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重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫
被引量：
6
1
作者
张冬梅
潘卫庆
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期14-17,共4页
目的 :全合成恶性疟原虫 eba- 1 75 f2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达 ,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原 Pf CP- 2 .9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制。方法 :采用不对称 PCR法拼接合成 eba- 1 75 f2基因(95...
目的 :全合成恶性疟原虫 eba- 1 75 f2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达 ,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原 Pf CP- 2 .9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制。方法 :采用不对称 PCR法拼接合成 eba- 1 75 f2基因(95 9bp) ,用电转化方法将合成基因导入毕氏酵母中并进行诱导表达 ,采用离子交换层析和分子筛层析纯化 EBA- 1 75 F2蛋白。 结果 :全合成 eba- 1 75 f2基因在毕氏酵母中高效分泌表达。重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫后 ,以 EL ISA和IFA检测 ,针对 2个蛋白联合免疫的抗体滴度明显高于 2个蛋白单独免疫的滴度。 结论 :重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫时不存在竞争性免疫抑制 ,这
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关键词
重组
红细胞结合抗原
175功能区
制备
联合免疫
恶性疟原虫
疟疾
疫苗
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职称材料
噬菌体随机环7肽库筛选恶性疟原虫EBA-175的结合肽
2
作者
郝文波
孙晓敏
+3 位作者
王萍
陈白虹
徐伟文
李明
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期544-546,共3页
目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA175抗原的结合肽。方法以EBA175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Westernblot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定...
目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA175抗原的结合肽。方法以EBA175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Westernblot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较。结果获得9株可与EBA175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK)。其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA175的受体GPA的108110位氨基酸同源。竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA175与其单抗的结合。结论获得了可与EBA175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA175与GPA的结合起重要作用。
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关键词
恶性疟原虫
红细胞结合抗原
175
血型糖蛋白A
噬菌体随机肽库
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职称材料
抗恶性疟原虫EBA-175单克隆抗体的制备与初步鉴定
3
作者
郝文波
洪艳华
+4 位作者
孙晓敏
宁云山
张冬梅
潘卫庆
李明
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第9期1169-1171,共3页
目的制备抗恶性疟原虫EBA-175的单克隆抗体(McAb),为恶性疟原虫的诊断及疫苗研究奠定基础.方法以恶性疟原虫EBA-175(Ⅱ区F2段)重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,间接ELISA筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株,测定其免疫球...
目的制备抗恶性疟原虫EBA-175的单克隆抗体(McAb),为恶性疟原虫的诊断及疫苗研究奠定基础.方法以恶性疟原虫EBA-175(Ⅱ区F2段)重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,间接ELISA筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,ELISA、Western blot试验分析其特异性.结果筛选获得6株稳定分泌抗重组EBA-175 McAb的杂交瘤细胞株1F3、2E8、2H5、4A1、4C3、4H9,6株McAb经鉴定其亚类5株为IgG1,1株为IgG2a,6株McAb的培养上清ELISA效价为1:256～1:512,腹水效价为1:12 800～1:25 600,间接ELISA显示其中4株McAb 1F3、2H5、4A1、4H9能与恶性疟原虫抗原发生特异性结合,而只有1F3、4A1、4H9在Western blot试验中识别恶性疟原虫Mr约35000的虫源蛋白.结论获得了能稳定分泌高特异性抗EBA175 McAb的杂交瘤细胞.
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关键词
恶性疟原虫
红细胞结合抗原
单克隆抗体
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职称材料
题名
重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫
被引量：
6
1
作者
张冬梅
潘卫庆
机构
第二军医大学基础医学部病原生物学教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期14-17,共4页
基金
世界卫生组织专项基金 ( IDA2 0 198)
国家杰出青年科学基金 ( 3 0 2 2 5 0 41)
国家高新技术发展规划 ("863"计划 )课题 ( 2 0 0 1AA2 15 0 2 1)
文摘
目的 :全合成恶性疟原虫 eba- 1 75 f2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达 ,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原 Pf CP- 2 .9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制。方法 :采用不对称 PCR法拼接合成 eba- 1 75 f2基因(95 9bp) ,用电转化方法将合成基因导入毕氏酵母中并进行诱导表达 ,采用离子交换层析和分子筛层析纯化 EBA- 1 75 F2蛋白。 结果 :全合成 eba- 1 75 f2基因在毕氏酵母中高效分泌表达。重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫后 ,以 EL ISA和IFA检测 ,针对 2个蛋白联合免疫的抗体滴度明显高于 2个蛋白单独免疫的滴度。 结论 :重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫时不存在竞争性免疫抑制 ,这
关键词
重组
红细胞结合抗原
175功能区
制备
联合免疫
恶性疟原虫
疟疾
疫苗
Keywords
Plasmodium falciparum
175 000 erythrocyte bin ding antigen
immunity
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R531.3 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
噬菌体随机环7肽库筛选恶性疟原虫EBA-175的结合肽
2
作者
郝文波
孙晓敏
王萍
陈白虹
徐伟文
李明
机构
南方医科大学生物技术学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期544-546,共3页
文摘
目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA175抗原的结合肽。方法以EBA175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Westernblot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较。结果获得9株可与EBA175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK)。其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA175的受体GPA的108110位氨基酸同源。竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA175与其单抗的结合。结论获得了可与EBA175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA175与GPA的结合起重要作用。
关键词
恶性疟原虫
红细胞结合抗原
175
血型糖蛋白A
噬菌体随机肽库
Keywords
Plasmodium falciparum
erythrocyte binding antigen-175
glycophorin A
phage-displayed random peptide library
分类号
R382.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
抗恶性疟原虫EBA-175单克隆抗体的制备与初步鉴定
3
作者
郝文波
洪艳华
孙晓敏
宁云山
张冬梅
潘卫庆
李明
机构
南方医科大学生物技术学院
第二军医大学病原生物学教研室
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第9期1169-1171,共3页
基金
国家自然科学基金(30170839)~~
文摘
目的制备抗恶性疟原虫EBA-175的单克隆抗体(McAb),为恶性疟原虫的诊断及疫苗研究奠定基础.方法以恶性疟原虫EBA-175(Ⅱ区F2段)重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,间接ELISA筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,ELISA、Western blot试验分析其特异性.结果筛选获得6株稳定分泌抗重组EBA-175 McAb的杂交瘤细胞株1F3、2E8、2H5、4A1、4C3、4H9,6株McAb经鉴定其亚类5株为IgG1,1株为IgG2a,6株McAb的培养上清ELISA效价为1:256～1:512,腹水效价为1:12 800～1:25 600,间接ELISA显示其中4株McAb 1F3、2H5、4A1、4H9能与恶性疟原虫抗原发生特异性结合,而只有1F3、4A1、4H9在Western blot试验中识别恶性疟原虫Mr约35000的虫源蛋白.结论获得了能稳定分泌高特异性抗EBA175 McAb的杂交瘤细胞.
关键词
恶性疟原虫
红细胞结合抗原
单克隆抗体
Keywords
Plasmodiumfalciparum
erythrocyte-binding antigen 175
monoclonal antibodies
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫
张冬梅
潘卫庆
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
噬菌体随机环7肽库筛选恶性疟原虫EBA-175的结合肽
郝文波
孙晓敏
王萍
陈白虹
徐伟文
李明
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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下载PDF
职称材料
3
抗恶性疟原虫EBA-175单克隆抗体的制备与初步鉴定
郝文波
洪艳华
孙晓敏
宁云山
张冬梅
潘卫庆
李明
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
0
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