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人红细胞冻干后复水条件的初步研究
被引量：
1
1
作者
陈麟凤
刘景汉
+4 位作者
汪德清
欧阳锡林
庄远
车辑
李卉
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2009年第6期1582-1587,共6页
本研究旨在探讨不同复水条件对冻干红细胞回收率的影响,为冻干红细胞复水条件的优化提供实验依据。在一系列不同条件下,包括复水溶液、复水温度、复水阶段红细胞胞体积变化速率(即蒸汽预复水)等,对冻干红细胞进行复水,检测红细胞复水后...
本研究旨在探讨不同复水条件对冻干红细胞回收率的影响,为冻干红细胞复水条件的优化提供实验依据。在一系列不同条件下,包括复水溶液、复水温度、复水阶段红细胞胞体积变化速率(即蒸汽预复水)等,对冻干红细胞进行复水,检测红细胞复水后回收率并检测冻干红细胞复水后各项理化功能的改变。结果显示:在复水液配方中以PBS为基液配制的10%(w/v)PVP40溶液效果较好。在复水温度方面,低于37℃时红细胞回收率随着温度的升高而增加,42℃比37℃略差,37℃下复水效果最好。在加入复水液之前将样品放置在37℃的饱和蒸汽环境中预复水能提高红细胞回收率并使细胞体积和体积分布宽度更接近于新鲜细胞数值。复水后红细胞理化性质的检测显示,红细胞的变形性较常规保存的红细胞有所下降,但胞内ATP酶、G-6-PD酶、SOD和2,3-DPG的活性降低较少,酶活性回收率大于红细胞回收率。结论:人红细胞冻干后最佳的复水条件是:冻干红细胞在37℃的饱和蒸汽环境中预复水,复水液为PBS+10%PVP40,复水温度为37℃,但对冻干复水过程中的细胞膜的保护还需进行更深入的研究。
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关键词
海藻糖
聚乙烯吡咯烷酮
红细胞冻干
复水
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职称材料
人红细胞冻干前负载海藻糖最佳化研究
被引量：
1
2
作者
庄远
刘景汉
+2 位作者
欧阳锡林
陈麟凤
车辑
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007年第2期412-416,共5页
为更好的实现海藻糖在红细胞冻干保存中的保护作用,关键是克服质膜对海藻糖的非渗透性,使胞质内海藻糖达到有效浓度。本研究的目的是通过对人红细胞负载海藻糖的规律性研究,筛选出海藻糖负载的最佳负载条件并评价海藻糖负载对红细胞各...
为更好的实现海藻糖在红细胞冻干保存中的保护作用,关键是克服质膜对海藻糖的非渗透性,使胞质内海藻糖达到有效浓度。本研究的目的是通过对人红细胞负载海藻糖的规律性研究,筛选出海藻糖负载的最佳负载条件并评价海藻糖负载对红细胞各项理化指标的影响。在不同孵育温度(4、22和37℃)、孵育时间(0、2、4、6、8、10小时)、不同负载缓冲液浓度(0、200、400、600、800、1000mmol/L)条件下检测新鲜红细胞对海藻糖的成功负载量及红细胞各项理化指标;在固定负载条件下,对新鲜红细胞和4℃保存72小时红细胞海藻糖负载、游离血红蛋白(FHb)、血红蛋白(Hb)和红细胞平均体积(MCV)进行了比较。结果表明:红细胞对海藻糖的负载与孵育温度、时间及负载缓冲液海藻糖浓度密切相关。随着温度的升高、时间的延长和负载缓冲液海藻糖浓度的增加,红细胞对海藻糖的摄取量也随之增加。在海藻糖负载最佳条件下,新鲜红细胞和4℃保存72小时红细胞的胞内海藻糖浓度、FHb浓度分别为65.505±6.314mmol/L、66.2±5.002mmol/L和6.567±2.568g/L、16.168±3.922g/L。结论:红细胞负载海藻糖的最佳条件是采用新鲜红细胞,在37℃条件下、海藻糖浓度为800mmol/L的负载缓冲液中孵育8小时,这一条件可使胞内海藻糖达到有效浓度,并保持红细胞细胞理化性质稳定和膜完整性。
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关键词
红细胞冻干
海藻糖
负载缓冲液
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职称材料
联合海藻糖和二甲基亚砜进行冻干前负载的人红细胞冻干效果研究
被引量：
1
3
作者
庄远
刘景汉
+2 位作者
孙桂香
陈麟凤
车辑
《科学技术与工程》
2008年第21期5787-5792,共6页
探讨人红细胞在冻干前经添加低浓度二甲基亚砜(DMSO)海藻糖负载缓冲液负载后,是否会提高红细胞的冻干效果。实验组:为6%DMSO+800 mmol/L海藻糖。对照组:冻干前负载缓冲液为等渗PBS。取等量压积红细胞(6份)分别重悬于两组负载缓冲液,37...
探讨人红细胞在冻干前经添加低浓度二甲基亚砜(DMSO)海藻糖负载缓冲液负载后,是否会提高红细胞的冻干效果。实验组:为6%DMSO+800 mmol/L海藻糖。对照组:冻干前负载缓冲液为等渗PBS。取等量压积红细胞(6份)分别重悬于两组负载缓冲液,37℃孵育8 h后离心去除上清,加入冻干保护剂混匀后程序冻干,15%PVP溶液37℃三步复水。分别检测并比较两组冻干红细胞复水后血红蛋白回收率、复水红细胞变形性、再水化后4℃放置时间对冻干红细胞再水化稳定性的影响及冻干红细胞长期保存的稳定性。结果表明:冻干红细胞再水化后,实验组红细胞血红蛋白回收率为(63.019±4.901)%,对照组为(28.787±7.514)%,两组之间存在显著差异(P<0.01);冻干红细胞再水化后,两组冻干红细胞的综合变形指数均有明显下降,实验组红细胞综合变形指数为(18.133±2.392)%,对照组为(8.017±1.934)%,两组之间存在显著差异(P<0.01);两组冻干红细胞复水后4℃保存4 h、6 h、8h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示有显著统计学差异(P<0.05)。复水后4℃保存12 h、24 h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示无统计学差异;两组冻干红细胞4℃保存6个月前后复水后血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示两者之间存在显著差异(P<0.05)。结论:红细胞冻干前经添加6%DMSO的海藻糖负载缓冲液处理后,可提高冻干后红细胞血红蛋白回收率、改善复水红细胞变形性,提高复水后4℃保存的稳定性和冻干红细胞长期保存的稳定性。
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关键词
冻干
红细胞
海藻糖
二甲基亚砜
负载缓冲液再水化
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职称材料
题名
人红细胞冻干后复水条件的初步研究
被引量：
1
1
作者
陈麟凤
刘景汉
汪德清
欧阳锡林
庄远
车辑
李卉
机构
中国人民解放军总医院输血科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2009年第6期1582-1587,共6页
基金
国家自然科学基金资助课题
编号30471931
文摘
本研究旨在探讨不同复水条件对冻干红细胞回收率的影响,为冻干红细胞复水条件的优化提供实验依据。在一系列不同条件下,包括复水溶液、复水温度、复水阶段红细胞胞体积变化速率(即蒸汽预复水)等,对冻干红细胞进行复水,检测红细胞复水后回收率并检测冻干红细胞复水后各项理化功能的改变。结果显示:在复水液配方中以PBS为基液配制的10%(w/v)PVP40溶液效果较好。在复水温度方面,低于37℃时红细胞回收率随着温度的升高而增加,42℃比37℃略差,37℃下复水效果最好。在加入复水液之前将样品放置在37℃的饱和蒸汽环境中预复水能提高红细胞回收率并使细胞体积和体积分布宽度更接近于新鲜细胞数值。复水后红细胞理化性质的检测显示,红细胞的变形性较常规保存的红细胞有所下降,但胞内ATP酶、G-6-PD酶、SOD和2,3-DPG的活性降低较少,酶活性回收率大于红细胞回收率。结论:人红细胞冻干后最佳的复水条件是:冻干红细胞在37℃的饱和蒸汽环境中预复水,复水液为PBS+10%PVP40,复水温度为37℃,但对冻干复水过程中的细胞膜的保护还需进行更深入的研究。
关键词
海藻糖
聚乙烯吡咯烷酮
红细胞冻干
复水
Keywords
trehalose
polyvinylpyrrolidone（PVP）
RBCs lyophilization
rehydration
分类号
R331.141 [医药卫生—人体生理学]
R318.52 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
人红细胞冻干前负载海藻糖最佳化研究
被引量：
1
2
作者
庄远
刘景汉
欧阳锡林
陈麟凤
车辑
机构
解放军总医院输血科全军临床输血中心
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007年第2期412-416,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号30471931)
文摘
为更好的实现海藻糖在红细胞冻干保存中的保护作用,关键是克服质膜对海藻糖的非渗透性,使胞质内海藻糖达到有效浓度。本研究的目的是通过对人红细胞负载海藻糖的规律性研究,筛选出海藻糖负载的最佳负载条件并评价海藻糖负载对红细胞各项理化指标的影响。在不同孵育温度(4、22和37℃)、孵育时间(0、2、4、6、8、10小时)、不同负载缓冲液浓度(0、200、400、600、800、1000mmol/L)条件下检测新鲜红细胞对海藻糖的成功负载量及红细胞各项理化指标;在固定负载条件下,对新鲜红细胞和4℃保存72小时红细胞海藻糖负载、游离血红蛋白(FHb)、血红蛋白(Hb)和红细胞平均体积(MCV)进行了比较。结果表明:红细胞对海藻糖的负载与孵育温度、时间及负载缓冲液海藻糖浓度密切相关。随着温度的升高、时间的延长和负载缓冲液海藻糖浓度的增加,红细胞对海藻糖的摄取量也随之增加。在海藻糖负载最佳条件下,新鲜红细胞和4℃保存72小时红细胞的胞内海藻糖浓度、FHb浓度分别为65.505±6.314mmol/L、66.2±5.002mmol/L和6.567±2.568g/L、16.168±3.922g/L。结论:红细胞负载海藻糖的最佳条件是采用新鲜红细胞,在37℃条件下、海藻糖浓度为800mmol/L的负载缓冲液中孵育8小时,这一条件可使胞内海藻糖达到有效浓度,并保持红细胞细胞理化性质稳定和膜完整性。
关键词
红细胞冻干
海藻糖
负载缓冲液
Keywords
freeze-drying of red blood cells
trehalose
loading solution
分类号
R331.141 [医药卫生—人体生理学]
R318.52 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
联合海藻糖和二甲基亚砜进行冻干前负载的人红细胞冻干效果研究
被引量：
1
3
作者
庄远
刘景汉
孙桂香
陈麟凤
车辑
机构
解放军总医院输血科全军临床输血中心
出处
《科学技术与工程》
2008年第21期5787-5792,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30471931)资助
文摘
探讨人红细胞在冻干前经添加低浓度二甲基亚砜(DMSO)海藻糖负载缓冲液负载后,是否会提高红细胞的冻干效果。实验组:为6%DMSO+800 mmol/L海藻糖。对照组:冻干前负载缓冲液为等渗PBS。取等量压积红细胞(6份)分别重悬于两组负载缓冲液,37℃孵育8 h后离心去除上清,加入冻干保护剂混匀后程序冻干,15%PVP溶液37℃三步复水。分别检测并比较两组冻干红细胞复水后血红蛋白回收率、复水红细胞变形性、再水化后4℃放置时间对冻干红细胞再水化稳定性的影响及冻干红细胞长期保存的稳定性。结果表明:冻干红细胞再水化后,实验组红细胞血红蛋白回收率为(63.019±4.901)%,对照组为(28.787±7.514)%,两组之间存在显著差异(P<0.01);冻干红细胞再水化后,两组冻干红细胞的综合变形指数均有明显下降,实验组红细胞综合变形指数为(18.133±2.392)%,对照组为(8.017±1.934)%,两组之间存在显著差异(P<0.01);两组冻干红细胞复水后4℃保存4 h、6 h、8h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示有显著统计学差异(P<0.05)。复水后4℃保存12 h、24 h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示无统计学差异;两组冻干红细胞4℃保存6个月前后复水后血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示两者之间存在显著差异(P<0.05)。结论:红细胞冻干前经添加6%DMSO的海藻糖负载缓冲液处理后,可提高冻干后红细胞血红蛋白回收率、改善复水红细胞变形性,提高复水后4℃保存的稳定性和冻干红细胞长期保存的稳定性。
关键词
冻干
红细胞
海藻糖
二甲基亚砜
负载缓冲液再水化
Keywords
lyophilized RBCs trehalose dimethyl sulphoxide （DMSO） loading solution rehy- drated
分类号
R331.143 [医药卫生—人体生理学]
R318.52 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人红细胞冻干后复水条件的初步研究
陈麟凤
刘景汉
汪德清
欧阳锡林
庄远
车辑
李卉
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2009
1
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职称材料
2
人红细胞冻干前负载海藻糖最佳化研究
庄远
刘景汉
欧阳锡林
陈麟凤
车辑
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2007
1
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职称材料
3
联合海藻糖和二甲基亚砜进行冻干前负载的人红细胞冻干效果研究
庄远
刘景汉
孙桂香
陈麟凤
车辑
《科学技术与工程》
2008
1
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