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糖皮质激素受体GR真核表达载体的构建与鉴定
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作者 李秀英 徐晓玉 +2 位作者 孙锦帆 陈林 杨国汉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第9期943-945,共3页
目的:构建糖皮质激素GR的真核表达载体,为探讨GR与中医肾阳虚的关系奠定基础。方法:以GR基因为靶基因,以pBS/U6-Neo质粒为载体,设计构建重组体,根据GR mRNA基因序列,设计有小发夹结构的2对寡核苷酸序列,克隆到空载体pBS/U6-Neo,转化DH5... 目的:构建糖皮质激素GR的真核表达载体,为探讨GR与中医肾阳虚的关系奠定基础。方法:以GR基因为靶基因,以pBS/U6-Neo质粒为载体,设计构建重组体,根据GR mRNA基因序列,设计有小发夹结构的2对寡核苷酸序列,克隆到空载体pBS/U6-Neo,转化DH5a菌株,提取质粒,进行PCR鉴定和测序分析。结果:经PCR鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功。结论:利用RNA干扰技术可成功构建小干扰RNA重组体,为后续稳定转染及培育转基因小鼠奠定基础。 展开更多
关键词 糖皮质受体gr RNA干扰 pBS/U6-Neo载体
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糖皮质激素与抑郁发病相关机制研究进展 被引量:42
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作者 陈姣 楚世峰 陈乃宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1493-1495,共3页
抑郁症是一种情感障碍性疾病,临床上以兴趣缺乏、情绪低落、睡眠障碍等为主要病症表现,部分患者常伴有自杀倾向。目前研究的抑郁发病机制主要有:单胺假说、神经营养再生假说、神经内分泌假说、表观遗传学假说。近年来的研究发现糖皮质... 抑郁症是一种情感障碍性疾病,临床上以兴趣缺乏、情绪低落、睡眠障碍等为主要病症表现,部分患者常伴有自杀倾向。目前研究的抑郁发病机制主要有:单胺假说、神经营养再生假说、神经内分泌假说、表观遗传学假说。近年来的研究发现糖皮质激素和其受体在抑郁的发病机制中起着重要的作用。糖皮质激素是肾上腺分泌的一种激素,在长期应激的作用下,HPA轴持续激活,导致糖皮质激素的持续分泌,引起神经内分泌系统紊乱,在抑郁的发病机制中有重要意义。该文主要针对糖皮质激素及其受体对抑郁发病相关机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 抑郁 糖皮质激素 后生机制 糖皮质激素受体(gr) DNA甲基化 FKBP5
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RNA干扰联合Cre-loxP系统建立小鼠巨噬细胞RAW264.7 GR表达抑制模型
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作者 李晓清 杨国汉 +3 位作者 李秀英 钟瑜 陈林 徐晓玉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1217-1220,共4页
目的:应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)及Cre-loxP系统构建针对目的基因糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)表达抑制细胞模型。方法:设计并合成两对RNAi靶序列,连接至pBS/U6-Neo载体,联合应用Cre-loxP系统及RNAi构建针对目... 目的:应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)及Cre-loxP系统构建针对目的基因糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)表达抑制细胞模型。方法:设计并合成两对RNAi靶序列,连接至pBS/U6-Neo载体,联合应用Cre-loxP系统及RNAi构建针对目的基因GR的两对重组质粒,对构建的重组质粒采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)及测序的方法进行鉴定,将构建成功的重组质粒及Cre-ERT2质粒稳定共转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用半定量逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot的方法分别检测诱导RNAi表达后GR在mRNA及蛋白水平的表达情况。结果:构建的两个针对目的基因GR的重组质粒可显著降低GR在mRNA及蛋白水平的表达。结论:联合采用RNAi及Cre-loxP系统能可控的稳定降低小鼠巨噬细胞RAW264.7中的GR表达。 展开更多
关键词 糖皮质激素受体(gr) RNA干扰 Cre-loxP系统
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激素抵抗型哮喘发病机制的研究进展 被引量:9
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作者 朱桂萍(综述) 叶伶 金美玲(审校) 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期680-684,共5页
激素抵抗型哮喘治疗困难,一直是哮喘研究的重点和难点。研究发现糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)异常、组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase,HDAC2)活性降低等经典机制在激素抵抗型哮喘发病中起重要作用。此外,Th细胞免... 激素抵抗型哮喘治疗困难,一直是哮喘研究的重点和难点。研究发现糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)异常、组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase,HDAC2)活性降低等经典机制在激素抵抗型哮喘发病中起重要作用。此外,Th细胞免疫失衡、感染、肥胖及非编码RNA、细胞自噬等因素在激素抵抗型哮喘中的作用也是近年研究的热点。本文对以上激素抵抗型哮喘发病机制的研究进展予以综述,以提高对激素抵抗型哮喘的认识,为未来的治疗提供方向。 展开更多
关键词 激素抵抗型哮喘 糖皮质激素受体(gr) 组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2) TH1 TH17 感染 肥胖
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