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miR-135b靶向GSK3B抑制地塞米松诱导成骨细胞凋亡 被引量：1
1
作者 肖建生 张鹏 +1 位作者 赵洪洲 钟俊青 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1588-1593,共6页
目的探究miR-135b靶向糖原合成酶激酶3B(glycogen synthase kinase 3B,GSK3B)对地塞米松诱导的成骨细胞(MC3T3-E1)凋亡的影响。方法CCK8检测地塞米松对MC3T3-E1细胞活力的影响,筛选最适地塞米松浓度进行后续实验。流式细胞术检测细胞凋... 目的探究miR-135b靶向糖原合成酶激酶3B(glycogen synthase kinase 3B,GSK3B)对地塞米松诱导的成骨细胞(MC3T3-E1)凋亡的影响。方法CCK8检测地塞米松对MC3T3-E1细胞活力的影响,筛选最适地塞米松浓度进行后续实验。流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR检测miR-135b和GSK3B表达,荧光素酶报告实验验证miR-135b和GSK3B靶向作用关系。细胞实验分为对照组(Control)、地塞米松组(Dex)、阴性对照mimics组(mimics NC)、miR-135b组、miR-135b+糖原合成酶激酶3B组(miR-135b+pc-GSK3B)。蛋白印迹检测蛋白表达。结果与对照组比较,Dex组细胞凋亡增加,并且miR-135b表达下降,GSK3B表达升高,荧光素酶报告实验显示,miR-135b和GSK3B存在靶向作用关系。与Dex组比较,miR-135b组细胞凋亡减少,同时GSK3B、Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平下降,Bcl-2蛋白水平升高,与miR-135b组比较,miR-135b+pc-GSK3B组细胞凋亡增加,同时GSK3B、Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平升高,Bcl-2蛋白水平降低。结论miR-135b可通过靶向作用于GSK3B,抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡,这一作用与其对Bax/Bcl-2表达和caspase-3/9活化的调控有关。 展开更多
关键词 成骨细胞 凋亡 地塞米松 糖原合成酶激酶3b miR-135b
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人参皂苷Rg1抑制叔丁基过氧化氢诱导的原代大鼠皮层神经元损伤 被引量：4
2
作者 逯丹 舒晓明 +5 位作者 张婵娟 赵佳仪 朱丽红 戚仁斌 王华东 陆大祥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期479-485,共7页
目的:观察人参皂苷Rg1对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的原代大鼠皮层神经元损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法:将神经元随机分为正常对照组、10μmol/L t-BHP组及10μmol/L t-BHP+10μmol/L人参皂苷Rg1组,培养24 h。采用MTT检测不同... 目的:观察人参皂苷Rg1对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的原代大鼠皮层神经元损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法:将神经元随机分为正常对照组、10μmol/L t-BHP组及10μmol/L t-BHP+10μmol/L人参皂苷Rg1组,培养24 h。采用MTT检测不同浓度t-BHP处理的神经元活性,神经元三维重建研究神经元平均总纤维长度及总突起数量,免疫荧光检测caspase-3表达水平及免疫印迹方法检测Bcl-2、caspase-3以及磷酸化糖原合成酶激酶3β(pGSK-3β)蛋白表达水平。结果:10μmol/L人参皂苷Rg1能够对抗10μmol/L t-BHP引起的原代大鼠皮层神经元活性水平的降低,并且上调Bcl-2及pGSK-3β蛋白表达量,降低caspase-3活化为cleaved caspase-3的水平(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1可能通过提高GSK-3β自身磷酸化从而增强神经元的抗t-BHP损伤能力。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 叔丁基过氧化氢 糖原合成酶激酶3b
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扁蒴藤素经AKT/GSK-3β信号通路增强乳腺癌MCF-7细胞对多柔比星的敏感性
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作者 程超 王胄 张卫群 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2025年第8期823-830,共8页
目的:探讨扁蒴藤素(PT)通过蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路对人乳腺癌细胞MCF-7多柔比星(DOX)敏感性的影响。方法:体外培养MCF-7细胞并建立DOX耐药细胞MCF-7/DOX。MCF-7细胞设NC组、L-PT组(2μmol/L PT)、M-PT组(4... 目的:探讨扁蒴藤素(PT)通过蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路对人乳腺癌细胞MCF-7多柔比星(DOX)敏感性的影响。方法:体外培养MCF-7细胞并建立DOX耐药细胞MCF-7/DOX。MCF-7细胞设NC组、L-PT组(2μmol/L PT)、M-PT组(4μmol/L PT)、H-PT组(8μmol/L PT)、H-PT+SC79组(8μmol/L PT+10μmol/L的AKT/GSK-3β信号通路抑制剂SC79)、H-PT+LY294002组(8μmol/L PT+2.5μmol/L的AKT/GSK-3β信号通路激活剂LY294002)。MCF-7/DOX细胞设MCF-7/DOX组(未处理)、DOX组(50 nmol/L DOX)、PT+DOX组(8μmol/L PT和50 nmol/L DOX)、PT+DOX+SC79组(8μmol/L PT+50 nmol/L DOX+10μmol/L SC79)、PT+DOX+LY294002组(8μmol/L PT+50 nmol/L DOX+2.5μmol/L LY294002)。采用MTT法、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验及WB法分别检测细胞增殖、集落形成数、迁移、侵袭和AKT/GSK-3β信号通路蛋白表达。建立MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,观察PT对移植瘤生长、移植瘤组织中AKT/GSK--3β信号通路蛋白表达的影响。结果:与NC组相比,L-PT、M-PT、H-PT组MCF-7细胞增殖率、集落形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均呈PT浓度依赖性降低(均P<0.05);与H-PT组对比,H-PT+SC79组MCF-7细胞上述指标变化趋势与上述相反,PT+DOX+LY294002组MCF-7细胞上述指标变化趋势与上述相同(均P<0.05)。MCF-7/DOX组与DOX组细胞增殖率、集落形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达无明显差异(均P > 0.05);分别与MCF-7/DOX组、DOX组对比,PT+DOX组MCF-7/DOX细胞上述指标均降低(均P<0.05);对比PT+DOX组,PT+DOX+SC79组上述指标均升高,PT+DOX+LY294002组上述指标均降低(均P<0.05)。裸鼠移植瘤实验显示,与对照组和DOX相比,PT+DOX组移植瘤质量、体积、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均降低(均P<0.05)。结论:PT抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并增强其对DOX的化疗敏感性,其机制与抑制AKT/GSK-3β信号通路有关。 展开更多
关键词 扁蒴藤素 蛋白激酶b/糖原合成酶激酶-3β 乳腺癌 MCF-7细胞 化疗敏感性
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