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外显子拼接法克隆紫杉烷2α-羟基化酶基因与生物信息学分析 被引量:1
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作者 黄仕杰 陈平 +3 位作者 陈晓阳 辛燕花 郭丽琼 林俊芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期186-192,共7页
紫杉烷2α-羟基化酶是形成紫杉醇核心骨架的羟基化反应关键酶之一,以taxusin作为底物进行氧化生成2α,7β-dihydroxytaxusin。利用蔓地亚红豆杉的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出紫杉烷2α-羟基化酶的DNA序列,利用在线比对和生物学软件... 紫杉烷2α-羟基化酶是形成紫杉醇核心骨架的羟基化反应关键酶之一,以taxusin作为底物进行氧化生成2α,7β-dihydroxytaxusin。利用蔓地亚红豆杉的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出紫杉烷2α-羟基化酶的DNA序列,利用在线比对和生物学软件分析其内含子,采用外显子拼接法克隆出紫杉烷2α-羟基化酶基因的cDNA序列。测序结果表明该基因含有1个1 488 bp的开放阅读框,编码495个氨基酸的多肽;同源性比较分析结果表明,其碱基序列及氨基酸序列与已经报道的加拿大红豆杉的紫杉烷2α-羟基化酶基因的一致性为分别为98%和89%。利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其列进行了序列分析,为利用代谢工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础。 展开更多
关键词 蔓地亚红豆杉 紫杉 紫杉烷2α-羟基化酶 基因克隆 生物信息学
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南方红豆杉紫杉烷7β-羟基化酶基因全长序列的克隆和进化分析 被引量:6
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作者 燕丽娜 苏应娟 王艇 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期120-124,130,共6页
从南方红豆杉Taxus wallichianavar.mairei的新鲜嫩叶中提取基因组DNA作为模板,利用三组特异引物进行PCR扩增,然后克隆测序得到紫杉烷7β-羟基化酶的基因全长。该基因编码区起始密码子为ATG,终止密码子为TGA,全长1 692 bp;碱基组成为490... 从南方红豆杉Taxus wallichianavar.mairei的新鲜嫩叶中提取基因组DNA作为模板,利用三组特异引物进行PCR扩增,然后克隆测序得到紫杉烷7β-羟基化酶的基因全长。该基因编码区起始密码子为ATG,终止密码子为TGA,全长1 692 bp;碱基组成为490 A(29.0%),351 C(20.7%),362 G(21.4%)和489 T(28.9%)。将紫杉烷7β-羟基化酶基因全长序列与细胞色素P450基因家族的其它三个成员进行比对,发现它与紫杉烷2α-羟基化酶基因、紫杉烷10β-羟基化酶基因及紫杉烷13α-羟基化酶基因的一致性分别为74%、68%及76%。它们的外显子和内含子的连接区均具保守的GT-AG结构,内含子区的变异性明显高于外显子区。进一步以红豆杉属的13个紫杉烷羟基化酶基因家族成员为对象,利用位点间可变ω(非同义替换率dN和同义替换率dS的比值)模型对该基因家族的适应性进化进行分析。分支模型、位点模型以及分支-位点模型的分析表明:紫杉烷羟基化酶基因家族的少数分支处于正选择压力下(ω>1),但未检测到正选择位点;而绝大部分位点受强烈的负选择作用(ω<1)。 展开更多
关键词 南方红豆杉 紫杉-羟基基因 正选择 负选择
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人工栽培南方红豆杉紫杉烷成分的研究
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作者 李俊 牙启康 +2 位作者 苏小建 义祥辉 张健 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第1期72-74,共3页
采用溶剂萃取及多种色谱技术分离纯化,从人工栽培南方红豆杉中分离得到紫杉醇(Ⅰ)、2′-乙酰氧基-7-表-紫杉醇(Ⅱ)、(3E,7E)-2,α10,β13α-三乙酰基-5,α20-二羟基-3,8-断紫杉烷-3,7,11-三烯-9-酮(Ⅲ)和7-表-紫杉醇(Ⅳ),其中化合物(Ⅱ... 采用溶剂萃取及多种色谱技术分离纯化,从人工栽培南方红豆杉中分离得到紫杉醇(Ⅰ)、2′-乙酰氧基-7-表-紫杉醇(Ⅱ)、(3E,7E)-2,α10,β13α-三乙酰基-5,α20-二羟基-3,8-断紫杉烷-3,7,11-三烯-9-酮(Ⅲ)和7-表-紫杉醇(Ⅳ),其中化合物(Ⅱ)首次从南方红豆杉分离得到。 展开更多
关键词 南方红豆杉 紫杉 2'-乙酰氧基-7-紫杉 (3E 7E)- 10β 13α-三乙酰基一5a 20.二羟基-3 8- 紫杉-3 7 11-三烯-9- 7--紫杉
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溶菌酶-ZCN-CTMAB三元配合物的反应机理研究
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作者 白进伟 迟燕华 +1 位作者 庄稼 李克安 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1082-1085,共4页
采用UV光谱法对溶菌酶(Lys)、邻{2[α(2羟基磺酸苯偶氮)亚卞基]肼基}苯甲酸(ZCN)、溴化十六烷基三甲胺(CTMAB)的反应体系进行了研究。测定了在弱酸性条件下温度、时间和离子强度等对反应体系的影响,浓度的线性范围为0~10μg·mL-1,... 采用UV光谱法对溶菌酶(Lys)、邻{2[α(2羟基磺酸苯偶氮)亚卞基]肼基}苯甲酸(ZCN)、溴化十六烷基三甲胺(CTMAB)的反应体系进行了研究。测定了在弱酸性条件下温度、时间和离子强度等对反应体系的影响,浓度的线性范围为0~10μg·mL-1,摩尔吸光系数ε=46164×105L·cm-1·mol-1;并对反应机理及无机物,生物物质,表面活性剂对反应的干扰情况进行了初步研究,以此建立了溶菌酶与ZCN。 展开更多
关键词 溶菌 -{2-[α-(2-羟基-磺酸苯偶氮)-亚卞基]肼基}苯甲酸 十六基三甲胺 uV光谱法
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蜂王浆影响蜜蜂学习记忆的研究进展
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作者 龚志文 刘娜 +3 位作者 柯秋艳 张祖芸 闫振华 王钰冲 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第6期90-98,共9页
蜂王与工蜂在蜂群中担任着截然不同的工作,二者间的表型和功能差异与其食物蜂王浆密切相关。蜂王浆为幼龄工蜂所产,作为专门供给蜂王和蜜蜂小幼虫的重要食物来源,对蜂群健康发展和壮大起着关键性作用。然而,目前尚未厘清蜂王浆对蜜蜂认... 蜂王与工蜂在蜂群中担任着截然不同的工作,二者间的表型和功能差异与其食物蜂王浆密切相关。蜂王浆为幼龄工蜂所产,作为专门供给蜂王和蜜蜂小幼虫的重要食物来源,对蜂群健康发展和壮大起着关键性作用。然而,目前尚未厘清蜂王浆对蜜蜂认知能力的影响。本研究综述了蜂王浆影响蜜蜂学习记忆能力的研究进展,以期为蜂王浆影响蜜蜂认知行为的相关研究提供一定的理论研究思路。 展开更多
关键词 蜂王浆 蜜蜂 学习记忆 王浆主蛋白 10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA) DNA甲基转移
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以核受体为靶标的胆汁淤积治疗药物研究进展 被引量:10
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作者 陈攀 李晶洁 陈杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1195-1198,共4页
胆汁淤积的治疗药物匮乏,熊去氧胆酸是目前唯一被FDA通过的治疗原发性胆汁性肝硬化的药物,但其药效却限于疾病早期,因此迫切需要开发新的胆汁淤积治疗药物。核受体能调控胆汁酸稳态,它作为胆汁淤积治疗的靶标是目前研究的热点。该综述... 胆汁淤积的治疗药物匮乏,熊去氧胆酸是目前唯一被FDA通过的治疗原发性胆汁性肝硬化的药物,但其药效却限于疾病早期,因此迫切需要开发新的胆汁淤积治疗药物。核受体能调控胆汁酸稳态,它作为胆汁淤积治疗的靶标是目前研究的热点。该综述对目前报道最多的核受体进行总结,分析其作为胆汁淤积药物治疗靶标的利弊及应用前景。 展开更多
关键词 胆汁淤积 法尼酯X受体 X受体 组成性雄受体 1 25-羟基维生素D3受体 糖皮激素受体 肝脏X受体 过氧体增殖物活受体 转录因子-E2-相关因子2
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