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微紫青霉CBHⅠ酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中的分泌型表达及性质研究
被引量：
7
1
作者
汪天虹
邹玉霞
+3 位作者
石屹峰
高培基
刘佶
吴静
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000年第5期644-649,共6页
为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能 ,进而深入了解天然纤维素的生物降解机制和提高纤维素酶的生物工艺学价值 ,采用 PCR技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶 ( CBH ) CBD编码区的 DNA片段 ,将 CBD编码区 DN...
为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能 ,进而深入了解天然纤维素的生物降解机制和提高纤维素酶的生物工艺学价值 ,采用 PCR技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶 ( CBH ) CBD编码区的 DNA片段 ,将 CBD编码区 DNA片段插入带有 Erwiniacarotovora pe1 B前导肽序列的大肠杆菌质粒 p KK- tac- new上进行了表达 .携带微紫青霉 CBDCBH 编码区的大肠杆菌重组菌株 DH5α( p KK- tac- new- 8)产生有活性的分泌型 CBDCBH 蛋白 .SDS-PAGE检测显示所产生的 CBDCBH 蛋白分子量约 1 0 .8k D.在 IPTG诱导下 ,该菌株所产生的CBDCBH 蛋白含量达 45.2 mg/L,且 90 %以上的 CBD蛋白分泌到培养物上清液中 .结晶纤维素 CF-1 1溶液经 CBDCBH 处理后 ,浊度比对照提高了 1 2 8.9% ,天然棉花纤维结构经 CBDCBH 处理后产生一定程度的非水解性降解作用 ,表明微紫青霉 CBDCBH 具有解聚天然结晶纤维素的作用 .
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关键词
微紫青霉
CHBⅠ
纤维素结合结构域
分泌型表达
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职称材料
细菌纤维素酶结构和功能的研究
被引量：
16
2
作者
陈燕勤
毛培宏
曾宪贤
《化学与生物工程》
CAS
2004年第6期4-6,共3页
主要探讨了近年来利用结构生物学和蛋白质工程技术在细菌纤维素酶分子结构和功能方面研究的进展,包括细菌纤维素酶的组成、催化域、纤维素结合结构域和连接桥的结构和功能以及分子折叠,并展望了该领域的研究前景。
关键词
细菌
纤维素
酶
催化
结构域
纤维素结合结构域
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职称材料
重组人甲状旁腺激素(1-34)在大肠杆菌中的表达与纯化
3
作者
陈均勇
陈新园
+6 位作者
孙自勇
刘莉莉
朱镇华
汪晶
吴盛
王石泉
刘建宁
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期58-65,共8页
将化学合成的rhPTH(1 34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET＿35b(+),使rhPTH(1 34)融合于纤维素结合结构域(CBDclos)的羧基端,并得到高效表达.融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经FactorXa裂解释放出rhPTH(1 34),再通过纤维素树...
将化学合成的rhPTH(1 34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET＿35b(+),使rhPTH(1 34)融合于纤维素结合结构域(CBDclos)的羧基端,并得到高效表达.融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经FactorXa裂解释放出rhPTH(1 34),再通过纤维素树脂亲和层析、C4反向高效液相色谱纯化得到rhPTH(1 34)纯品.每升培养液可获取3mg高纯度的rhPTH(1 34).经质谱测定,所得样品的分子量为4117.0Da,与rhPTH(1 34)理论分子量一致.
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关键词
甲状旁腺激素
大肠杆菌
表达
纯化
纤维素结合结构域
FACTOR
Xa
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职称材料
题名
微紫青霉CBHⅠ酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中的分泌型表达及性质研究
被引量：
7
1
作者
汪天虹
邹玉霞
石屹峰
高培基
刘佶
吴静
机构
山东大学微生物技术国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000年第5期644-649,共6页
基金
国家自然科学基金!( 3 943 2 0 0 2 0 )资助
文摘
为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能 ,进而深入了解天然纤维素的生物降解机制和提高纤维素酶的生物工艺学价值 ,采用 PCR技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶 ( CBH ) CBD编码区的 DNA片段 ,将 CBD编码区 DNA片段插入带有 Erwiniacarotovora pe1 B前导肽序列的大肠杆菌质粒 p KK- tac- new上进行了表达 .携带微紫青霉 CBDCBH 编码区的大肠杆菌重组菌株 DH5α( p KK- tac- new- 8)产生有活性的分泌型 CBDCBH 蛋白 .SDS-PAGE检测显示所产生的 CBDCBH 蛋白分子量约 1 0 .8k D.在 IPTG诱导下 ,该菌株所产生的CBDCBH 蛋白含量达 45.2 mg/L,且 90 %以上的 CBD蛋白分泌到培养物上清液中 .结晶纤维素 CF-1 1溶液经 CBDCBH 处理后 ,浊度比对照提高了 1 2 8.9% ,天然棉花纤维结构经 CBDCBH 处理后产生一定程度的非水解性降解作用 ,表明微紫青霉 CBDCBH 具有解聚天然结晶纤维素的作用 .
关键词
微紫青霉
CHBⅠ
纤维素结合结构域
分泌型表达
Keywords
Penicillium janthinellum
Cellobiohydrolase Ⅰ
Cellulose binding domain
Secretive expression
分类号
Q557.1 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
细菌纤维素酶结构和功能的研究
被引量：
16
2
作者
陈燕勤
毛培宏
曾宪贤
机构
新疆农业大学化学工程学院
新疆大学离子束生物工程中心
出处
《化学与生物工程》
CAS
2004年第6期4-6,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(10165001)
"十五"国家科技攻关计划(2001BA302B)
+1 种基金
新疆自然科学基金项目(20001)
乌鲁木齐市重大科研基金项目(Y0010)
文摘
主要探讨了近年来利用结构生物学和蛋白质工程技术在细菌纤维素酶分子结构和功能方面研究的进展,包括细菌纤维素酶的组成、催化域、纤维素结合结构域和连接桥的结构和功能以及分子折叠,并展望了该领域的研究前景。
关键词
细菌
纤维素
酶
催化
结构域
纤维素结合结构域
Keywords
bacteria
cellulase
catalytic domains
cellulose-binding domains
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
TQ3521 [化学工程]
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职称材料
题名
重组人甲状旁腺激素(1-34)在大肠杆菌中的表达与纯化
3
作者
陈均勇
陈新园
孙自勇
刘莉莉
朱镇华
汪晶
吴盛
王石泉
刘建宁
机构
南京大学分子医学研究所
出处
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期58-65,共8页
基金
国家重大科技专项"创新药物和中草药现代化"(2002AA2Z3451)
文摘
将化学合成的rhPTH(1 34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET＿35b(+),使rhPTH(1 34)融合于纤维素结合结构域(CBDclos)的羧基端,并得到高效表达.融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经FactorXa裂解释放出rhPTH(1 34),再通过纤维素树脂亲和层析、C4反向高效液相色谱纯化得到rhPTH(1 34)纯品.每升培养液可获取3mg高纯度的rhPTH(1 34).经质谱测定,所得样品的分子量为4117.0Da,与rhPTH(1 34)理论分子量一致.
关键词
甲状旁腺激素
大肠杆菌
表达
纯化
纤维素结合结构域
FACTOR
Xa
Keywords
parathyroid hormone, expression, purification, cellulose binding domain, Factor Xa
分类号
R977.14 [医药卫生—药品]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微紫青霉CBHⅠ酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中的分泌型表达及性质研究
汪天虹
邹玉霞
石屹峰
高培基
刘佶
吴静
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
细菌纤维素酶结构和功能的研究
陈燕勤
毛培宏
曾宪贤
《化学与生物工程》
CAS
2004
16
在线阅读
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职称材料
3
重组人甲状旁腺激素(1-34)在大肠杆菌中的表达与纯化
陈均勇
陈新园
孙自勇
刘莉莉
朱镇华
汪晶
吴盛
王石泉
刘建宁
《南京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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职称材料
已选择
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