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题名新型GH5家族多结构域纤维素酶的结构与功能研究
被引量：2
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作者
杨俊钊
张新蕊
赵国柱
郑菲
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机构
北京林业大学生物科学与技术学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期71-80,共10页
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文摘
纤维素酶能够将纤维素转化为可发酵的糖类,为丰富纤维素酶的序列与结构资源、揭示纤维素酶结构与功能之间的关系,本研究对两个新型GH5家族多结构域内切纤维素酶TlCel5和ReCel5进行了克隆表达和酶学性质测定,并对其结构域开展了突变研究。序列和结构分析显示,Tlcel5和Recel5分别编码了655个和632个氨基酸,理论分子量分别为68.3 kD和65.9 kD,均包含了CBM1区、CD区、CBMX2区和一个未知结构域,这与以往报道的多数单一结构域或双结构域纤维素酶显著不同。为了解附加结构域对酶功能的影响效果,以ReCel5为研究对象,分别构建了N端CBM1结构域的截断突变体TM1,和C端未知结构域的截断突变体TM2。酶学性质分析显示,TlCel5和ReCel5的最适作用pH和最适作用温度分别为pH 3.0、50℃和pH 4.0、70℃,在50℃和70℃下能够保持良好的稳定性,并且对多种类型的纤维素类底物、半纤维素类底物表现出水解能力。虽然突变体TM1和TM2的酶学性质较野生型没有发生显著变化,但其对羧甲基纤维素钠、大麦葡聚糖、地衣多糖的水解比活值降低了23%-68%,由此说明,在多结构域酶中,附加结构域与酶的水解能力之间存在密切关系。
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关键词
多结构域内切纤维素酶
克隆表达
酶学性质
结构与功能
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Keywords
multi-domain endoglucanase
cloning expression
enzymatic property
structure and function
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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题名糖苷水解酶7家族蛋白在纤维素降解中作用的研究进展
被引量：2
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作者
高小晓
孟虹
李蓉
李宪臻
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机构
大连工业大学生物工程学院
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出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2020年第6期113-117,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(31600640)
辽宁省教育厅科学研究经费项目(J2019015)。
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文摘
糖苷水解酶7家族(glycoside hydrolase family,GH7)是一类来源于真菌的水解酶,作用于纤维素结晶区或不定形区的β-1,4-键,可用于高效降解纤维素转化为可发酵的糖。GH7的成员具有高度保守序列以及相似三维结构,其催化结构域是由多个loop区围绕反向平行的β-折叠形成的β-三明治结构。目前已有17个GH7成员的结晶结构得到解析,明确了酶的结构与催化功能之间的关联,对GH7的来源及分类、蛋白序列、结构特征与催化纤维素降解功能关系的研究进展进行阐述。
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关键词
糖苷水解酶7家族蛋白
纤维素酶结构
纤维素降解
内切葡聚糖酶
外切葡聚糖酶
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Keywords
glycoside hydrolase 7 family proteins
cellulase structure
cellulose degradation
endoglucanase
exoglucanase
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分类号
Q939.99
[生物学—微生物学]
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