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基于系统遗传学的细胞黏附分子1介导睡眠剥夺诱发焦虑样行为的基因-表型关联网络分析
1
作者 潘水晶 顾兆禧 +3 位作者 易鹏程 王浩帆 杨春华 米佳 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第1期14-24,共11页
目的探讨杏仁核细胞黏附分子1(CADM1)参与急性睡眠剥夺诱导焦虑情绪的可能分子机制。方法将16只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导急性睡眠剥夺组(PCPA组),PCPA组小鼠连续2 d在8∶00~9∶00 amip给予PCPA(300 mg∙... 目的探讨杏仁核细胞黏附分子1(CADM1)参与急性睡眠剥夺诱导焦虑情绪的可能分子机制。方法将16只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导急性睡眠剥夺组(PCPA组),PCPA组小鼠连续2 d在8∶00~9∶00 amip给予PCPA(300 mg∙kg^(-1)悬浊液),对照组小鼠ip给予等量生理盐水。翻正反射实验检测小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间,旷场实验和高架十字迷宫实验检测小鼠的焦虑样行为;Western印迹法和免疫荧光法检测CADM1在小鼠杏仁核中的表达水平;利用GeneNetwork数据库进行小鼠杏仁核Cadm1基因-基因表达关联分析,筛选关键候选调控基因,并构建Cadm1-焦虑行为表型网络;qPCR实验检测关键候选调控基因的mRNA表达水平。结果与对照组小鼠相比,PCPA组小鼠睡眠潜伏期显著延长(P<0.01),睡眠时间显著缩短(P<0.01),提示PCPA诱导急性睡眠剥夺小鼠模型构建成功。旷场实验中,PCPA组小鼠在旷场中心区域的活动时间和活动距离均显著低于对照组小鼠(P<0.05)。高架十字迷宫实验中,PCPA组小鼠进入开放臂次数百分比和在开放臂停留时间百分比均显著低于对照组小鼠(P<0.05)。Western印迹法和免疫荧光实验结果显示,PCPA组小鼠杏仁核CADM1蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。基于基因-行为学关联网络分析表明,Cadm1与25个焦虑样行为相关基因显著相关。Cadm1共表达基因富集分析表明,Cadm1与γ-氨基丁酸(GABA)能突触信号通路相关(P=4.31e-09),经基因-表型相关联分析筛选获得关键候选基因为亨廷顿蛋白相关蛋白1(Hap1)(r=0.705,P=1.09e-08)、肌醇1,4,5-三磷酸受体1(Itpr1)(r=-0.751,P=3.34e-10)、γ-氨基丁酸A型受体δ亚基(Gabrd)(r=-0.836,P=3.93e-14)、γ-氨基丁酸受体β1亚基(Gabrb1)(r=0.732,P=1.50e-09)和肾上腺素能受体α2A(Adra2a)(r=0.759,P=1.73e-10)。qPCR结果显示,Cadm1可能的关键调控基因Hap1,Gabrb1和Adra2a mRNA水平明显上调(P<0.05,P<0.01),Itpr1和Gabrd mRNA水平明显下调(P<0.01)。结论急性睡眠剥夺导致杏仁核中Cadm1表达水平下调,并通过影响GABA能突触信号通路Hap1,Gabrb1,Adra2a,Itpr1和Gabrd基因表达,诱导焦虑样行为的发生。 展开更多
关键词 焦虑 急性睡眠剥夺 细胞黏附分子1(CADM1) 系统遗传学 Γ-氨基丁酸
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我国神经系统遗传性疾病的研究现状及展望 被引量：2
2
作者 王柠 陈万金 林宇 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2008年第2期95-98,共4页
据统计，在已发现的5000余种单基因遗传病中，累及神经系统的遗传病或综合征约占50％，而与多基因遗传有关的神经系统遗传性疾病的数量则更多。我国人口众多，病例资源丰富，遗传性疾病在病种资源上的优势是国内研究的重要特点。我国神... 据统计，在已发现的5000余种单基因遗传病中，累及神经系统的遗传病或综合征约占50％，而与多基因遗传有关的神经系统遗传性疾病的数量则更多。我国人口众多，病例资源丰富，遗传性疾病在病种资源上的优势是国内研究的重要特点。我国神经系统遗传性疾病的研究从20世纪80年代末开始进入基因和分子水平，近年来取得了可喜成果，国内同仁的研究论文频频发表于较高层次的国际专业期刊，影响力日益增加。 展开更多
关键词 神经系统遗传性疾病 单基因遗传病 多基因遗传 分子水平 专业期刊 研究论文 综合征 资源
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系统遗传学与合成生物学——21世纪的生物工程产业化 被引量：5
3
作者 曾(杰)邦哲 吴超 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期67-71,共5页
基因型-表现型复杂生物系统由多基因群调控,细胞发生的信号传导路径、多基因相互作用与细胞系谱定位形成生物系统的结构-图式发生遗传学,但分子、细胞和器官的结构、图式形成机理还不很清楚。复杂生物系统的图式演化是细胞的物种进化、... 基因型-表现型复杂生物系统由多基因群调控,细胞发生的信号传导路径、多基因相互作用与细胞系谱定位形成生物系统的结构-图式发生遗传学,但分子、细胞和器官的结构、图式形成机理还不很清楚。复杂生物系统的图式演化是细胞的物种进化、细胞形态发育的细胞发生非线性动力学过程,包括:1)物种基因组结构内等位基因替代构成物种内基因多样性调控;2)物种间进化的基因组结构层次级别的自组织化。系统理论应用于系统生态学(Van Dyne GM.1966)、系统生理学(Sagawa K.1973)、系统心理学(Titchener EB.1992)、系统生物医学(Kamada T.1992)、系统生物学(Zieglgansberger W,TolleTR.1993)、系统生物工程与系统遗传学(ZengBJ.1994)的建立,以及遗传学机理的生物系统分析。细胞的基因组结构自组织化形成生物的系统发生,基因组的结构变化形成物种的适应变异,生物体结构的基因组复制与表达的细胞自组织化构成生物个体发生。基于系统遗传学的工程应用,合成生物学探索生物系统泛进化,包括人工生物体的遗传工程、基因调控和仿生智能的纳米生物机器,构成生物系统的人工引导进化。 展开更多
关键词 合成生物学 系统遗传学 生物技术学 人工进化论
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神经系统遗传病的基因检测策略 被引量：1
4
作者 罗巍 陈思 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期798-803,共6页
近年来,各种基因检测技术包括单基因测序、基因Panel、全外显子组测序和全基因组测序等被广泛应用于神经系统遗传病的诊断中。基因检测技术的快速发展使临床医生能够探索表型更为复杂、遗传异质性更大的疾病,帮助他们对疾病作出快速且... 近年来,各种基因检测技术包括单基因测序、基因Panel、全外显子组测序和全基因组测序等被广泛应用于神经系统遗传病的诊断中。基因检测技术的快速发展使临床医生能够探索表型更为复杂、遗传异质性更大的疾病,帮助他们对疾病作出快速且精准的诊断。本文旨在帮助临床医生在种类繁多的基因检测技术中选择合适的方法辅助诊断神经系统遗传病。 展开更多
关键词 神经系统遗传病 基因检测 方法
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表达增强型绿色荧光蛋白的C型禽偏肺病毒反向遗传系统的构建及优化 被引量：1
5
作者 郭禹 程晶 +2 位作者 左玉柱 范京惠 姜海军 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2091-2100,共10页
【目的】禽偏肺病毒(Avian metapneumovrus,aMPV)是副黏病毒科偏肺病毒属成员,其所造成的鸡肿头症和产蛋率下降对养殖业造成严重危害。为更好地预防aMPV并研究其发病机制,本研究将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protei... 【目的】禽偏肺病毒(Avian metapneumovrus,aMPV)是副黏病毒科偏肺病毒属成员,其所造成的鸡肿头症和产蛋率下降对养殖业造成严重危害。为更好地预防aMPV并研究其发病机制,本研究将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)插入C型aMPV(aMPV/C)基因组中,构建表达EGFP的重组aMPV,并使用不同的载体及启动子构建aMPV迷你基因组,来优化aMPV反向遗传操作系统(reverse genetic system,RGS)的构建。【方法】将EGFP插入pBluescript-aMPV RGS的P和M蛋白之间非编码区并进行拯救,观察绿色荧光蛋白的表达情况,同时测定重组病毒滴度及遗传稳定性。为优化RGS的构建,采用含有T7启动子的pBluescript SK(+)和含有T7、CMV启动子的pcDNA3.1两种载体构建aMPV迷你基因组。首先将aMPV/C基因组两端的先导区(leader)和尾随区(trailer)与EGFP的cDNA进行PCR扩增,并切胶回收;其次将各胶回收片段按照leader-EGFP-trailer的顺序进行无缝克隆连接,并测序验证;最后将连接完整的迷你基因组反向插入两个载体中,构建aMPV/C的迷你基因组(pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C)。在拯救迷你基因组的试验中,将两个aMPV/C迷你基因组与3个表达N、P和L蛋白的质粒共转染到BHK-21细胞中,观察绿色荧光蛋白的表达情况。【结果】拯救的aMPV-EGFP重组病毒测序结果显示,EGFP已成功插入aMPV基因组中,并在前3代aMPV-EGFP重组病毒中稳定表达。aMPV-EGFP重组病毒滴度在感染96 h后达到105.5 TCID 50/mL。而pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C两个重组质粒的测序结果也证明了含有EGFP的aMPV迷你基因组构建完成。将3个重组质粒分别与辅助质粒共转染至BHK-21细胞中,转染24 h后观察到细胞中绿色荧光蛋白表达,证明aMPV-EGFP重组病毒及pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C两个aMPV迷你基因均都成功表达了EGFP。【结论】本研究成功构建了两个aMPV迷你基因组并拯救了aMPV-EGFP重组病毒,重组病毒具有良好的遗传稳定性。而CMV和T7作为aMPV/C RGS中的启动子时,二者的拯救效率相同。pBluescript SK(+)和pcDNA3.1均可用于aMPV/C RGS的构建,本研究为aMPV/C RGS的构建提供了多种方法。 展开更多
关键词 C型禽偏肺病毒 迷你基因组 反向遗传系统 CMV启动子 增强绿色荧光蛋白 T7启动子
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红曲霉原生质体的制备、再生及其遗传转化系统 被引量：37
6
作者 周礼红 李国琴 +1 位作者 王正祥 诸葛健 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期423-428,共6页
原生质体是研究和建立真菌遗传转化系统的重要工具。为了建立原生质体介导的红曲霉遗传转化系统,考察了各种细胞壁裂解酶和渗透压稳定剂等对红曲霉原生质体形成和再生的影响。将红曲霉分生孢子在铺有玻璃纸的平板上30℃培养30～40h收获... 原生质体是研究和建立真菌遗传转化系统的重要工具。为了建立原生质体介导的红曲霉遗传转化系统,考察了各种细胞壁裂解酶和渗透压稳定剂等对红曲霉原生质体形成和再生的影响。将红曲霉分生孢子在铺有玻璃纸的平板上30℃培养30～40h收获的菌丝体最有利于原生质体的形成和释放。红曲霉菌丝体形成和释放原生质体最适裂解酶和酶解时间分别为:0.3%lysingenzyme、0.1%cellulase和1%snailase的酶组合,30℃作用2.5h;最适渗透压稳定剂是:1mol/LMgSO4。最适合原生质体再生的培养基为含0.6mol/L蔗糖的CM培养基。原生质体液涂布单层再生培养基的方法,再生率最高,菌株M34和N18分别为8.5%和36.4%。在PEG和CaCl2存在下,以潮霉素B为抗生素选择标记,用质粒pBC Hygro和pNL1共转化菌株M34原生质体,每微克DNA可获得100个稳定转化子。 展开更多
关键词 红曲霉 原生质体 形成与再生 遗传转化系统
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一株类禽型H1N1亚型猪流感病毒的反向遗传系统的建立 被引量：9
7
作者 孟沙沙 乔传玲 +5 位作者 陈艳 杨焕良 刘丽萍 尹航 辛晓光 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期91-94,共4页
为建立H1N1亚型猪流感病毒A/swine/Jiangsu/40/2011(JS40)的反向遗传系统,本研究分别构建了JS40株8个基因节段的重组质粒,经转染293T和MDCK混合细胞,拯救出病毒R-JS40。序列测定结果表明,救获病毒与亲本病毒的核苷酸序列一致,无氨基酸变... 为建立H1N1亚型猪流感病毒A/swine/Jiangsu/40/2011(JS40)的反向遗传系统,本研究分别构建了JS40株8个基因节段的重组质粒,经转染293T和MDCK混合细胞,拯救出病毒R-JS40。序列测定结果表明,救获病毒与亲本病毒的核苷酸序列一致,无氨基酸变异,可以稳定传代;抗原性未发生变化;对小鼠的致病性结果显示R-JS40与JS40对小鼠的组织嗜性以及在肺脏中复制的病毒滴度基本一致。以上结果表明R-JS40保持了亲本病毒JS40的生物学特性,该病毒反向遗传操作系统的建立,为进一步开展病毒的致病分子基础以及新型疫苗的研制提供有效的技术平台。 展开更多
关键词 猪流感病毒 类禽型 H1N1 反向遗传系统
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新疆杨高效遗传转化系统的建立 被引量：20
8
作者 诸葛强 王婕琛 +2 位作者 陈英 黄敏仁 王明庥 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2003年第4期6-10,共5页
选择新疆杨(PopulusalbaL.var.pyramidalisBge.)为遗传转化受体材料,为建立根癌农杆菌介导新疆杨高效遗传转化系统,从预培养时间、侵染时间、共培养时间、添加乙酰丁香酮(AS)的时机、共培养培养基中添加乙酰丁香酮浓度、侵染菌液的制备... 选择新疆杨(PopulusalbaL.var.pyramidalisBge.)为遗传转化受体材料,为建立根癌农杆菌介导新疆杨高效遗传转化系统,从预培养时间、侵染时间、共培养时间、添加乙酰丁香酮(AS)的时机、共培养培养基中添加乙酰丁香酮浓度、侵染菌液的制备方法、外植体继代方式等7个方面优化筛选。结果显示较合适的转化系统为:预培养8h,农杆菌菌液(OD600=0.4)侵染15min,共培养5d,侵染菌液的最优制备方法是液体培养活化农杆菌2次加离心收集菌体重悬,共培养培养基中添加乙酰丁香酮80μmol/L。新疆杨叶盘转化频率可达38.10%。 展开更多
关键词 新疆杨 遗传转化系统 根癌农杆菌 农杆菌
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家蚕基因库保存遗传系统白卵突变的杂交鉴定 被引量：4
9
作者 代方银 鲁成 +1 位作者 陈先弟 向仲怀 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第6期479-483,共5页
用杂交分析的方法 ,采用各已知白卵基因的标志系统对家蚕基因资源库 2 1个未知基因的白色卵系统进行鉴定 ,结果 :①有 3个系统为母性遗传白卵 ,基因座位均与w - 1相同 ,其中 2个与w - 1遗传模式完全一致 ,但另 1个表现为混合型母性遗传 ... 用杂交分析的方法 ,采用各已知白卵基因的标志系统对家蚕基因资源库 2 1个未知基因的白色卵系统进行鉴定 ,结果 :①有 3个系统为母性遗传白卵 ,基因座位均与w - 1相同 ,其中 2个与w - 1遗传模式完全一致 ,但另 1个表现为混合型母性遗传 (F1似母 ,F2 普通遗传 ) ,可能为一新的卵色基因 ;②有 4个系统与w - 2杂交后代不分离 ,很可能直接由w - 2基因支配 ;③地方品种 19- 340为黑眼浅褐色白卵 ,普通遗传 ,与w - 3杂交后代无正常型黑色卵分离 ,初步推定为w - 3复等位基因群又一新成员 ;④有 13个系统与桃红眼白卵 (pe)系杂交后代不分离 ,且卵色纯一 ,初步推定它们均由pe基因支配。此外 ,部分白卵系统具有红色卵 (re)的re/re或re/ 展开更多
关键词 家蚕基因库 保存 遗传系统 白卵突变 杂交鉴定 互补测验
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利用高效农杆菌遗传转化系统将ACP反义基因片段导入油菜 被引量：8
10
作者 张承妹 钱炳俊 +4 位作者 许斌贝 黄亚红 潘爱虎 梁婉琪 张大兵 《上海农业学报》 CSCD 2003年第2期5-8,共4页
通过对已有的油菜农杆菌遗传转化体系的改进 ,建立了一种利用农杆菌感染油菜子叶柄的高效遗传转化方法 ,经过农杆菌感染的子叶柄在含有 6 BA 2 .0mg/L ,IBA 0 .15mg/L ,AgNO33 .5mg/L的MS培养基上由卡那霉素抗性愈伤组织分化出抗性幼苗... 通过对已有的油菜农杆菌遗传转化体系的改进 ,建立了一种利用农杆菌感染油菜子叶柄的高效遗传转化方法 ,经过农杆菌感染的子叶柄在含有 6 BA 2 .0mg/L ,IBA 0 .15mg/L ,AgNO33 .5mg/L的MS培养基上由卡那霉素抗性愈伤组织分化出抗性幼苗的频率达到 12 .2 8%。利用已经构建的含有油菜Napin启动子加上反义ACP脱饱和酶第一外显子、内含子的基因片段的植物双元表达载体 pNACP ,将该反义 ACP基因片段转入油菜“沪油 15” ;PCR和GUS染色结果表明抗性植株中有 60 %的植株含有导入的目的基因。 展开更多
关键词 高效农杆菌 遗传转化系统 ACP反义基因 基因片段 基因导入 油菜
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猕猴遗传背景管理系统的编码设计 被引量：2
11
作者 肖革新 王斌 +4 位作者 代解杰 江勤芳 彭辉 唐东红 叶尤松 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第6期380-380,共1页
关键词 猕猴 遗传背景管理系统 编码设计
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枯草杆菌Ki－2－132高表达遗传工程系统的研究 被引量：2
12
作者 潘学峰 章银梅 汤懋 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第6期46-51,共6页
利用芽孢杆菌多效调控基因ｈｐｒ、ｄｅｑＱａ、ｄｅｇＲ、ｄｅｇＵ／５３２（Ｈｙ）等和枯草杆菌Ｋｉ－２－１３２自身的积生孢、感受态相关基因的协调作用，构建了系列的高表达遗传工程宿主。这些宿主对于ＡＰｒＥ都实现了较高水平的... 利用芽孢杆菌多效调控基因ｈｐｒ、ｄｅｑＱａ、ｄｅｇＲ、ｄｅｇＵ／５３２（Ｈｙ）等和枯草杆菌Ｋｉ－２－１３２自身的积生孢、感受态相关基因的协调作用，构建了系列的高表达遗传工程宿主。这些宿主对于ＡＰｒＥ都实现了较高水平的表达。其中，由ｈｐｒ和ｃｏｍ、ｓｐｏ等配合的宿主表达ＡｐｒＥ的能力比野生型宿主提高了１００—２００倍。 展开更多
关键词 枯草杆菌 调控基因 遗传工程系统
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H4N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建 被引量：2
13
作者 王帅 梁立滨 +4 位作者 邓国华 施建忠 姜永萍 关云涛 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期90-93,共4页
为建立H4N2亚型禽流感病毒(AIV)反向遗传操作系统,本研究构建了A/Duck/JiangXi/21046/2012(H4N2)(W-DKJX)的8个重组质粒,拯救出A/Duck/JiangXi/21046/2012(H4N2)(R-DKJX)。全基因组序列测序结果表明,拯救病毒R-DKJX与野生病毒W-DKJX的... 为建立H4N2亚型禽流感病毒(AIV)反向遗传操作系统,本研究构建了A/Duck/JiangXi/21046/2012(H4N2)(W-DKJX)的8个重组质粒,拯救出A/Duck/JiangXi/21046/2012(H4N2)(R-DKJX)。全基因组序列测序结果表明,拯救病毒R-DKJX与野生病毒W-DKJX的核苷酸序列完全相同。受体结合试验表明,野生病毒与拯救病毒均具有人型受体结合特性。以106EID50/50μL剂量鼻腔感染BALB/c小鼠,病毒均仅在小鼠的呼吸道复制,对BALB/c小鼠呈低致病性,可以在感染早期引起小鼠体重轻微下降但并未引起发病或死亡。以上结果表明,两者保持了一致的生物学特性。H4N2亚型AIV反向遗传操作系统的构建为进一步研究H4亚型AIV的致病机理及其跨种传播分子机制等提供了技术平台。 展开更多
关键词 H4N2 禽流感病毒 反向遗传操作系统
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基于DNA-launched的猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的建立 被引量：4
14
作者 曹宗喜 焦培荣 +3 位作者 谭树义 叶保国 亓文宝 张桂红 《动物医学进展》 北大核心 2016年第11期1-8,共8页
为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,将PRRSV全基因组分6段克隆,构建获得6个重组质粒,先由A1和A2片段或B1和B2片段连接构成A片段或B片段,然后D、C、B和A片段依次亚克隆入pOKq载体。在基因组5′端和3′端分别加上CMV... 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,将PRRSV全基因组分6段克隆,构建获得6个重组质粒,先由A1和A2片段或B1和B2片段连接构成A片段或B片段,然后D、C、B和A片段依次亚克隆入pOKq载体。在基因组5′端和3′端分别加上CMV启动子序列和BGH终止信号肽,全基因组510位核苷酸突变引入遗传标记位点FseⅠ。测序正确的全基因组质粒命名为pOK-A2BCD。再将pOK-A2BCD质粒转染BHK-21细胞,拯救病毒通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,结果表明拯救病毒成功,为进一步研究PRRSV致病性等相关分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传操作系统 构建
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遗传模糊系统的研究概述 被引量：5
15
作者 卢奕南 张弘 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z3期587-590,共4页
模糊系统能够解决许多应用领域中的不同问题。目前众多学者对增加模糊系统学习和自适应能力的研究兴趣不断增加。神经模糊系统和遗传模糊系统,将软计算领域中的神经网络和遗传算法与模糊系统的近似推理方法相结合,成为目前两个最成功的... 模糊系统能够解决许多应用领域中的不同问题。目前众多学者对增加模糊系统学习和自适应能力的研究兴趣不断增加。神经模糊系统和遗传模糊系统,将软计算领域中的神经网络和遗传算法与模糊系统的近似推理方法相结合,成为目前两个最成功的模糊系统。这里介绍了遗传模糊系统的各种模型和应用领域,分析了此领域的研究方向和趋势。 展开更多
关键词 基于规则的模糊系统 遗传算法 遗传模糊系统统 数据库 规则库 知识库
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞传代毒株反向遗传系统的优化 被引量：1
16
作者 李燕华 韦祖樟 +1 位作者 谭菲菲 袁世山 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第3期13-20,共8页
反向遗传系统已成为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV)结构与功能非常重要的手段,并且在设计基因工程疫苗中发挥不可替代的作用。因而,有效提高感染性克隆拯救病毒的效率和稳定性... 反向遗传系统已成为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV)结构与功能非常重要的手段,并且在设计基因工程疫苗中发挥不可替代的作用。因而,有效提高感染性克隆拯救病毒的效率和稳定性以及降低经济成本是一个急需解决的课题。本研究在已构建完成的高致病性PRRSV细胞传代毒株反向遗传系统(pAJXM)的基础上,做了以下三方面的工作:(1)将T7启动子换成hCMV(人类巨细胞病毒,Human cytomegalovirus)启动子,从而全长cDNA克隆不需经过体外转录成mRNA的过程,直接通过DNA转染MARC-145细胞拯救病毒;(2)研究hCMV启动子的TATA框与病毒基因组5末端之间最佳的碱基数目,使体内转染获得的病毒基因组5末端序列为病毒的真实序列;(3)在病毒基因组3末端添加丁型肝炎病毒核酶(delta hepatitis virus ribozyme,HDVr)序列,体内转染获得的病毒基因组3末端的非病毒序列通过核酶自动去除。研究发现,基于DNA转染的反向操作系统是可行的,并且hCMV启动子的TATA框与病毒基因组5末端之间的碱基数目设置为25和在病毒基因组3末端添加HDVr序列后,能够有效地提高全长感染性cDNA克隆的病毒拯救效率和稳定性。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传系统 人类巨细胞病毒启动子 丁型肝炎病毒核酶
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一种遗传蚁群系统的研究 被引量：1
17
作者 陈乔礼 吴怀宇 程磊 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2007年第12期44-46,50,共4页
在遗传蚁群系统中,为减少蚂蚁构建路径的时间消耗,引入遗传操作,使得当前迭代中蚂蚁构建的路径部分来自于之前迭代获取的优秀巡回路径的遗传;同时为减少由遗传操作产生的算法停滞的影响、提高算法解的质量,对蚁群构建的路径施行2opt变... 在遗传蚁群系统中,为减少蚂蚁构建路径的时间消耗,引入遗传操作,使得当前迭代中蚂蚁构建的路径部分来自于之前迭代获取的优秀巡回路径的遗传;同时为减少由遗传操作产生的算法停滞的影响、提高算法解的质量,对蚁群构建的路径施行2opt变异操作。通过旅行商问题测试算法性能,并与蚁群系统进行比较。实验表明,遗传蚁群系统搜索效率高,而且解的质量优于蚁群系统。 展开更多
关键词 遗传蚁群系统 蚁群优化 遗传算法 旅行商问题
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遗传模糊系统的分类器融合
18
作者 刘明 袁保宗 《北京交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期1-5,共5页
将遗传模糊系统引入分类器融合,并且提出了一种快速的遗传模糊系统设计方法,在该方法中对传统的产生初始群体的方法和交叉操作进行了改进．本文方法在从ELENA数据集和UCI数据集中选择的3个大样本数据集上进行了测试,与当前有代表性的分... 将遗传模糊系统引入分类器融合,并且提出了一种快速的遗传模糊系统设计方法,在该方法中对传统的产生初始群体的方法和交叉操作进行了改进．本文方法在从ELENA数据集和UCI数据集中选择的3个大样本数据集上进行了测试,与当前有代表性的分类器融合方法进行了比较实验．实验结果表明,该方法在缩短训练时间以后仍然能够得到模糊规则数少,分类精度高的分类器融合系统． 展开更多
关键词 模式识别 分类器融合 遗传模糊系统
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坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立
19
作者 闫大为 吴晓刚 +5 位作者 李雪松 石迎 冯琳琳 崔宏锐 李国新 李泽君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第4期8-13,共6页
本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5'端含有T 7启动子的病毒全长c DNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48 h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种D... 本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5'端含有T 7启动子的病毒全长c DNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48 h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种DF-1细胞,72 h后进行间接免疫荧光(indirect immunofulorescence,IFA)和RT-PCR鉴定,结果表明拯救病毒成功。序列测定结果显示,拯救毒的全基因组序列与亲本毒完全一致,表明MM1775反向遗传操作系统构建成功,为进一步研究坦布苏病毒致病性等相关分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 MM1775 反向遗传操作系统
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论遗传系统的统一性
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作者 吴沿友 《生物学杂志》 CAS CSCD 1996年第2期4-7,共4页
论遗传系统的统一性吴沿友（中国科学院地球化学研究所Ｋａｒｓｔ生态站，贵阳５５０００２）每种生物的生长、发育、繁殖和进化的方式都各有特点、各不相同，也就是说它们具有一特殊性。但是矛盾的特殊性都以矛盾的普遍性的存在为基础... 论遗传系统的统一性吴沿友（中国科学院地球化学研究所Ｋａｒｓｔ生态站，贵阳５５０００２）每种生物的生长、发育、繁殖和进化的方式都各有特点、各不相同，也就是说它们具有一特殊性。但是矛盾的特殊性都以矛盾的普遍性的存在为基础，生物的运动也不例外。生物的遗传是... 展开更多
关键词 遗传学 遗传系统
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