检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质: 1; 作者李震储炬 +2 位作者庄英萍张嗣良袁中一《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期178-183,188,共7页; 采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析，从重组大肠杆菌DH5α菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶（AfPGA）。经纯化，AfPGA纯度较粗酶提高50．6倍、比活达到212．7U／mg，经HPLC测定纯度为92．8％... 展开更多; 关键词粪产碱杆菌青霉素G酰化酶阴离子交换层析疏水层析分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化被引量：1: 2; 作者陶金倪孟祥《化学与生物工程》 CAS 2016年第4期55-58,共4页; 采用热激法将含粪产碱杆菌D-氨基酰化酶基因载体的质粒导入大肠杆菌,筛选重组子,对该工程菌产生的D-氨基酰化酶用Ni 2+柱进行分离纯化;通过单因素实验优化D-氨基酰化酶的发酵条件。结果表明,纯化后的D-氨基酰化酶比活力为456.71U·m... 展开更多; 关键词 D-氨基酰化酶粪产碱杆菌分离纯化发酵条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

粪产碱杆菌ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性被引量：5: 3; 作者赵卫松邱立红 +5 位作者郭庆港鹿秀云李社增王培培张晓云马平《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期472-480,共9页; 为明确粪产碱杆菌Alcaligenes faecalis ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性,采用丙酮沉淀、超声波破碎和高速离心等方法,提取制备了ZWS11菌株的胞外和胞内粗酶液以及菌体碎片悬浮液,并分别测定了其酶活力。结果表明：当V（菌体发酵液）... 展开更多; 关键词粪产碱杆菌烟嘧磺隆丙酮沉淀胞外粗酶液降解酶酶促降解; 在线阅读下载PDF 职称材料

来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达: 4; 作者侯欣彤董媛 +5 位作者林瑞东于梁任媛媛李剑光高朝辉滕利荣《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1670-1674,共5页; 将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳... 展开更多; 关键词 D-氨基酰化酶产碱杆菌基因合成融合表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

增强组成型重组大肠杆菌质粒稳定性的发酵策略被引量：1: 5; 作者苟斌全张嗣良 +5 位作者储炬王永红庄英萍黄华李震袁中一《化学与生物工程》 CAS 2008年第10期23-26,共4页; 质粒稳定性是影响基因工程菌外源蛋白表达的重要因素,同时,外源蛋白的表达又影响着质粒稳定性。与诱导型表达系统相比,在组成型表达系统中,由于外源蛋白的持续表达,导致细胞代谢负担加重,质粒稳定性的控制更加困难。通过对组成型大肠杆... 展开更多; 关键词质粒稳定性组成型表达系统粪产碱杆菌青霉素酰化酶补料批发酵; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质: 1; 作者李震储炬庄英萍张嗣良袁中一; 机构华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室; 出处《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期178-183,188,共7页; 基金上海市科委重大专项(05DZ19326); 文摘采用DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Butyl-Sepharose CL 4B疏水层析，从重组大肠杆菌DH5α菌体中分离纯化得到粪产碱杆菌青霉素G酰化酶（AfPGA）。经纯化，AfPGA纯度较粗酶提高50．6倍、比活达到212．7U／mg，经HPLC测定纯度为92．8％，收率为78％。理化性质分析表明：AfPGA含有2个亚基（α亚基和β亚基，其Mw分别为2．90×10^4和5．92×10^4；AfPGA等电点约为7．9～8．0，最适pH约为10．0，并在pH〉7．0时表现出了稳定的催化活力。; 关键词粪产碱杆菌青霉素G酰化酶阴离子交换层析疏水层析分离纯化; Keywords Alcaligenes faecalis penicillin G acylase anion-exchange chromatography hydrophobic chromatograph purification; 分类号 Q814.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化被引量：1: 2; 作者陶金倪孟祥; 机构中国药科大学生命科学与技术学院; 出处《化学与生物工程》 CAS 2016年第4期55-58,共4页; 文摘采用热激法将含粪产碱杆菌D-氨基酰化酶基因载体的质粒导入大肠杆菌,筛选重组子,对该工程菌产生的D-氨基酰化酶用Ni 2+柱进行分离纯化;通过单因素实验优化D-氨基酰化酶的发酵条件。结果表明,纯化后的D-氨基酰化酶比活力为456.71U·mg-1,纯化回收率为50%,纯化倍数为12.4倍;最佳发酵条件为:37℃通气培养至菌体浓度OD600值为0.6时,加入0.5mmol·L-1诱导剂IPTG诱导5h,在此条件下,D-氨基酰化酶酶活力为90.9U·mL-1。; 关键词 D-氨基酰化酶粪产碱杆菌分离纯化发酵条件优化; Keywords D-aminoacylase Alcaligenes faecalis isolation and purification fermentation condition optimization; 分类号 TQ920 [轻工技术与工程—发酵工程] Q55 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名粪产碱杆菌ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性被引量：5: 3; 作者赵卫松邱立红郭庆港鹿秀云李社增王培培张晓云马平; 机构河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心中国农业大学理学院; 出处《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期472-480,共9页; 文摘为明确粪产碱杆菌Alcaligenes faecalis ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性,采用丙酮沉淀、超声波破碎和高速离心等方法,提取制备了ZWS11菌株的胞外和胞内粗酶液以及菌体碎片悬浮液,并分别测定了其酶活力。结果表明：当V（菌体发酵液）：V（丙酮）=1：3时提取到的胞外粗酶液具有较高的酶活力;胞外粗酶液、胞内粗酶液和菌体碎片悬浮液对24.9μmol/L烟嘧磺隆的平均降解率分别为87.4%、16.9%和17.4%,胞外粗酶液的降解能力与胞内粗酶液或菌体碎片悬浮液相比差异显著（P〈0.05）,由此确定对烟嘧磺隆起降解作用的酶属于胞外酶。最适降解条件研究表明：该降解酶的酶促反应适宜温度为35℃,较适p H值为6.0,反应时间为30 min,在此条件下其对烟嘧磺隆的降解率在80%以上。此外,该降解酶在35~70℃、p H值4.0~9.0范围内均能够保持较高的酶活力,对烟嘧磺隆的降解率均在60%以上,表明该降解酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性。加入不同浓度十二烷基硫酸钠（SDS）和苯甲基磺酰氟（PMSF）,对该降解酶的活力表现出了不同程度的抑制作用。研究结果可为烟嘧磺隆降解酶制剂的规模化生产及被烟嘧磺隆污染土壤的生物修复提供科学依据。; 关键词粪产碱杆菌烟嘧磺隆丙酮沉淀胞外粗酶液降解酶酶促降解; Keywords Alcaligenes faecalis nicosulfuron acetone precipitation extracellular crude enzymes degrading enzyme enzymatic degradation; 分类号 X172 [环境科学与工程—环境科学] S482.4 [农业科学—农药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达: 4; 作者侯欣彤董媛林瑞东于梁任媛媛李剑光高朝辉滕利荣; 机构吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室艾滋病疫苗国家工程实验室生命科学学院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1670-1674,共5页; 基金高等学校博士学科点专项科研基金新教师项目(批准号:20100061120076) 中央高校基本科研业务费专项林业公益性行业科研专项经费项目(批准号:201204614)资助~~; 文摘将来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因用大肠杆菌中的丰沛密码子替换,利用化学和基于聚合酶链反应(PCR)技术的酶促方法进行基因全合成,利用pET-32a构建重组表达载体pET-dan,转化进E.coil BL21(DE3)中进行融合表达.经SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和活性测定发现,D-ANase可在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白可达到菌体总蛋白的69.2%,密码子优化后基因构建的工程菌发酵活性为96 U/mL,重组蛋白经超声细胞破碎及Ni2+柱亲和层析纯化,比活可达1692.3 U/mg,纯度可达95%以上.; 关键词 D-氨基酰化酶产碱杆菌基因合成融合表达; Keywords D-Aminoacylase Alcaligenes A-6 Gene synthesis Fusion expression; 分类号 O629.74 [理学—有机化学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名增强组成型重组大肠杆菌质粒稳定性的发酵策略被引量：1: 5; 作者苟斌全张嗣良储炬王永红庄英萍黄华李震袁中一; 机构华东理工大学生物反应器国家重点实验室; 出处《化学与生物工程》 CAS 2008年第10期23-26,共4页; 基金国家973基础研究项目(2007CB714300) 上海市重点学科建设项目(B505); 文摘质粒稳定性是影响基因工程菌外源蛋白表达的重要因素,同时,外源蛋白的表达又影响着质粒稳定性。与诱导型表达系统相比,在组成型表达系统中,由于外源蛋白的持续表达,导致细胞代谢负担加重,质粒稳定性的控制更加困难。通过对组成型大肠杆菌DH5α/pKKFPGA发酵过程的优化,增强了质粒稳定性,发酵结束时,仍然维持在85%左右,表达产物粪产碱杆菌青霉素酰化酶的酶活单位达到23 384 U.L-1。; 关键词质粒稳定性组成型表达系统粪产碱杆菌青霉素酰化酶补料批发酵; Keywords plasmid stability constitutive expression system Alcaligenes faecalis penicillin G amidase fed-batch fermentation; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学] TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离纯化及酶学性质	李震储炬庄英萍张嗣良袁中一	《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化	陶金倪孟祥	《化学与生物工程》 CAS	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	粪产碱杆菌ZWS11菌株对烟嘧磺隆的酶促降解特性	赵卫松邱立红郭庆港鹿秀云李社增王培培张晓云马平	《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	来源于Alcaligenes A-6的D-氨基酰化酶基因的合成与融合表达	侯欣彤董媛林瑞东于梁任媛媛李剑光高朝辉滕利荣	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	增强组成型重组大肠杆菌质粒稳定性的发酵策略	苟斌全张嗣良储炬王永红庄英萍黄华李震袁中一	《化学与生物工程》 CAS	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料