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题名桑丁香假单胞菌糖基水解酶基因的克隆及表达分析
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作者
阮长浩
李兵
沈卫德
王文兵
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机构
江苏大学生命科学研究院
苏州大学生命科学学院
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出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期172-175,共4页
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基金
国家重点基础研究发展计划"973"项目(编号2005CB-121005)
江苏省教育厅高校科学研究项目(编号02KJD-18003)
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文摘
桑疫病的病原是一种丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae),其感染造成桑树幼枝断裂,但分解桑枝的机制尚未发现。以GenBank中同种的另一丁香假单胞菌的序列为参照,通过PCR法克隆了桑疫病病原细菌的糖基水解酶基因。该基因的读码框为1 173 bp,编码390个氨基酸,与已公布的丁香假单胞菌属细菌(pv.syringae B728 a)的纤维素酶基因的核苷酸同源性为94%,氨基酸的同源性为97%。对该肽段的序列进行分析,确定了保守位点和各个功能域的序列。将该基因克隆到原核表达载体pET28 a中,在大肠杆菌中进行了表达。Western blotting检测的结果表明,该基因在大肠杆菌中获得高效表达,酶活力为2.3×103U/L,说明该基因产物具有分解纤维素的酶活性。
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关键词
荧光假单胞菌
糖基水解酶基因
桑疫病
酶活性
桑纤维素
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Keywords
Pseudomonas syringae
Cellulase gene
Enzyme activity
Mulerry bacterial wilt
Mulberry cellulose
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分类号
S888.71
[农业科学—特种经济动物饲养]
Q78
[生物学—分子生物学]
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