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红灰链霉菌硫氧还蛋白还原酶的异源表达及其酶学性质分析
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作者 李吉玲 刘睿 +4 位作者 张雨欣 张莉刚 陆君铭 申乃坤 张红岩 《广西科学》 北大核心 2025年第3期517-525,共9页
为充分利用废弃羽毛中的角蛋白资源,本研究利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增得到红灰链霉菌(Streptomyces rubrogriseus)硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin Reductase,TrxR)基因trxB,通过构建重组质粒并将其转化到大... 为充分利用废弃羽毛中的角蛋白资源,本研究利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增得到红灰链霉菌(Streptomyces rubrogriseus)硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin Reductase,TrxR)基因trxB,通过构建重组质粒并将其转化到大肠杆菌[Escherichia coli BL21(DE3)]中进行表达,得到的TrxR经镍离子亲和层析纯化后测定酶学性质。结果表明:经PCR扩增得到大小为969 bp的trxB,并成功构建重组质粒pET22b-trxB。在最优诱导表达条件[异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度为0.5 mmol/L,光密度(OD_(600))为0.8,诱导温度为30℃,诱导时间为4 h]下,纯化后的TrxR大小为38.5 kDa。以羽毛粉为底物进行酶促反应时,TrxR的最适pH值为8.0,最适温度为60℃;K^(+)、Mg^(2+)对TrxR酶活力有明显的激活作用,而Fe^(2+)、Fe^(3+)、Cu^(2+)对其有明显的抑制作用;异丙醇、苯甲基磺酰氟(PMSF)、二甲基亚砜(DMSO)均对TrxR酶活力有抑制作用,而二硫苏糖醇(DTT)对TrxR酶活力有促进作用;TrxR酶促反应的米氏常数(K_(m))为64.04 mg/mL,最大反应速率(V_(max))为3.70 U/min。TrxR具有较高的酶活力和回收率,在降解羽毛角蛋白方面有一定的应用价值。 展开更多
关键词 二硫键还原酶 红灰链霉菌 异源表达 表达优化 酶学性质
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红灰链霉菌HDZ-9-47防治小麦全蚀病的效果 被引量:2
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作者 金娜 卢修亮 +1 位作者 刘倩 简恒 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第3期83-86,共4页
通过室内及盆栽试验测定红灰链霉菌HDZ-9-47发酵液对小麦全蚀病的防治效果。室内试验结果表明,红灰链霉菌HDZ-9-47发酵滤液可抑制小麦全蚀病的菌丝生长,稀释5、10、20、50、70、100、150、200倍的发酵滤液对菌丝生长抑制率分别为100%、... 通过室内及盆栽试验测定红灰链霉菌HDZ-9-47发酵液对小麦全蚀病的防治效果。室内试验结果表明,红灰链霉菌HDZ-9-47发酵滤液可抑制小麦全蚀病的菌丝生长,稀释5、10、20、50、70、100、150、200倍的发酵滤液对菌丝生长抑制率分别为100%、95%、88%、77%、51%、40%、38%、28%。红灰链霉菌HDZ-9-47发酵液浸种3 h对小麦发芽率无影响。盆栽试验结果表明,发酵液2次灌根处理可防治小麦全蚀病,在2012—2013年2次盆栽试验中的防效分别为55%和41%。说明红灰链霉菌HDZ-9-47发酵液对小麦全蚀病有较好的防治效果,具有开发为生防制剂的潜力。 展开更多
关键词 红灰链霉菌 小麦全蚀病 生物防治 防治效果
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灰红链霉菌AL7基因组文库及异源表达文库的构建
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作者 刘培 俞燕飞 陶美凤 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期547-552,共6页
灰红链霉菌AL7对多种植物病原真菌和细菌都具有明显的抑菌活性。本研究在通用的大肠杆菌克隆宿主基础上,构建获得Dcm甲基化缺陷菌株,再引入接合转移辅助质粒pUZ8002得到菌株LP3。以LP3为宿主构建灰红链霉菌AL7的基因组粘粒文库,平均插... 灰红链霉菌AL7对多种植物病原真菌和细菌都具有明显的抑菌活性。本研究在通用的大肠杆菌克隆宿主基础上,构建获得Dcm甲基化缺陷菌株,再引入接合转移辅助质粒pUZ8002得到菌株LP3。以LP3为宿主构建灰红链霉菌AL7的基因组粘粒文库,平均插入片段大小40kb。用高通量接合转移的方法将文库转到变铅青链霉菌TK24中,得到了异源表达文库,并从表达文库中初筛获得一些表型特异的克隆,如光秃表型、产素提前表型、产孢提前表型等。 展开更多
关键词 霉菌AL7 基因组文库 高通量接合转移 异源表达 甲基化缺陷菌株
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一株具有纤维素降解能力的链霉菌LLJ-03的鉴定及初步研究 被引量:12
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作者 李路军 游银伟 +2 位作者 任鹏飞 宫志远 李世国 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期1253-1256,共4页
在经过一次堆积发酵的双孢蘑菇栽培基质中筛选到一株放线菌LLJ-03,根据16S rDNA序列及生理生化特征鉴定为灰变红链霉菌(Streptomyces griseorubens)。初步研究了该菌降解纤维素的能力,其纤维素酶活力可达97.0 U/mL,该菌对栽培基质的发... 在经过一次堆积发酵的双孢蘑菇栽培基质中筛选到一株放线菌LLJ-03,根据16S rDNA序列及生理生化特征鉴定为灰变红链霉菌(Streptomyces griseorubens)。初步研究了该菌降解纤维素的能力,其纤维素酶活力可达97.0 U/mL,该菌对栽培基质的发酵预处理具有重要作用。 展开更多
关键词 双孢蘑菇栽培基质 鉴定 霉菌 纤维素酶
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一株产蓝色素放线菌的分离、鉴定及其色素稳定性初步研究 被引量:8
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作者 牛世全 韩彩虹 +3 位作者 胡蛟龙 李海云 耿晖 阎薇如 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期134-138,共5页
为了研究一株从盐碱土中分离的产蓝色素放线菌菌株DA04417的分类地位及其色素稳定性。通过形态学、生理生化特征、16S rRNA基因序列分析对该菌株进行鉴定,并对其色素稳定性进行初步研究。结果表明菌株DA04417初步鉴定为灰红链霉菌(Stre... 为了研究一株从盐碱土中分离的产蓝色素放线菌菌株DA04417的分类地位及其色素稳定性。通过形态学、生理生化特征、16S rRNA基因序列分析对该菌株进行鉴定,并对其色素稳定性进行初步研究。结果表明菌株DA04417初步鉴定为灰红链霉菌(Streptomyces griseoruber)。其产色素最大吸收峰为580 nm,色素在p H 3~11区域内增色作用明显;自然光和紫外光对色素都有一定的消色作用,但影响不大;色素在4~80℃内稳定;色素对还原剂Na2SO3稳定,而氧化剂H2O2对色素有消色作用;色素对Na Cl、蔗糖稳定,柠檬酸钠对色素有明显消色作用;金属离子对色素都有不同程度的消色作用。放线菌DA04417是一株具有开发前景和应用潜力的产蓝色素菌株。 展开更多
关键词 蓝色素 霉菌 16S RRNA基因 色素稳定性
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Streptomyces griseorubens C-5对堆肥木质纤维素降解及微生物群落代谢的影响 被引量:9
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作者 徐杰 许修宏 《太阳能学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期285-291,共7页
为促进堆肥中木质纤维素降解,并了解其中微生物群落代谢功能多样性,主要采用Biolog—ECO平板法,研究添加灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)C-5对堆肥中木质纤维素降解及微生物群落代谢能力的影响。结果显示:堆肥结束时,... 为促进堆肥中木质纤维素降解,并了解其中微生物群落代谢功能多样性,主要采用Biolog—ECO平板法,研究添加灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)C-5对堆肥中木质纤维素降解及微生物群落代谢能力的影响。结果显示:堆肥结束时,接菌处理的堆肥中木质素、纤维素和半纤维素的降解率分别比对照组(自然堆肥)提高29.94%、18.78%、12.77%;平均色度变化(AWCD)分析表明,接种处理可增加堆肥微生物的细胞代谢能力,尤其能提高堆肥中后期微生物群落对酯类和多聚物类碳源的代埘能力;主成分分析(PCA)结果显示,接种可提高微生物对氢基化合物、氨基酸和双亲化合物等碳源的代谢能力。 展开更多
关键词 堆肥 术质纤维素 生物降解 微生物群落 代谢 Biolog方法 霉菌
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