和Ａｌａ１６９０～Ｖａ１２０４９相连）和ＣＨ６３（从ＣＨ６２中删除了Ｉｌｅ１... 构建了人纤维结合素（ＦＮ）的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒，分别编码两个重组多肽：ＣＨ６２（ＦＮ的Ｐｒｏ１２３９～Ｓｅｒ１５１５经Ｍｅｔ和Ａｌａ１６９０～Ｖａ１２０４９相连）和ＣＨ６３（从ＣＨ６２中删除了Ｉｌｅ１８５０～Ｇｌｕ１９７８）．ＣＨ６２在大肠杆菌中的表达效率很低，而ＣＨ６３的表达效率则很高，结果提示ＦＮ分子中的Ａｓｐ１９６１～Ｇｌｕ１９７８序列是影响三结构域多肽在大肠杆菌中表达的关键结构．ＣＨ６３经过溶解和复性后，可通过肝素－琼脂糖亲和层析得到纯品，所得纯品具有结合肝素和结合细胞的功能，且结合细胞的能力比双结构域ＦＮ多肽更强，表明两个结合细胞的功能结构域均有活性．ＣＨ６３的制备为进一步研究具有更强的抑制肿瘤转移作用的基因工程制品奠定了基础． 展开更多
关键词 纤维结合素 重组 多肽 大肠杆菌 表达
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胎儿纤维结合素在早产诊断及预测中的价值 被引量：2
4
作者 侯艳 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期198-200,共3页
胎儿纤维结合素是细胞外基质中一种由种植的滋养层组织分泌的糖蛋白 ,含有称为“癌胚区”的抗原决定簇 ,可被单克隆抗体 FDC- 6识别。孕 2 0～ 37周宫颈阴道分泌物中的胎儿纤维结合素可能是一个对早产有良好诊断、预测价值的标记物。尤... 胎儿纤维结合素是细胞外基质中一种由种植的滋养层组织分泌的糖蛋白 ,含有称为“癌胚区”的抗原决定簇 ,可被单克隆抗体 FDC- 6识别。孕 2 0～ 37周宫颈阴道分泌物中的胎儿纤维结合素可能是一个对早产有良好诊断、预测价值的标记物。尤其是其阴性预测值高 ,有助于避免不必要的医学干扰。 展开更多
关键词 胎儿纤维结合素 早产 诊断 预测
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超声联合胎儿纤维结合素测定提高预测延期妊娠引产成功率可行性研究
5
作者 黄艳波 李先锋 +3 位作者 陈玉 张晓娥 陆莹 邱伯乔 《实用医学杂志》 CAS 2008年第4期579-581,共3页
目的:对单独采用阴道超声(阴超)测量宫颈长度或胎儿纤维结合素(fFN)测定与阴超测量宫颈长度联合fFN测定三种预测延期妊娠引产的方法进行比较,旨在寻找一种更为客观的、敏感性更高的引产方法。方法:选择孕周在41～41+6周无明显剖宫产指... 目的:对单独采用阴道超声(阴超)测量宫颈长度或胎儿纤维结合素(fFN)测定与阴超测量宫颈长度联合fFN测定三种预测延期妊娠引产的方法进行比较,旨在寻找一种更为客观的、敏感性更高的引产方法。方法:选择孕周在41～41+6周无明显剖宫产指征及合并症的孕妇161例,随机分为单独阴超测量宫颈长度组、单独fFN测定组、阴超联合fFN测定组,每组在测量宫颈长度或(和)fFN测定后(24±2)h,开始点滴缩宫素引产,观察引产结果。结果:3组首次引产成功共93例,单独测量宫颈长度组的首次引产成功和不成功病例的宫颈长度差异无显著性;单独fFN测定组的首次引产成功和不成功病例的fFN差异有显著性(t=3.03,P=0.04),其预测延期妊娠引产成功的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为76.7%、50.0%、67.6%、61.1%;以宫颈长度<30mm,fFN阳性为临界点;阴超联合fFN测定组预测延期妊娠引产成功敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.8%,70.0%,90.9%,77.8%,明显高于单独fFN测定组的各项预测值。结论:在宫颈长度<30mm,fFN阳性时,阴超联合fFN测定预测延期妊娠引产成功率最高。 展开更多
关键词 妊娠 过期 引产 阴道超声胎儿纤维结合素
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重组FN多肽CH50对巨噬细胞抗肿瘤功能的促进作用 被引量：17
6
作者 冯作化 张桂梅 +1 位作者 张慧 范曲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期268-269,共2页
重组ＦＮ多肽ＣＨ５０可以显著促进巨噬细胞产生ＮＯ的能力、增强其细胞毒作用。ＣＨ５０多肽可与ＩＦＮγ协同作用，进一步促进巨噬细胞产生ＮＯ的能力。体内实验亦表明，ＣＨ５０多肽可以抑制肿瘤细胞在体内生长。
关键词 纤维结合素 重组多肽 巨噬细胞 细胞毒作用
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CH50多肽体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用研究 被引量：10
7
作者 冯作化 张桂梅 +1 位作者 李东 张慧 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第1期28-31,共4页
目的：研究重组ＦＮ多肽ＣＨ５０在体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用的特点。方法：体内注射ＣＨ５０和／或转染ＩＦＮ－γ基因，检测巨噬细胞产生的各种因子，测定荷瘤鼠体内肿瘤生长速度。结果：ＣＨ５０单独作用可促进巨噬细胞产生Ｎ... 目的：研究重组ＦＮ多肽ＣＨ５０在体内激活巨噬细胞及其抗肿瘤作用的特点。方法：体内注射ＣＨ５０和／或转染ＩＦＮ－γ基因，检测巨噬细胞产生的各种因子，测定荷瘤鼠体内肿瘤生长速度。结果：ＣＨ５０单独作用可促进巨噬细胞产生ＮＯ，ＴＮＦ，ＩＬ－１等因子，但激活作用较慢。注射ＣＨ５０和转染ＩＦＮ－γ基因不分先后，均可在体内协同作用，迅速激活巨噬细胞。单独注射ＣＨ５０能够抑制肿瘤结节的形成，其抑制作用呈剂量依赖关系；低剂量ＣＨ６０对＜１ｍｍ的肿瘤结节已有很强的抑制作用，较大剂量时对＞１ｍｍ的肿瘤结节也有很强的抑制作用。ＣＨ５０与ＩＦＮ－了在体内的协同作用使其抑制体内肿瘤生长的作用更强。结论：ＣＨ５０与ＩＦＮ－γ作为体内巨噬细胞激活的双信号因子在肿瘤治疗中具有极大的应用潜力。 展开更多
关键词 纤维结合素 巨噬细胞 肿瘤 基因治疗 CH50多肽
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牛源耐药性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及黏附因子基因FnBP和clfA的表达分析 被引量：5
8
作者 孙志华 刘君 +4 位作者 张辉 刘娟 许长萌 张华雷 陈创夫 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期22-28,共7页
为探究致奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物学特性,对新疆垦区部分奶牛场乳房炎奶样进行病原学分析,并对病原菌进行耐药性、毒力因子的表达分析。从乳房炎奶样中分离得到S.aureus,采用血浆凝... 为探究致奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)的生物学特性,对新疆垦区部分奶牛场乳房炎奶样进行病原学分析,并对病原菌进行耐药性、毒力因子的表达分析。从乳房炎奶样中分离得到S.aureus,采用血浆凝固酶试验、KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法(VITEK32)、聚合酶链式反应等法进行鉴定。针对毒力基因clfA(凝集因子A)和FnBP(纤维结合素结合蛋白)进行特异性PCR扩增,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体,并构建原核表达载体pET-28a(+)-FnBP和pET-28a(+)-clfA。转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。常规鉴定出葡萄球菌105株,其中金黄色葡萄球菌(S.aureus)62株,从62株S.aureus中检出耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)13株,检出率为20.10%,2株未确检。经测序证实与GenBank中FnBP基因(J04151)和clfA基因(AB245457)序列同源性分别为100%和95.69%。SDS-PAGE显示,clfA和FnBP蛋白相对分子质量分别为45ku和58ku。Western blot分析显示,clfA蛋白和FnBP蛋白均可与金黄色葡萄球菌多克隆抗血清发生特异性反应。病畜奶样中MRSA检出率较高,新疆垦区部分牛场呈蔓延趋势,成功表达了clfA、FnBP蛋白,具有一定的免疫保护效果。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 凝集因子A基因 纤维结合素结合蛋白基因
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肝癌及慢性肝病血清Fn测定的意义
9
作者 王炳元 沙文阁 +2 位作者 王迎春 张秀云 崔秀芝 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第S1期94-96,共3页
纤维结合素(简称Fn),是一组高分子量的糖蛋白,对网状内皮系统具有特异调理作用,并参与组织修复、凝血及细胞转化等。本文对原发性肝癌(PHC)30例,慢性活动性肝炎(CAH)30例,失代偿期肝硬化37例血清Fn进行了测定。
关键词 肝癌 肝病 纤维结合素(Fn)
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CH50多肽对IFN-γ基因转染癌细胞体内生长及免疫刺激作用的影响
10
作者 张慧 冯作化 +1 位作者 张桂梅 李东 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第1期10-14,共5页
探讨重组FN多肽CH50对IFN-γ基因转染癌细胞体内生长及免疫刺激作用的影响。将小鼠IFN-γ基因转染黑色素瘤B16/Fl细胞,测定其表达产物与CH50协同刺激巨噬细胞产生NO的作用、转染细胞接种小鼠并注射CH50时对脾细胞的免疫刺激作用及瘤细... 探讨重组FN多肽CH50对IFN-γ基因转染癌细胞体内生长及免疫刺激作用的影响。将小鼠IFN-γ基因转染黑色素瘤B16/Fl细胞,测定其表达产物与CH50协同刺激巨噬细胞产生NO的作用、转染细胞接种小鼠并注射CH50时对脾细胞的免疫刺激作用及瘤细胞的体内生长特性。结果表明,转染细胞表达产物可与CH50协同作用刺激巨噬细胞产生NO。转染细胞表达IFN-γ水平较低,仍可在体内形成肿瘤,注射CH50能够抑制其形成肿瘤。基因转染细胞和CH50能够促进脾细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。研究表明,CH50不仅可以提高肿瘤疫苗的安全性,也可以提高肿瘤疫苗刺激机体免疫系统的作用。并提示,表达CH50和IFN-γ双因子的肿瘤疫苗可为提高肿瘤疫苗治疗肿瘤的效果开辟新的途径。 展开更多
关键词 纤维结合素 重组多肽 基因转染 肿瘤疫苗
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