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题名利用正交设计对简易银染法的优化研究
被引量:1
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作者
刘志理
郭晓红
贾建英
韩俊文
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机构
山西农业大学动物科技学院
临汾职业技术学院动物科学系
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出处
《国外畜牧学(猪与禽)》
2010年第2期66-68,共3页
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文摘
用正交设计研究了DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)凝胶的简易银染中各因素对银染效果的影响,通过PCR技术扩增了山西白猪第六世代15个耳组织基因组的两条微卫星DNA序列,这些序列经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和500ladder Marker标记跑板后,利用正交法设计简易银染法各因素的组合,对凝胶进行染色。试验结果表明,染色液用AgNO3浓度0.10%、显色用含NaOH1.50%、甲醛0.40%混合液、水温30℃时对PAGE凝胶染色的效果最好。
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关键词
正交设计
聚丙烯酰胺凝胶电泳
简易银染法
优化
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分类号
S813.3
[农业科学—畜牧学]
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题名SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法改进
被引量:14
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作者
李立群
王培
王小利
郑锦娟
马长珍
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机构
西北农林科技大学农学院
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出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第34期16541-16544,共4页
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基金
西北农林科技大学大型仪器设备新功能开发项目(dysb-110304)
西北农林科技大学2011年教改项目(JY110-2003)
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文摘
[目的]改良SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,提高大规模SSR分子标记分析的工作效率。[方法]在利用SSR标记构建中国春/兰考大粒F2群体遗传图谱的基础上,对变性PAGE点样方法进行改进,并对中国春/兰考大粒筛选的122对差异引物进行组合分析。[结果]试验表明,引物扩增条带特异性强、覆盖范围不大即可采用两次点样法分析;两次点样和单次点样的凝胶扩增条带均清晰可辨;分析相同数量的样品,两次点样法较单次点样法节约了41%的试验时间,节约了50%的试剂用量。[结论]两次点样法简化了试验步骤,节约了试验成本,加速了试验进程,更适用于遗传作图。
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关键词
聚丙烯酰胺凝胶电泳
两次点样
简易银染
SSR
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Keywords
Polyacrylamide gel electrophoresis
Twice spotting
Simple silver staining
Simple sequence repeat
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分类号
S188
[农业科学—农业基础科学]
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