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题名糖原贮积症0型斑马鱼疾病模型的构建及表型分析
被引量：1
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作者
黄姣
霍锦倩
刘姣
陈洁
祖尧
张庆华
任建峰
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机构
上海海洋大学科技部海洋生物科学国际联合研究中心
上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2021年第12期43-52,共10页
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基金
上海市科委国际科技合作项目(15410723300)。
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文摘
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建糖原贮积症0(GSD0)型斑马鱼疾病模型,研究该病的发病进程和机制。方法针对gys1和gys2基因各设计一个靶点,进行基因编辑和突变体筛选;利用qPCR技术检测早期发育阶段和成鱼不同组织基因表达情况,通过PAS染色技术检测糖原累积情况。结果获得了gys1和gys2基因各两种有效突变类型的F2纯合突变体,成功构建了GSD0型斑马鱼疾病模型。gys^(1-/-)纯合子F3早期胚胎发育迟缓,48 hpf内全部死亡,而gys^(2-/-)纯合子发育正常。基因表达分析显示,野生型斑马鱼早期发育阶段(0~125 hpf),gys1和gys2的表达先下降后上升,受精卵时期表达最高;成鱼阶段,gys1在心脏和肌肉组织中高表达,gys2在肝中高表达。PAS糖原染色显示,与野生型相比,gys^(1-/-)心脏和肌肉没有明显的糖原积累,gys^(^(2-/-))肝没有明显的糖原积累。结论gys1和gys2基因敲除斑马鱼模型的表型与小鼠模型相似,但也存在差异;Gys1敲除小鼠模型中F2大部分纯合子死亡,斑马鱼gys^(^(1-/-))纯合子F2正常生长发育,而自交产生的F3不能存活。斑马鱼gys1和gys2敲除突变体的制备,为进一步研究人类糖原储存障碍GSD0的发病进程和机制提供了材料。
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关键词
糖原贮积症gsd0
疾病模型
斑马鱼
基因敲除
gys1
gys2
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Keywords
glycogen storage syndrome type 0
disease model
zebrafish
knockout
gys1
gys2
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分类号
R-33
[医药卫生]
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