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糖基化终产物对脉络膜微血管内皮细胞增生和管腔形成的影响(英文) 被引量:3
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作者 王雨生 Ulrike Friedrichs +2 位作者 Wolfram Eichler Stephan Hoffmann Peter Wiedemann 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期209-216,共8页
目的:研究糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)在年龄相关性黄斑变性发生中的作用。方法:使用lycopersiconesculentum agglutinin包被磁珠的改良方法分离牛脉络膜微血管内皮细胞(bovine choroidalendothelialcells, CEC)... 目的:研究糖基化终产物(advanced glycationendproducts, AGEs)在年龄相关性黄斑变性发生中的作用。方法:使用lycopersiconesculentum agglutinin包被磁珠的改良方法分离牛脉络膜微血管内皮细胞(bovine choroidalendothelialcells, CEC),采用抗VIII因子免疫细胞化学法和摄取低密度脂蛋白(dil-acetylated low-density lipoprotein,dil-ac-LDL)法进行细胞鉴定。将50g/L牛血清白蛋白和150g/L葡萄糖在37℃孵育6wk 以制备AGEs,通过抗-AGEs 抗体点杂交法定性分析。用MTT 法(3,(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl te-trazolium bromide assay)测定CEC 增生,用Vit-rogen凝胶系统观察管腔形成情况。结果:培养细胞中90%以上呈因子阳性,并具有摄取dil-ac-LDL的能力,表明具有内皮细胞的特征。制备的AGEs 与抗-AGEs 抗体具有亲和力。浓度在62.5~500mg/L范围内的AGEs 处理CEC 3d 后,细胞增生呈剂量依赖性增加。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor, bFGF)可明显增强CEC 中管腔样结构的形成(P <0.05),但500mg/L和50mg/L的AGEs 对CEC 管腔形成无明显影响(P >0.05)。结论:AGEs 可以促进CEC 的增生,但对其管腔形成无影响。提示AGEs 通过增强CEC 增生,可能是渗出型AMD 发病中潜在的启动因子之一? 展开更多
关键词 糖基化终产物 管腔形成 血管内皮细胞增生 碱性成纤维细胞生长因子 脉络膜微血管内皮细胞 年龄相关性黄斑变性 免疫细胞化学法 AGEs 低密度脂蛋白 VIII因子 牛血清白蛋白 factor EC增生 cells 剂量依赖性 CEC 改良方法
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缺氧条件下骨髓间充质干细胞对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响 被引量:3
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作者 王雅芬 苏静波 +2 位作者 王雨生 惠延年 郭长梅 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期16-20,共5页
目的:探讨缺氧条件下骨髓间充质干细胞(BMSCs)对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响。方法:制备3种细胞的条件培养基(CM),分别为对照组(血管内皮细胞培养基,VCM)、常氧条件下BMSCs的CM组(NCM)和缺氧条件下BMSCs的CM组(HCM)。分别用以上3... 目的:探讨缺氧条件下骨髓间充质干细胞(BMSCs)对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响。方法:制备3种细胞的条件培养基(CM),分别为对照组(血管内皮细胞培养基,VCM)、常氧条件下BMSCs的CM组(NCM)和缺氧条件下BMSCs的CM组(HCM)。分别用以上3种CM培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)和猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)6~24h后,观察血管内皮细胞迁移和管腔形成的能力。结果:相对于对照组和常氧组的CM,缺氧组即HCM作用下的血管内皮细胞的迁移数目和成管数量(包括成管总长度和分支数)均显著增加(均P<0.05)。在RF/6A细胞,对照组VCM、常氧组NCM和缺氧组HCM作用24h后,迁移的细胞数分别为19.00±3.61、32.33±3.06、114.00±11.53个(F=153.3,P<0.001);而HUVECs的3组细胞迁移个数则分别是76.00±9.54、122.00±18.68、307.70±25.97个(F=121.5,P<0.001)。RF/6A细胞经各组CM孵育6h后,成管数目分别为12.00±3.00、37.00±4.58、51.00±3.61个(F=81.7,P<0.0001);3组HUVECs细胞管腔形成的结果类似。结论:缺氧条件下BMSCs可促进血管内皮细胞的迁移和成管能力,这种机制可能在视网膜新生血管中发挥作用。 展开更多
关键词 缺氧 骨髓间充质干细胞 血管内皮细胞 迁移 管腔形成 视网膜新生血管
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血清外泌体对高糖作用后HUVECs细胞增殖、迁移及管腔形成能力的影响 被引量:3
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作者 刘慧竹 黄群 +5 位作者 闫美玉 吉懿 许小朋 刘奇良 王明亮 谢赟 《山东医药》 CAS 2020年第11期25-28,共4页
目的观察正常大鼠血清外泌体对高糖作用后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移及管腔形成能力的影响。方法从正常SD大鼠血清中提取外泌体,并经电子显微镜及Western blotting法证实。将HUVECs分为外泌体组、高糖组和对照组,外泌体组、高... 目的观察正常大鼠血清外泌体对高糖作用后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移及管腔形成能力的影响。方法从正常SD大鼠血清中提取外泌体,并经电子显微镜及Western blotting法证实。将HUVECs分为外泌体组、高糖组和对照组,外泌体组、高糖组加入40 mmol/L葡萄糖,对照组加入7 mmol/L葡萄糖;同时外泌体组分别加入10、40、160μg/mL大鼠血清外泌体,高糖组和对照组不加入外泌体。各组分别于培养0、12、24、36 h,采用CCK-8法检测细胞增殖的光密度(OD)值;培养24 h,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率;培养8 h,采用管腔形成实验测量成管长度和成管分支点数。结果与对照组比较,高糖组作用12、24、36 h的OD值及细胞迁移率、成管长度、成管分支点数均降低(P均<0.05)。与高糖组比较,加入10μg/mL外泌体的外泌体组作用12、24、36 h的OD值及细胞迁移率、成管长度、成管分支点数均无明显变化(P均>0.05),加入40、160μg/mL外泌体的外泌体组上述指标均升高,且加入160μg/mL外泌体的外泌体组升高更明显(P均<0.05)。结论高糖会引起HUVECs细胞增殖、迁移及管腔形成能力下降,高浓度的正常大鼠血清外泌体可逆转上述变化,对HUVECs具有保护作用。 展开更多
关键词 血清外泌体 人脐静脉内皮细胞 高糖 细胞增殖 管腔形成
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ALPL依赖外泌体途径调控BMMSCs诱导内皮细胞管腔形成
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作者 董加一 赵疆东 +2 位作者 赵万民 刘文佳 李德华 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期462-467,共6页
目的:探究ALPL基因在骨髓间充质干细胞(BMMSCs)诱导血管内皮细胞(ECs)管腔形成的作用方式。方法:首先对正常人BMMSCs(Nor-hBMMSCs)、低碱性磷酸酯酶症(HPP)患者BMMSCs(HPP-hBMMSCs)进行多向分化鉴定。其次以Nor-hBMMSCs为对照组,HPP-hBM... 目的:探究ALPL基因在骨髓间充质干细胞(BMMSCs)诱导血管内皮细胞(ECs)管腔形成的作用方式。方法:首先对正常人BMMSCs(Nor-hBMMSCs)、低碱性磷酸酯酶症(HPP)患者BMMSCs(HPP-hBMMSCs)进行多向分化鉴定。其次以Nor-hBMMSCs为对照组,HPP-hBMMSCs及通过慢病毒浸染法过表达ALPL基因的HPP-hBMMSCs(HPP-hBMMSCs+Plenti-ALPL)为实验组,通过管腔形成实验检测各组ECs成管腔能力。随后对HPP-hBMMSCs+Plenti-ALPL给予GW4869,比较其与HPP-hBMMSCs组对ECs管腔的形成能力的影响。最后收集Nor-hBMMSCs、HPP-hBMMSCs、HPP-hBMMSCs+Plenti-ALPL来源的外泌体,验证3组细胞释放的外泌体对ECs成管腔能力的影响。结果:ALPL基因突变导致hBMMSCs诱导ECs管腔形成能力明显降低,在HPP-hBMMSCs过表达ALPL可恢复诱导ECs成管腔能力,并证明这一过程通过外泌体途径实现。结论:ALPL基因调控骨髓间充质干细胞诱导血管内皮细胞管腔形成依赖外泌体途径。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 碱性磷酸酶 管腔形成
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糖尿病氧化应激环境中α-Klotho对巨噬细胞-血管内皮细胞串扰的影响
5
作者 李青博 王佩玉 +2 位作者 胡立影 李筱荣 邵彦 《国际眼科杂志》 CAS 2024年第7期1020-1026,共7页
目的:探讨糖尿病氧化应激环境中过表达α-Klotho(KL)的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增生、迁移、管腔形成以及紧密连接的影响。方法:将RAW264.7细胞分为对照组、4-羟壬二酸酯(4HNE)组、4HNE+KL组,... 目的:探讨糖尿病氧化应激环境中过表达α-Klotho(KL)的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增生、迁移、管腔形成以及紧密连接的影响。方法:将RAW264.7细胞分为对照组、4-羟壬二酸酯(4HNE)组、4HNE+KL组,采用免疫荧光实验检测RAW264.7细胞F4/80的表达。制备3组细胞的条件培养基用于培养HUVECs,分为M-NC组、M-4HNE组和M-4HNE+KL组。采用CCK8实验检测血管内皮细胞增生,采用划痕实验和Transwell实验检测迁移,采用管腔形成实验检测管腔形成,采用Western blot实验检测闭合蛋白5(Claudin 5)、咬合蛋白(Occludin)、带状闭合蛋白1(ZO 1)表达水平。结果:免疫荧光实验结果显示,4HNE组RAW264.7细胞F4/80荧光强度较对照组明显增强,而4HNE+KL组F4/80荧光强度较4HNE组明显减弱(均P<0.05)。CCK8实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs增生显著增加,而M-4HNE+KL组HUVECs增生较M-4HNE组显著下降(均P<0.01)。划痕实验和Transwell实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs迁移显著增强,而M-4HNE+KL组HUVECs迁移较M-4HNE组显著减弱(均P<0.01)。管腔形成实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs管腔数显著增加,而M-4HNE+KL组管腔数较M-4HNE组显著下降(均P<0.01)。Western blot实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs中Claudin 5、Occludin、ZO 1蛋白的相对表达量明显减少,而M-4HNE+KL组Claudin 5、Occludin、ZO 1蛋白的相对表达量较M-4HNE组明显增加(均P<0.01)。结论:KL通过改变糖尿病氧化应激环境中巨噬细胞激活状态抑制了HUVECs的增生、迁移、管腔形成,并增强了HUVECs的紧密连接。 展开更多
关键词 氧化应激 巨噬细胞 血管内皮细胞 增生 迁移 管腔形成 紧密连接 视网膜新生血管
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中药复方血栓通可抑制血管生成 被引量:3
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作者 罗旭昇 吴星伟 +3 位作者 顾青 张红梅 施宇华 仇亚婷 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第8期1476-1480,共5页
目的:探讨复方血栓通对血管生成的作用。方法:鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)法检测复方血栓通对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的复方血栓通对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)... 目的:探讨复方血栓通对血管生成的作用。方法:鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)法检测复方血栓通对血管生成的影响;采用MTS比色法观察不同浓度的复方血栓通对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)诱导的ECV-304细胞增殖的影响;Transwell小室检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞移行的影响;Matrigel实验检测不同浓度的复方血栓通对ECV-304细胞内皮管腔形成的影响。结果:复方血栓通中、低浓度组能够抑制鸡胚CAM血管生成;MTS比色法显示,1.5625~100g/L复方血栓通对VEGF诱导的ECV-304细胞增殖具有抑制作用,而更低和更高浓度的复方血栓通则无抑制作用;Transwell小室实验显示,复方血栓通为0,3.125,6.25和12.5g/L时ECV-304细胞移行数分别为219±17,183±14,135±13和19±9;Matrigel实验显示,复方血栓通为0,0.390625,0.78125和1.5625g/L时ECV-304细胞内皮管腔形成数分别为26.3±1.2,18.7±1.5,14.7±0.6和2.7±0.6。结论:复方血栓通具有明显抑制血管生成的作用。 展开更多
关键词 复方血栓通 血管生成 绒毛尿囊膜 人脐静脉内皮细胞株(ECV-304) 增殖 移行 管腔形成
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桑叶对肿瘤血管生成的影响 被引量:6
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作者 王志雄 高剑文 缪伟伟 《中国医药导报》 CAS 2014年第25期22-25,共4页
目的研究桑叶对肿瘤血管生成中血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。方法用CCK-8试剂盒测定HUVEC-2C细胞数量的变化;用Transwell转移小室研究HUVEC-2C细胞迁移情况;用包被Matrigel的24孔板来培养HUVEC-2C细胞观察其管腔形成情况。... 目的研究桑叶对肿瘤血管生成中血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。方法用CCK-8试剂盒测定HUVEC-2C细胞数量的变化;用Transwell转移小室研究HUVEC-2C细胞迁移情况;用包被Matrigel的24孔板来培养HUVEC-2C细胞观察其管腔形成情况。实验分为实验组和对照组,每组分别设置3个复孔,在实验组中加入桑叶浸出液。观察桑叶对肿瘤血管生成的影响。结果桑叶液可抑制HUVEC-2C细胞的增殖能力,抑制作用随着浓度的增长而增强。在浓度为100、50、25 mg/mL时,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。当浓度为100 mg/mL的桑叶液时细胞增殖抑制率可达到37.6%。通过观察Transwell小室,与对照组比较,添加了桑叶液的HUVEC-2C细胞,其迁移能力受到一定的制约作用。Matrigel实验中,与未加入桑叶液的HUVEC-2C细胞所形成的较完整的环状结构比较,加入桑叶液的HUVEC-2C细胞在管腔形成方面受到明显的抑制作用。结论桑叶液通过抑制血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成,对肿瘤血管的生成具有抑制作用。 展开更多
关键词 桑叶 肿瘤血管 内皮细胞 增殖 迁移 管腔形成
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乳腺癌细胞exosomes对人脐静脉内皮作用的实验研究 被引量:1
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作者 谢莹珊 沈宜 +3 位作者 隆霜 孙迪 姜蓉 陈黎 《激光杂志》 CSCD 北大核心 2011年第2期71-73,共3页
目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell... 目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell小室法检测HUVECs与exosomes混合培养24h后迁移能力的影响;观察HUVECs与exosomes混合培养24h后管腔样结构形成变化。结果:各浓度exosomes均具有促进HUVECs细胞增殖作用,且以时间剂量依赖性促进HUVEC细胞增殖(P<0.01);200μg/ml exosomes处理HUVECs细胞24小时,HUVEC细胞的迁移能力提高,差异具有显著性(P<0.01),且能显著提高HUVECs体外管腔形成能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MDA-MB-231细胞源exosomes以时间剂量依赖的方式促进HUVECs增殖,且可显著增强HUVECs的迁移能力及其体外管腔形成能力。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞株 EXOSOMES 脐静脉内皮细胞株 增殖 迁移 管腔形成
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舒洛地特对子痫前期孕期血清诱导内皮受损的保护作用
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作者 陶燕燕 梁国庆 +4 位作者 蔡伟 王晓静 张芯 牛秀珑 陈少伯 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第8期802-807,共6页
目的舒洛地特与子痫前期等妊娠高血压疾病的关系目前报道较少。文中旨在观察舒洛地特对子痫前期孕期血清诱导下人脐静脉内皮细胞功能损伤的保护作用,并探讨其相关分子机制。方法收集2019年1月至6月武警部队特色医学中心妇产科20份孕12... 目的舒洛地特与子痫前期等妊娠高血压疾病的关系目前报道较少。文中旨在观察舒洛地特对子痫前期孕期血清诱导下人脐静脉内皮细胞功能损伤的保护作用,并探讨其相关分子机制。方法收集2019年1月至6月武警部队特色医学中心妇产科20份孕12周正常产妇血清(NPS)及20份孕12周子痫前期血清(PES)。以不同浓度舒洛地特(0、0.1、0.3、1、3、10、30 LSU/mL)干预人脐静脉内皮细胞系HUVEC和Ea.hy926。以孕12周的NPS、PES及有效浓度舒洛地特共同干预细胞,分为:对照组(胎牛血清+NaCl)、NPS组(NPS+NaCl)、NPS+0.3 LSU/mL舒洛地特组、NPS+10 LSU/mL舒洛地特组、PES组(PES+NaCl)、PES+0.3 LSU/mL舒洛地特组、PES+10 LSU/mL舒洛地特组。分别用CCK8法和Matrigel法检测细胞增殖和管腔形成能力,并确定舒洛地特的有效浓度。Matrigel法观察舒洛地特对病理血清诱导下内皮功能损伤的保护作用。以ELISA法测定细胞上清液中血管内皮生长因子受体-1(sFLT-1)和胎盘生长因子(PlGF)的分泌水平。结果在HUVEC、Ea.hy926细胞中,NPS+0.3 LSU/mL舒洛地特组sFLT-1表达量较NPS组明显降低(P<0.01),PlGF表达量较NPS组明显升高(P<0.01);PES组sFLT-1表达量较NPS组、PES+0.3 LSU/mL舒洛地特组明显升高[(2653.55±31.24)ng/mL vs(1708.45±38.75)ng/mL,P<0.01]。在Ea.hy926融合细胞中,PES组PlGF表达量较PES+0.3 LSU/mL舒洛地特组明显降低(P<0.01)。结论0.3 LSU/mL舒洛地特可对子痫前期诱导的内皮细胞功能受损产生保护作用,该作用与调节内皮细胞sFLT-1/PIGF的分泌平衡有关。 展开更多
关键词 舒洛地特 子痫前期 人脐静脉内皮细胞 增殖 管腔形成
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INTERVENTIONAL OR SEMI-INTERVENTIONAL TREATMENT FOR BUDD-CHIARI SYNDROME 被引量:4
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作者 张小明 汪忠镐 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2003年第2期111-115,共5页
Objective. Report the results of interventional or semi-interventional techniques for 173 patients with Budd-Chiari syndrome.Method. This group included 120 males and 53 females. The pathologic lesions composed of loc... Objective. Report the results of interventional or semi-interventional techniques for 173 patients with Budd-Chiari syndrome.Method. This group included 120 males and 53 females. The pathologic lesions composed of localized complete occlusion of inferior vena cava (IVC) (78), IVC stenosis (49), IVC membrane with a hole (37), membrane of hepatic vein (HV) (3), IVC thrombosis (4), IVC membrane with thrombosis (2) and IVC lesion with occlusion of HV (32). Treatment methods included that I: Percutaneous transinferior vena cava angioplasty (PTA) (76); II: IVC PTA with stent (59); III: Percutaneous transhepatic vein recanalization (3); IV: IVC thrombolysis through a catheter (4); V; Combined transcardiac and trans-femoral venous membranotomy and balloon dilation (22); VI: V and stent (17); VII; Stenting during radical surgery (3); VIII: Additional operation after intervention (23).Results. The immediate technique success rate for intervention was 90.1%, for the semi-intervention was 100%. The IVC pressure was reduced from 3 to 29 cmH20. Complications occurred in 8 cases. The death rate was 2.9%. A follow-up study showed the recurrence rates were 14.5% in IVC PTA group, 1.7% in IVC PTA with stent, 18.2% in combined technique without stent and no recurrence was found in other groups.Conclusion. The PTA is the first choice for localized lesions. When elastic recoil occurs, immediate stenting is suggested. The semi-interventional approach is advised for PTA failure and more complicated cases. For those with both IVC lesion and occlusion of HV, the additional operation is needed after IVC intervention. 展开更多
关键词 INTERVENTIONAL semi-interventional Budd-Chiari syndrome
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COMBINED INTRAOPERATIVE ILIAC ARTERY STENTS AND FEMORO- POPLITEAL BYPASS FOR MULTILEVEL ATHEROSCLEROTIC OCCLUSIVE DISEASE
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作者 刘昌伟 管珩 +2 位作者 李拥军 郑曰宏 刘卫 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2001年第3期165-168,共4页
Objective. To review our preliminary experience and evaluate our early results of a combined intraoperative iliac angioplasty and stenting with infrainguinal revascularization in multilevel atherosclerotic occlusive d... Objective. To review our preliminary experience and evaluate our early results of a combined intraoperative iliac angioplasty and stenting with infrainguinal revascularization in multilevel atherosclerotic occlusive disease. Methods. From July 1999 to April 2000, intraoperative iliac angioplasty and stenting combined with simultaneous femoro- popliteal bypass were performed on 12 lower extremities of 10 patients suffering from multilevel atherosclerotic occlusive disease. There were 8 men and 2 women, average 72 years. The indications for procedures included disabling claudication in 3 and rest pain in 7 patients. Results. Eleven iliac angioplasty and stent procedures combined with simultaneous 9 femoro- popliteal bypass and 3 femoro- femoral- popliteal bypass were performed in 12 limbs of 10 patients. Angioplasty and stent placement was technically successful in all patients. One contralateral femoral- popliteal bypass was failure after femorofemoral- popliteal bypass. There were no additional instances of procedural or postoperative morbidity or mortali- ty. Mean follow- up was 5 months (range 1~ 10 months). During the follow- up period, one femoro- infrapopliteal graft became occluded after 7 months and above- knee amputation was required. The cumulative primary patency rate of stented iliac arteries, femoro- femoral bypass grafts and femoro- popliteal bypass grafts were 100% (11/11), 100% (3/3) and 90.9% (10/11) in the follow- up period, respectively. The amputation rate was 8.3% (1/12). Conclusions. Intraoperative iliac artery PTA and stent placement can be safely and effectively performed simultaneously with infrainguinal revascularization for multilevel atherosclerotic occlusive disease by skilled vascular surgeon, using a portable C arm fluoroscopy in the operating room. Furthermore, iliac artery PTA and stenting was valuable adjunct to distal bypass either to improve inflow and outflow, or to reduce the extent of traditional surgical intervention, and also, any angioplasty and stenting- related complications can be immediately corrected as well. 展开更多
关键词 atherosclerotic occlusive disease iliac angioplasty STENTING femoro- popliteal bypass
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