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用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体
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作者 王长军 唐家琪 +2 位作者 潘秀珍 李先富 操敏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期277-281,共5页
本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术,分离与构建5D12McAb单链抗体基因,将其克隆入噬粒pHEN-1中,转化E.coliTGl,M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库;... 本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术,分离与构建5D12McAb单链抗体基因,将其克隆入噬粒pHEN-1中,转化E.coliTGl,M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库;用完整虹细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体,重组噬菌体鉴定及序列测定分析;免疫杂交试验检测重组噬菌体单链抗体的特异性抗原活性。经M13K07援救E.coli TG1转化菌中的pHEN-1重组噬菌体,得到滴度为3×10^9pfu/m1噬菌体单链抗体库;免疫杂交试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型B抗原的特异性亲和力。本研究成功地构建5D12McAb单链噬菌体抗体库,为进一步研制;与特异性和高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 ABO血型 红细胞血型 红细胞血型B抗原 噬菌体呈现技术 单链抗体
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甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰遮蔽人ABO血型抗原 被引量:3
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作者 王捷熙 檀英霞 +2 位作者 李立立 白燕 章扬培 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期653-658,共6页
输血是一种非常有效的临床治疗手段 ,但血型不符会造成输血死亡事故 .为了解决输血中存在的血型匹配困难等问题 ,使用甲氧基聚乙二醇 (mPEG)化学修饰法 ,对红细胞表面的血型抗原进行化学修饰 ,从而达到遮蔽红细胞血型抗原的目的 .通过对... 输血是一种非常有效的临床治疗手段 ,但血型不符会造成输血死亡事故 .为了解决输血中存在的血型匹配困难等问题 ,使用甲氧基聚乙二醇 (mPEG)化学修饰法 ,对红细胞表面的血型抗原进行化学修饰 ,从而达到遮蔽红细胞血型抗原的目的 .通过对mPEG BTC、mPEG ALD和mPEG 2 NHS三种mPEG衍生物对红细胞A抗原和B抗原修饰效果的比较 ,结果表明mPEG BTC修饰效果最好 ,可以完全遮蔽红细胞的A抗原和B抗原 ,使修饰后的A型、B型和AB型红细胞呈现出与O型红细胞相同的血型血清学特征 ;进一步研究证明 ,mPEG BTC与红细胞结合牢固 ,对红细胞结构、功能、变形能力、常规指标和沉降率等基本没有影响 .初步实现了A→O ,B→O和AB→O的血型改造 ,从而为临床输血治疗遇到的偏型、稀有血型、配型困难等问题的解决 ,提供了新的技术方法与思路 . 展开更多
关键词 化学修饰 甲氧基聚乙二醇(mPEG) 红细胞血型抗原
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产生抗D的DVI type 3型孕妇免疫血清学和RHD基因型分析 被引量:4
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作者 梁倩妮 廖志坚 +3 位作者 张润青 姬艳丽 罗广平 黎美娜 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1810-1814,共5页
目的:对部分D表型孕妇进行免疫血清学和RHD基因型分析。方法:采用常规血型血清学方法鉴定孕妇RhD血型,并进行血型特异性抗体筛查和鉴定;采用序列特异性引物聚合酶链反应(polymerase chain reactionsequence specific primer,PCR-SSP)鉴... 目的:对部分D表型孕妇进行免疫血清学和RHD基因型分析。方法:采用常规血型血清学方法鉴定孕妇RhD血型,并进行血型特异性抗体筛查和鉴定;采用序列特异性引物聚合酶链反应(polymerase chain reactionsequence specific primer,PCR-SSP)鉴定孕妇RHD基因型;采用多重连接依赖的探针扩增技术(multiplex ligationdependent probe amplification,MLPA)对孕妇及其配偶和女儿的RhD血型抗原进行基因分型及遗传分析。结果:该孕妇血清中检测出IgG抗-D,其抗体效价为1∶8。PCR-SSP结果显示,该孕妇RHD基因第3-6外显子缺失,经鉴定该孕妇RHD基因型为DVI type 3型。MLPA分析显示,该孕妇只有1条RHD等位基因,且缺失3-6外显子,其基因型为CDVIe/cde,其配偶为CDe/CDe纯合子基因型,女儿为CDe/CDVIe基因型。结论:准确的RhD血型鉴定对制定安全有效的临床输血策略和对育龄妇女采取恰当措施及预防新生儿溶血病具有重要意义。 展开更多
关键词 DVI TYPE 3型 RHD血型 红细胞血型抗原
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