河北省奶牛牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定 被引量：21

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作者 赵月兰 杨汉春 +4 位作者 左玉柱 秦建华 刘占民 范京惠 张宁 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第11期29-32,共4页

从河北省某规模化奶牛场牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)疑似病例中采集病料,将处理好的病料接种MDBK细胞,盲传9代,得到了不产生细胞病变的病毒。琼脂扩散试验表明本病毒能与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)OregonC24标准阳性血清反应,出现沉淀线;... 从河北省某规模化奶牛场牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)疑似病例中采集病料,将处理好的病料接种MDBK细胞,盲传9代,得到了不产生细胞病变的病毒。琼脂扩散试验表明本病毒能与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)OregonC24标准阳性血清反应,出现沉淀线;细胞培养物用BVD/MD荧光抗体染色检测,可见到荧光着染的特异性细胞,荧光颗粒出现于胞浆中。双抗体夹心ELISA检测病毒抗原结果BVDVOregonC24VP/N为3.141,分离毒P/N为3.012,P/N>2,与BVDVOregonC24V结果一致;电镜观察到圆形、直径为40～60nm,有囊膜,囊膜表面有突起的病毒粒子,与BVDV颗粒基本一致。经RT-CR检测,扩增出了唯一的315bp的目的条带,进一步证实为牛病毒性腹泻/粘膜病病毒。 展开更多

关键词 奶牛 牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BvDV/MDV) ELISA RT—PCR 分离鉴定

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抗鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒特异性单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：3

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作者 杜锐 尹茉莉 +2 位作者 时坤 郑鑫 兰海楠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期641-643,共3页

为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂... 为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株2A3和4B12。通过间接ELISA检测,MAb效价为:上清液及腹水分别为1∶512、1∶640和1∶12800、1∶16000;MAb的亚类鉴定结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体亚类均为IgGl亚类;经ELISA测定,2A3和4B12与BVDVC24V株、HCV、BDV、PRV均不发生交叉反应,但与BVDVCCSYD株发生交叉反应;IFA试验结果显示,4B12和2A3与接种BVDVN71株病毒液的细胞反应产生较强的特异荧光;抗原识别位点分析结果表明,2A3和4B12两株MAb所识别的抗原位点相同。这两株MAb的获得为鹿BVDV的检测方法的建立奠定良好的基础。 展开更多

关键词 鹿 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 单克隆抗体 间接ELISA

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牛粘膜病病毒E1基因的克隆及原核表达 被引量：3

3

作者 何海娟 王君伟 +2 位作者 李昭春 杨玉菊 杨志 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第5期656-661,共6页

参考BVDVVEDEVAC株的基因组序列及E2基因的测序结果设计一对引物,扩增出预期585 bp的目的片段。扩增产物克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列VEDE-VAC株比较,二者的核苷酸同源性为100%,推... 参考BVDVVEDEVAC株的基因组序列及E2基因的测序结果设计一对引物,扩增出预期585 bp的目的片段。扩增产物克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列VEDE-VAC株比较,二者的核苷酸同源性为100%,推导氨基酸同源性为100%。测序结果经同源性比较,克隆得到的基因与VEDEVAC株同源性最高。系统发生树分析推测E1基因与VEDEVAC株在进化上比较接近。将E1基因定向亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中,对阳性重组质粒转化的大肠杆菌BL21进行诱导,E1基因获得了成功表达。 展开更多

关键词 牛粘膜病病毒 E1基因 克隆 序列分析 原核表达

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鹿粘膜病病毒的分离鉴定 被引量：2

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作者 杜锐 王全凯 +2 位作者 王树志 王新平 任东波 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期376-379,共4页

本研究首次应用MDBK传代细胞从腹泻幼鹿粪样中分离获得一株病毒(MDV N71)。该毒株可使培养细胞出现明显的空泡变性,电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的粘膜病病毒粒子。MDV N71在MDBK传代细胞上的TCID_(50)为10^(-5.4),对乙醚、氯仿... 本研究首次应用MDBK传代细胞从腹泻幼鹿粪样中分离获得一株病毒(MDV N71)。该毒株可使培养细胞出现明显的空泡变性,电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的粘膜病病毒粒子。MDV N71在MDBK传代细胞上的TCID_(50)为10^(-5.4),对乙醚、氯仿和胰蛋白酶敏感,56℃70min被灭活。对酸的耐受力较弱,在pH3.0环境下毒力明显降低。对碱有较强的耐受力,在pH9.0环境下依然稳定。不凝集绵羊、猪、兔和鸡红细胞。用MDV长春184毒株的特异性免疫荧光抗体染色(IFA),可以在感染细胞浆内见有特异性荧光。该毒株的致细胞病变作用,可被MDV长春184毒株抗血清所中和。提取病毒感染细胞的总RNA进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),结果扩增出的片段大小为400 bp。根据MDV N71的理化特性、形态学、生物学、免疫学和RT-PCR鉴定结果,确证MDV N71株为粘膜病病毒,这为深入探讨鹿MD的诊断和防制以及进行分子生物学研究奠定了基础。 展开更多

关键词 鹿 粘膜病病毒 分离鉴定

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狂犬病毒、伪狂犬病毒、马瘟病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒和传染性牛鼻气管炎病毒的保存期试验 被引量：1

5

作者 王乐元 江焕贤 兰玉珍 《中国兽药杂志》 2001年第4期31-33,共3页

进行了狂犬病毒 (巴黎株固定毒 )、伪狂犬病毒 (闽 A株 ,苏联株 )、马瘟病毒 (I,II,III,IV,V,VII型 )、牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒 (Oregon C2 4 V株 ,NADL株 )和传染性牛鼻气管炎病毒(NU/6 7株 )的保存期试验。试验结果证明 ,在 - 70℃... 进行了狂犬病毒 (巴黎株固定毒 )、伪狂犬病毒 (闽 A株 ,苏联株 )、马瘟病毒 (I,II,III,IV,V,VII型 )、牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒 (Oregon C2 4 V株 ,NADL株 )和传染性牛鼻气管炎病毒(NU/6 7株 )的保存期试验。试验结果证明 ,在 - 70℃以下温度保存 ,狂犬病毒巴黎株固定毒保存 1 0年以上 ,伪狂犬病毒闽 A株保存 1 1年以上 ,伪狂犬病毒苏联株保存保存 1 7年 ,马瘟病毒 I、II、III、IV、V和 VII型病毒保存 1 2年以上 ,牛病毒性腹泻 /粘膜病病毒 NADL株和 Oregon C2 4 V株保存1 6年以上 ,传染性牛鼻气管炎病毒 NU/6 7株保存 1 展开更多

关键词 狂犬病毒 伪狂犬病毒 马瘟病毒 牛病毒性腹泻粘膜病病毒 传染性牛鼻气管炎病毒 保存期 种毒

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从“猝死症”黄牛分离出粘膜病病毒 被引量：7

6

作者 韩慧民 常国权 王新平 《吉林畜牧兽医》 1996年第2期27-28,共2页

1994年以来我省黄牛发生“猝死症”较多,我们从病死牛肝脏,心脏分出了粘膜病毒,对所分离获得的病毒作荧光抗体染色和超薄切片电镜观察,证明所分到的病毒是粘膜病病毒。

关键词 黄牛 猝死症 粘膜病病毒

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牛病毒性腹泻——粘膜病病毒感染引起的小脑形成不全症 被引量：1

7

作者 颜彤 郑星道 +1 位作者 韩宗烈 张加利 《吉林畜牧兽医》 2016年第10期5-6,8,共3页

2005年11月、12月,黑龙江省牡丹江市兴隆镇一奶牛饲养户中的2例犊牛发生小脑形成不全症。这2例虽然是正常分娩,却呈现了运动失调及明显的小脑形成不全,吸吮初乳后所保持的病毒性腹泻-粘膜病（BVD-MD）病毒中和抗体滴度比母牛高。另外,... 2005年11月、12月,黑龙江省牡丹江市兴隆镇一奶牛饲养户中的2例犊牛发生小脑形成不全症。这2例虽然是正常分娩,却呈现了运动失调及明显的小脑形成不全,吸吮初乳后所保持的病毒性腹泻-粘膜病（BVD-MD）病毒中和抗体滴度比母牛高。另外,确认了与小脑形成不全犊牛同时分娩,而临床症状正常的1头犊牛的胎盘感染。综上所述,2例犊牛小脑形成不全症是病毒性腹泻-粘膜病病毒的胎盘感染所引起的。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻 粘膜病病毒 奶牛饲养户 临床症状 抗体滴度 胎盘感染 蓝舌病毒 黑白花牛 步样 吮乳

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牛病毒性腹泻-粘膜病病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：12

8

作者 陈其兵 薛霜 +5 位作者 漆世华 朱薇 张萍 谢红玲 温文生 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第4期4-6,47,共4页

为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的... 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT-PCR检测方法。通过对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的方法能检测到BVDV,而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性,具有高度的特异性。在所检测的20份样品中,BVDV阳性6份(30%)。对所构建的标准品进行检测,在102～108拷贝/μL的范围内可以得到良好的动力学曲线,能检测低至103～104拷贝/mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点,可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 荧光定量RT-PCR 检测

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从进口绵羊血清中分离出牛病毒性腹泻——粘膜病病毒

9

作者 张焱 苏世敏 刘继红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1991年第5期53-54,共2页

1989年9月27日从北京口岸进口22头新西兰种公绵羊,根据《中华人民共和国从新西兰输入羊的检疫和卫生条件》实施检疫,检出牛病毒性腹泻——粘膜病(BVD-

关键词 绵羊 血清 粘膜病病毒 病毒性腹泻

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疑似牛病毒性腹泻──粘膜病病毒细胞培养及其抗体对猪瘟牛睾丸细胞苗生产影响的观察

10

作者 陆小虹 《湖南畜牧兽医》 1996年第5期11-12,共2页

1993年猪瘟牛睾丸细胞苗生产过程中出现细胞病变、毒价不高．猪瘟、牛病毒性腹泻─粘膜病病毒、猪细小病毒（HCV、BVD／MDV、PPV）三价荧光抗体及其他中间监测结果观察．初步认为，长沙市部分乳牛场已铁牛病毒性腹泻─粘膜病病毒感染．

关键词 牛病 病毒性腹泻 粘膜病病毒 猪瘟疫苗 细胞培养

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牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展 被引量：57

11

作者 孔繁德 陆承平 《福建畜牧兽医》 2005年第3期9-13,共5页

关键词 研究进展 牛病毒性腹泻病 接触性传染病 粘膜病病毒 临床类型 持续感染 免疫耐受 免疫抑制 怀孕母牛 主要特征 BVD 白细胞 先天性 溃疡 咳嗽 流产 畸形 死胎

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猪白细胞干扰素在细胞培养物中干扰牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)病毒的试验 被引量：1

12

作者 王乐元 江焕贤 兰玉珍 《中国兽药杂志》 2001年第2期30-32,共3页

对猪白细胞干扰素在细胞培养物中干扰牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒的作用进行了试验。猪白细胞干扰素在 50 0 u/ml以上浓度可完全抑制牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒所产生的细胞病变 ,在 2 50 u/ml浓度可部分抑制病毒所产生... 对猪白细胞干扰素在细胞培养物中干扰牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒的作用进行了试验。猪白细胞干扰素在 50 0 u/ml以上浓度可完全抑制牛病毒性腹泻 /粘膜病 (BVD/MD)病毒所产生的细胞病变 ,在 2 50 u/ml浓度可部分抑制病毒所产生的细胞病变 ,在 2 50 u/ml以下浓度不能抑制病毒所产生的细胞病变 ,但可使细胞产生细胞病变的时间延长 ,病变程度减轻。本试验证实干扰素在猪和牛之间存在交叉活性。 展开更多

关键词 猪白细胞干扰素 牛病毒性腹泻/粘膜病病毒 干扰试验 交叉活性

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牛病毒性腹泻病毒山东株的分离与鉴定 被引量：5

13

作者 侯佩莉 杨宏军 +3 位作者 宋玲玲 王洪梅 刘来兴 何洪彬 《山东农业科学》 2013年第2期41-44,共4页

牛病毒性腹泻病毒是牛病毒性腹泻-黏膜病的重要病原体,该病毒病是极为复杂、呈多临床类型表现的传染病,给世界养牛业造成了巨大的经济损失。本研究从疑似牛病毒性腹泻-黏膜病的粪便中分离得到一株病毒能使MDBK细胞产生细胞病变,经RT-PC... 牛病毒性腹泻病毒是牛病毒性腹泻-黏膜病的重要病原体,该病毒病是极为复杂、呈多临床类型表现的传染病,给世界养牛业造成了巨大的经济损失。本研究从疑似牛病毒性腹泻-黏膜病的粪便中分离得到一株病毒能使MDBK细胞产生细胞病变,经RT-PCR检测及扩增产物测序进一步证实,该病毒为牛病毒性腹泻-黏膜病病毒,TCID50测定该病毒的滴度为107.15TCID50/ml。该病毒株的分离鉴定为牛病毒性腹泻病毒疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 分离 鉴定

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牛病毒性腹泻的诊断与预防 被引量：1

14

作者 杨学军 唐士钢 邢振国 《畜牧兽医科技信息》 2009年第6期54-54,共1页

牛病毒性腹泻又称粘膜病，是由牛腹泻一粘膜病病毒引起的，各种年龄的牛都可感染，3—18日龄的幼牛多发。病畜的眼、鼻及唾液、粪便、尿等排泄物以及精液、血液均可含毒，可水平传播，也可垂直传播。

关键词 牛病毒性腹泻 粘膜病病毒 预防 诊断 水平传播 垂直传播 牛腹泻 排泄物

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牛胚胎体外生产中的病毒剔除

15

作者 王勇强 《中国奶牛》 1993年第6期34-34,共1页

牛感染牛粘膜病(BVD)病毒,会导致严重的繁殖障碍,长期感染牛是该病毒的主要传染源。因此,在胚胎移植时剔除体外胚胎生产中的外源性牛粘膜病毒,对于防止该病毒从感染牛的传播,是非常重要的。如果把牛粘膜病病毒阳性胚胎移植给健康牛,其... 牛感染牛粘膜病(BVD)病毒,会导致严重的繁殖障碍,长期感染牛是该病毒的主要传染源。因此,在胚胎移植时剔除体外胚胎生产中的外源性牛粘膜病毒,对于防止该病毒从感染牛的传播,是非常重要的。如果把牛粘膜病病毒阳性胚胎移植给健康牛,其专一血清反应阴性受体牛将转为阳性,从而导致胚胎早死、吸收或出生带毒个体(Houe和Meyling,1991)。 展开更多

关键词 粘膜病病毒 体外生产 胚胎生产 受体牛 胚胎培养 血清反应 繁殖障碍 胚胎移植 卵母细胞成熟 合胞体病毒

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基于重组E^(rns)蛋白的牛病毒性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立 被引量：4

16

作者 肖盛中 马振国 +4 位作者 李岩 马旭升 李爽 杨若松 盛金良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期267-272,共6页

为建立中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体间接ELISA方法,本研究对新疆地区多个发病牛场临床发病牛肛拭子提取总RNA,RT-PCR扩增BVDV-E^(rns)基因截短片段(681 bp),将该片段克隆于表达载体中,经大肠杆菌表达并纯化后作为ELISA包被抗原,建立了... 为建立中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体间接ELISA方法,本研究对新疆地区多个发病牛场临床发病牛肛拭子提取总RNA,RT-PCR扩增BVDV-E^(rns)基因截短片段(681 bp),将该片段克隆于表达载体中,经大肠杆菌表达并纯化后作为ELISA包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。特异性试验显示该方法与牛其它常见5种病原阳性血清均无交叉反应。敏感性试验显示在阳性血清1∶1 600倍稀释时仍能够检出。重复性试验显示批内、批间变异系数均小于10%。与爱德士(IDEXX)商品化试剂盒相比较,总符合率较高。应用该方法对新疆地区2个散户牛场和3个规模化牛场的564份牛血清样品进行了检测,结果显示BVDV抗体阳性率分别为11.76%、13.04%、82.76%、77.96%、75.82%,表明BVDV感染在新疆部分地区已呈高发态势。该方法的建立对新疆地区BVDV的血清流行病学调查和养牛业的健康发展具有重要意义。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻粘膜病毒 Erns蛋白 间接ELISA

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BVD-MDV细胞毒的快速粗提 被引量：8

17

作者 沈敏 王新华 +1 位作者 周鹏飞 钟发刚 《中国畜禽传染病》 CSCD 1997年第4期58-59,共2页

采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒。经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩前毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高。将其作为检测抗原及免疫抗原，应用到ＢＶ... 采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒。经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩前毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高。将其作为检测抗原及免疫抗原，应用到ＢＶＤ－ＭＤＶ单克隆抗体的研制中，效果均较理想。试验证明，该方法具有简便、省时、费用低，实用等优点。 展开更多

关键词 病毒性腹泻 粘膜病病毒 细胞毒 聚乙二醇 提取

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猪瘟的流行特点及防控措施 被引量：1

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作者 陈洪军 《中国畜禽种业》 2015年第6期104-105,共2页

猪瘟又称猪霍乱,它是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性和致死性传染病,在临床上表现为死亡率高的急性型、或者死亡率变化不定的亚急性型、慢性型以及隐性型。在我国将猪瘟列为一类传染病,在养猪生产中,如果防疫程序不科学或不到位,将会... 猪瘟又称猪霍乱,它是由猪瘟病毒引起的一种高度传染性和致死性传染病,在临床上表现为死亡率高的急性型、或者死亡率变化不定的亚急性型、慢性型以及隐性型。在我国将猪瘟列为一类传染病,在养猪生产中,如果防疫程序不科学或不到位,将会带来巨大的经济损失,所以广大养猪业者要引起高度警惕,要进行认真科学的免疫防控。1病原特点猪瘟病毒属于黄病毒科,瘟病毒属。与牛粘膜病病毒、绵羊边界病病毒有共同抗原。 展开更多

关键词 粘膜病病毒 瘟病毒属 隐性型 高度传染性 亚急性型 共同抗原 防疫程序 黄病毒科 血清型 繁殖障碍

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