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ES细胞体外定向分化为睾丸间质样细胞模型的建立
被引量：
2
1
作者
张莹莹
黄亚东
+1 位作者
葛仁山
朱丹雁
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期386-392,共7页
目的:建立小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞体外分化为睾丸间质样细胞(leydig-like cells)的模型。方法:采用脂质体转染方法将含类固醇生成因子1(steroidogenic factor 1,SF-1)基因片断的质粒转入小鼠ES-D3细胞,并在RA和8Br-cAMP作用...
目的:建立小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞体外分化为睾丸间质样细胞(leydig-like cells)的模型。方法:采用脂质体转染方法将含类固醇生成因子1(steroidogenic factor 1,SF-1)基因片断的质粒转入小鼠ES-D3细胞,并在RA和8Br-cAMP作用下,体外诱导ES-D3细胞分化为睾丸间质样细胞,以空质粒转染组做阴性对照;通过光镜观察转染SF-1的ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞过程中的形态变化;用RT-PCR及Western Blot法检测分化过程中类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR),胆固醇侧链裂解酶P450scc(CYP11A1)和3β-羟甾脱氢酶1(3β-HSD1)表达情况;免疫荧光法检测睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc及3β-HSD1表达。结果:ES-D3细胞转染SF-1质粒24 h,即检测到SF-1基因表达。转染成功的ES-D3细胞在RA和8Br-cAMP诱导分化48 h后出现睾丸间质样细胞。分化而来的睾丸间质样细胞胞体大而圆润,长有触角,呈纺锤形;且表达睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc和3β-HSD1,同时StAR表达显著增加,而对照组细胞未表达睾丸间质样细胞特异性标志物StAR、P450scc和3β-HSD1。结论:通过对ES-D3细胞转染SF-1质粒并予以RA和8Br-cAMP诱导,成功建立ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞模型。
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关键词
胚胎干细胞
类固醇生成因子1
睾丸/细胞学
间质细胞
SF-
1
睾丸间质样细胞
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职称材料
题名
ES细胞体外定向分化为睾丸间质样细胞模型的建立
被引量：
2
1
作者
张莹莹
黄亚东
葛仁山
朱丹雁
机构
浙江大学药学院药理毒理与生化药学研究所
暨南大学生命科学技术学院
美国洛克菲勒大学
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期386-392,共7页
基金
国家自然科学基金课题(30873068)
浙江省科技创新团队项目(2010R50047)
+1 种基金
浙江省中医药科技计划项目(2009CA052)
浙江省教育厅科研项目(Y201018522)
文摘
目的:建立小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞体外分化为睾丸间质样细胞(leydig-like cells)的模型。方法:采用脂质体转染方法将含类固醇生成因子1(steroidogenic factor 1,SF-1)基因片断的质粒转入小鼠ES-D3细胞,并在RA和8Br-cAMP作用下,体外诱导ES-D3细胞分化为睾丸间质样细胞,以空质粒转染组做阴性对照;通过光镜观察转染SF-1的ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞过程中的形态变化;用RT-PCR及Western Blot法检测分化过程中类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR),胆固醇侧链裂解酶P450scc(CYP11A1)和3β-羟甾脱氢酶1(3β-HSD1)表达情况;免疫荧光法检测睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc及3β-HSD1表达。结果:ES-D3细胞转染SF-1质粒24 h,即检测到SF-1基因表达。转染成功的ES-D3细胞在RA和8Br-cAMP诱导分化48 h后出现睾丸间质样细胞。分化而来的睾丸间质样细胞胞体大而圆润,长有触角,呈纺锤形;且表达睾丸间质样细胞特异性蛋白P450scc和3β-HSD1,同时StAR表达显著增加,而对照组细胞未表达睾丸间质样细胞特异性标志物StAR、P450scc和3β-HSD1。结论:通过对ES-D3细胞转染SF-1质粒并予以RA和8Br-cAMP诱导,成功建立ES-D3细胞定向分化为睾丸间质样细胞模型。
关键词
胚胎干细胞
类固醇生成因子1
睾丸/细胞学
间质细胞
SF-
1
睾丸间质样细胞
Keywords
Embryonic stem cells
Steroidogenic factor
1
Testis/cytol
Stromal cells
SF-
1
Leydig-like cells
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
ES细胞体外定向分化为睾丸间质样细胞模型的建立
张莹莹
黄亚东
葛仁山
朱丹雁
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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