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类枯草杆菌蛋白酶基因GmSBT1在大豆共生固氮中的功能
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作者 雷思杰 黄诗宸 +1 位作者 李友国 林会 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期133-139,共7页
为研究SBT(subtilases)家族蛋白在豆科植物共生固氮中的作用机制,分别利用生物信息学分析、时空表达定位、GUS染色定位和基因沉默等方法来研究GmSBT1在大豆-根瘤菌共生中的作用。结果显示:GmSBT1受根瘤菌特异性诱导,在成熟根瘤中高量表... 为研究SBT(subtilases)家族蛋白在豆科植物共生固氮中的作用机制,分别利用生物信息学分析、时空表达定位、GUS染色定位和基因沉默等方法来研究GmSBT1在大豆-根瘤菌共生中的作用。结果显示:GmSBT1受根瘤菌特异性诱导,在成熟根瘤中高量表达,且在根瘤皮层以及含菌细胞中发挥功能。GmSBT1-RNAi植株地上鲜质量、瘤质量、固氮酶活显著降低。结果表明,GmSBT1蛋白对根瘤的形成和发育以及根瘤的固氮具有重要的作用。 展开更多
关键词 蛋白酶 类枯草杆菌蛋白酶 根瘤菌 共生固氮 大豆
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类枯草杆菌蛋白酶的生物学功能及其在农牧业疾病控制中的应用 被引量:2
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作者 廖素环 张民秀 +2 位作者 施李鸣 黄伟坚 韦英益 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第23期13897-13899,共3页
综述国内外研究类枯草杆菌蛋白酶基因在生物生长过程中参与表型的稳定性、致病性和自噬等重要生理功能及其在农牧业疾病控制中的应用前景。
关键词 类枯草杆菌蛋白酶 表型的稳定性 毒力因子 自噬 疾病控制
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刚地弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的研究进展 被引量:1
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作者 郑斌 尹志奎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期93-97,共5页
刚地弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶是虫体粘附、入侵宿主细胞过程中的一种重要蛋白酶。研究发现弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶的催化区域高度保守;蛋白酶有多个作用底物,并与虫体的运动及毒力相关。本文对已发现的弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的结构... 刚地弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶是虫体粘附、入侵宿主细胞过程中的一种重要蛋白酶。研究发现弓形虫的类枯草杆菌蛋白酶的催化区域高度保守;蛋白酶有多个作用底物,并与虫体的运动及毒力相关。本文对已发现的弓形虫类枯草杆菌蛋白酶的结构及性能作一综述。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 类枯草杆菌蛋白酶 蛋白结构 蛋白酶解加工
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蝉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆及其序列和蛋白质分析
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作者 陈官菊 柴一秋 +3 位作者 厉晓腊 方鸣 刘又高 金轶伟 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期1663-1670,共8页
蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治。本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR... 蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治。本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,从蝉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶(subtilisin-likeprotease)cDNA基因序列。cDNA全序列为2031bp,该序列5′-端和3′-端的非编码序列长度分别为170bp和262bp,开放阅读框为1599bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为18个氨基酸,前肽长度为133个氨基酸。该基因编码的蛋白序列与虫草棒束孢(Isariafarinosa)、球孢白僵菌(Beauveriabassiana)、蛹虫草(Cordycepsmilitaris)和哈茨木霉(Trichodermaharzianum)类枯草杆菌蛋白酶有较高的同源性,同源性分别为88%、88%、89%和71%。成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,4个潜在的N-糖基化位点,位于细胞的液泡中与分泌途径相关,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主。 展开更多
关键词 虫生真菌 蝉拟青霉 类枯草杆菌蛋白酶基因 克隆
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杀虫球孢白僵菌菌株筛选及类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆 被引量:2
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作者 贺小红 曾智 +4 位作者 付祖姣 丁学知 胡胜标 孙运军 夏立秋 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期100-103,共4页
在水稻叶蝉僵虫中分离出一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),根据GenBank上球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因序列同源性设计引物,采用RT-PCR法得到一个球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因的cD-NA片段.利用表达载体pET28 a(+),在大肠... 在水稻叶蝉僵虫中分离出一株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),根据GenBank上球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因序列同源性设计引物,采用RT-PCR法得到一个球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因的cD-NA片段.利用表达载体pET28 a(+),在大肠杆菌中表达了CDEP2蛋白. 展开更多
关键词 RT-PCR 球孢白僵菌 类枯草杆菌蛋白酶
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球孢白僵菌不同世代菌株胞外蛋白酶与毒力的关系 被引量:25
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作者 彭国雄 张永军 +2 位作者 杨星勇 王中康 裴炎 《中国生物防治》 CSCD 2000年第2期61-64,共4页
以蝉蜕、蝇蛆壳两种培养基培养球孢白僵菌不同世代菌株 ,分析其类枯草杆菌蛋白酶(Pr1)和总胞外蛋白酶的产生水平及其与菌株毒力的相关性。结果表明 ,菌株的 Pr1产生水平达到最高的时间较总胞外蛋白酶早 1~ 2天。在蝉蜕培养基中 ,菌株 ... 以蝉蜕、蝇蛆壳两种培养基培养球孢白僵菌不同世代菌株 ,分析其类枯草杆菌蛋白酶(Pr1)和总胞外蛋白酶的产生水平及其与菌株毒力的相关性。结果表明 ,菌株的 Pr1产生水平达到最高的时间较总胞外蛋白酶早 1~ 2天。在蝉蜕培养基中 ,菌株 Pr1产生水平较高 ,而总胞外蛋白酶产生水平大大低于蝇蛆壳培养基中的产生水平。随着世代数的增加 ,Pr1和总胞外蛋白酶产生水平及对家蚕的毒力都明显下降。不同世代菌株在蝉蜕和蝇蛆壳培养基上的 Pr1产生水平与其毒力的相关系数分别为 0 .92和 0 .89,高于总胞外蛋白酶与其毒力的相关系数(0 .84和 0 .6 7)。因此认为在总胞外蛋白酶中 ,Pr1是影响菌株主要毒力因子之一 。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 类枯草杆菌蛋白酶 胞外蛋白酶 毒力
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未行调脂治疗的冠心病患者血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9水平与促甲状腺激素的相关性分析 被引量:3
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作者 王梅 李艳芳 +3 位作者 郭彦青 陈萌萌 蒋志丽 宋俊迎 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2017年第11期1153-1156,共4页
目的探讨未行调脂治疗的冠心病患者血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与血脂各指标,甲状腺功能等影响因素的相关性。方法选择2013年7月~2014年3月在首都医科大学附属北京安贞医院就诊的未行调脂治疗的胸痛患者160例,入院后根据冠状动... 目的探讨未行调脂治疗的冠心病患者血浆前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与血脂各指标,甲状腺功能等影响因素的相关性。方法选择2013年7月~2014年3月在首都医科大学附属北京安贞医院就诊的未行调脂治疗的胸痛患者160例,入院后根据冠状动脉造影结果分为冠心病组102例和对照组58例。收集临床资料,采集空腹静脉血,检测血常规、血生化、甲状腺功能等各项指标。结果冠心病组糖尿病、吸烟、空腹血糖、糖化血红蛋白、LDL-C明显高于对照组,HDL-C明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。冠心病组促甲状腺激素(TSH)及PCSK9明显高于对照组[(2.26±1.49)mU/L vs(1.88±0.98)mU/L,P=0.038;(0.29±0.28)mg/L vs(0.15±0.22)mg/L,P=0.027]。logistic回归分析显示,年龄、吸烟、糖尿病、TSH、LDL-C、HDL-C、脂蛋白(a)、PCSK9是冠心病患者的危险因素(P<0.05)。冠心病患者血浆PCSK9与LDL-C、载脂蛋白B、TSH呈正相关(r=0.524,P=0.004;r=0.412,P=0.021;r=0.571,P=0.021)。结论 TSH和PCSK9共同参与了动脉粥样硬化的形成和发展。PCSK9与TSH存在相关性,两者共同影响了冠心病的发生、发展。 展开更多
关键词 冠心病 促甲状腺素 血脂异常 动脉粥样硬化 蛋白转化酶 枯草杆菌蛋白酶
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球孢白僵菌CDEP2基因原核表达、蛋白纯化及多克隆抗血清制备 被引量:1
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作者 曾智 王梅 +1 位作者 肖虎松 钟日超 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期131-133,137,共4页
类枯草杆菌蛋白酶是昆虫致病真菌重要的毒力因子,利用合成的特异性引物通过RT-PCR扩增了球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因。将其与质粒pET28a连接,构建重组原核表达载体pET28-CDEP2,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。SD... 类枯草杆菌蛋白酶是昆虫致病真菌重要的毒力因子,利用合成的特异性引物通过RT-PCR扩增了球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因。将其与质粒pET28a连接,构建重组原核表达载体pET28-CDEP2,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE检测His-CDEP2融合蛋白以包涵体方式大量表达并对其进行纯化。用SDS-PAGE分离纯化的CDEP2蛋白免疫家兔,制备了多克隆抗血清。Western blotting免疫印迹检测分析表明,该抗血清对CDEP2蛋白有特异性识别能力,可用于对CDEP2蛋白功能的进一步研究。 展开更多
关键词 类枯草杆菌蛋白酶 原核表达 融合蛋白 多克隆抗血清
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蛹虫草CmKexin基因克隆和菌丝体中表达检测 被引量:1
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作者 毛玉梅 李琴 +3 位作者 付鸣佳 金华燕 沈俊良 钟雪晴 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期112-118,共7页
为了探讨蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin-like protease)的表达特性,以真菌蛹虫草菌丝体为研究对象,通过RT-PCR获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列,并进行序列分析。应用Northern杂交和Real-time PCR方法,检测蓝光照射后蛹虫草菌丝体... 为了探讨蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin-like protease)的表达特性,以真菌蛹虫草菌丝体为研究对象,通过RT-PCR获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列,并进行序列分析。应用Northern杂交和Real-time PCR方法,检测蓝光照射后蛹虫草菌丝体中CmKexin基因的转录情况。结果获得蛹虫草CmKexin基因的ORF序列。对翻译蛋白质产物CmKexin进行生物信息学分析,表明该蛋白质含1个属蛋白转化酶的肽酶S8家族功能域(143~429)和1个前体蛋白转化酶P功能域(514~600),符合真菌类枯草杆菌蛋白酶的特征。蛹虫草菌丝体在黑暗预培养4 d后再蓝光照射,Northern Blotting和Real-time PCR检测均可得到相同的结果,即在持续的蓝光照射48~50 h时,出现CmKexin基因的瞬时大量转录。而其他时间内均未检测到该基因的大量转录。试验结果将为蛹虫草类枯草杆菌蛋白酶的利用提供理论依据。 展开更多
关键词 蛹虫草 CmKexin基因 类枯草杆菌蛋白酶 NORTHERN杂交 实时荧光定量PCR
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