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新基因SPATA12抑制肿瘤细胞增殖的实验研究 被引量：1
1
作者 刘志文 林奕婷 +3 位作者 刘选明 余伟伟 章运生 李丹 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期222-227,共6页
目的:探讨新基因精子发生相关基因12(spermatogenesis associated gene 12,SPATA12)对肿瘤细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法:采用组织芯片原位杂交技术分析SPATA12在睾丸肿瘤中的表达谱;四甲基偶氮唑盐[3-(4.5-dimethylthiazol-2-yl)... 目的:探讨新基因精子发生相关基因12(spermatogenesis associated gene 12,SPATA12)对肿瘤细胞增殖的抑制作用及可能机制。方法:采用组织芯片原位杂交技术分析SPATA12在睾丸肿瘤中的表达谱;四甲基偶氮唑盐[3-(4.5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]比色法、平板集落形成实验分析SPATA12对肿瘤细胞增殖能力、集落形成能力的影响;反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)分析SPATA12对肿瘤细胞周期基因表达水平的改变。结果:组织芯片原位杂交结果发现SPATA12基因在正常睾丸组织表达,而在精原细胞瘤等睾丸肿瘤中均表达缺失;MTT和平板集落形成实验表明SPATA12可明显地抑制肿瘤细胞的增殖能力和集落形成能力;RT-PCR实验显示SPATA12可抑制周期蛋白(cyclin)A1的表达,使cyclin D1表达下调,而对cyclin B1和cyclin E1无显著影响。结论:SPATA12可能在肿瘤的发生中扮演抑制因子的角色,并通过调控细胞周期基因发挥作用。 展开更多
关键词 精子发生相关基因12 肿瘤抑制 细胞周期基因
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HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸组织中的细胞定位及表达差异分析 被引量：2
2
作者 朱爱文 刘海霞 +5 位作者 德庆卓嘎 韩大勇 格桑加措 闫伟 平措班旦 朱戈辉 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期967-974,共8页
热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA... 热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA6在雄性彭波半细毛羊生殖过程中的表达规律和细胞定位,以不同年龄阶段(3月龄、12月龄和3岁龄)彭波半细毛羊睾丸组织为研究对象,运用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法(IHC)从转录和翻译水平检测了HSPA2和SPATA6在不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的表达水平和分布模式,分析预测HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸发育和精子发生过程中的调控作用。结果表明:12月龄和3岁龄彭波半细毛羊睾丸组织中HSPA2 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01);12月龄SPATA6 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01),显著高于3岁龄(P<0.05)。不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的支持细胞和间质细胞中HSPA2和SPATA6蛋白均有分布。初步推断,HSPA2和SPATA6的表达水平变化在调控彭波半细毛羊精子发生过程和促进精子成熟中具有重要作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 热休克蛋白A2 精子发生相关基因6 睾丸 表达定位 免疫组化 蛋白质免疫印迹
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一种新的cDNA末端快速扩增获取全长cDNA的方法 被引量：5
3
作者 邱为民 张思仲 +2 位作者 武辉 张戈 肖翠英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期480-482,共3页
为克隆精子发生相关基因的全长cDNA ,根据mRNA差异显示获得的ESTs设计引物 ,利用一种新的cDNA末端快速扩增方法 (SMARTRACE)扩增该EST的 5′末端 ,并进行克隆测序 ,与mRNA差异显示获得ESTs拼接后 ,获得了三个新的全长cDNA。结果表明 ,SM... 为克隆精子发生相关基因的全长cDNA ,根据mRNA差异显示获得的ESTs设计引物 ,利用一种新的cDNA末端快速扩增方法 (SMARTRACE)扩增该EST的 5′末端 ,并进行克隆测序 ,与mRNA差异显示获得ESTs拼接后 ,获得了三个新的全长cDNA。结果表明 ,SMARTRACE是一种简便、有效的克隆cDNA5′末端未知序列的技术。 展开更多
关键词 CDNA末端快速扩增 精子发生相关基因 睾丸
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