基于细胞性质分析不同有机溶剂对简单节杆菌C1,2脱氢反应的影响 被引量：6

1

作者 骆健美 宋妍 +4 位作者 王建锋 宁静 成永新 郑宇 申雁冰 《化学与生物工程》 CAS 2012年第5期49-53,共5页

通过对简单节杆菌细胞性质的研究,探讨了不同有机溶剂(乙醇、DMF、DMSO、甲醇)加入后醋酸可的松生物转化反应效率产生差异的原因。采用底物转化法检测生物转化率,采用平板活菌计数法计算细胞存活率,通过糖代谢活力保留值表征细胞的生理... 通过对简单节杆菌细胞性质的研究,探讨了不同有机溶剂(乙醇、DMF、DMSO、甲醇)加入后醋酸可的松生物转化反应效率产生差异的原因。采用底物转化法检测生物转化率,采用平板活菌计数法计算细胞存活率,通过糖代谢活力保留值表征细胞的生理代谢活力,用原子力显微镜观察细胞超显微结构,以FDA法表征细胞膜通透性。在体积分数为4%的条件下,4种有机溶剂均能提高简单节杆菌生物转化醋酸可的松的初始转化速率和最终转化率,转化率从高到低依次为乙醇>DMSO>甲醇>DMF;4种溶剂对简单节杆菌存活率和糖代谢活力保留值的影响趋势基本一致,其中DMF最大,DMSO次之,乙醇和甲醇较小;4种溶剂中,甲醇对简单节杆菌细胞完整性的影响最大,乙醇次之,DMF和DMSO差别不明显;4种有机溶剂对简单节杆菌细胞膜通透性的影响大小依次为甲醇>乙醇>DMSO>DMF。上述结果表明,细胞生理代谢活力和细胞膜通透性的差异是造成转化率水平不同的重要原因。其中,细胞膜通透性的增强有利于底物分子更容易进入细胞与生物酶接触,进而提高转化率。 展开更多

关键词 有机溶剂 简单节杆菌 细胞性质 脱氢反应 转化效率

在线阅读 下载PDF 职称材料

简单节杆菌催化17α-羟基-16β-甲基孕甾-4,9(11)二烯-3,20-二酮脱氢动力学研究 被引量：3

2

作者 王普 林建平 +1 位作者 陈希杨 岑沛霖 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1035-1038,共4页

作为倍他米松合成的重要环节,本文研究了简单节杆菌催化17α 羟基 16β 甲基孕甾 4,9(11)二烯 3,20 二酮的C1,2微生物脱氢生成17α 羟基 16β 甲基孕甾 1,4,9(11)三烯 3,20 二酮的反应.考察了不同菌体量和底物质量浓度对反应初速度的影... 作为倍他米松合成的重要环节,本文研究了简单节杆菌催化17α 羟基 16β 甲基孕甾 4,9(11)二烯 3,20 二酮的C1,2微生物脱氢生成17α 羟基 16β 甲基孕甾 1,4,9(11)三烯 3,20 二酮的反应.考察了不同菌体量和底物质量浓度对反应初速度的影响,结果表明,提高菌体质量浓度有利于提高反应速率,反应初速度与底物质量浓度的关系符合米氏方程.考虑底物及产物的固液平衡以及产物抑制,建立了相应的动力学模型,并对不同初始底物质量浓度下的格氏物间歇脱氢反应过程曲线进行了拟合,模型计算值与实验值吻合较好. 展开更多

关键词 简单节杆菌 格氏物 微生物脱氢 动力学

在线阅读 下载PDF 职称材料

乙醇对简单节杆菌TCCC 11037生长和细胞性质的影响 被引量：4

3

作者 王建锋 骆健美 +3 位作者 宋妍 刘洋 郑宇 王敏 《化学与生物工程》 CAS 2011年第3期66-69,共4页

研究了乙醇体积分数对简单节杆菌TCCC 11037生长和细胞性质的影响。结果表明,随着乙醇体积分数的增大,菌体的延滞期延长,生物量和比生长速率下降,当乙醇体积分数为6%时几乎不能观察到明显的菌体生长;菌体形态随着乙醇体积分数的增大出... 研究了乙醇体积分数对简单节杆菌TCCC 11037生长和细胞性质的影响。结果表明,随着乙醇体积分数的增大,菌体的延滞期延长,生物量和比生长速率下降,当乙醇体积分数为6%时几乎不能观察到明显的菌体生长;菌体形态随着乙醇体积分数的增大出现较明显的改变,当乙醇体积分数为8%时,细胞完整性明显破坏,胞浆大量外泄;菌体的耗糖能力随着乙醇体积分数的增大受到明显抑制,菌体生长到32 h时,对照组和3%乙醇添加组中的葡萄糖浓度由9.8g.L-1分别下降到2.2 g.L-1和5.6 g.L-1,6%乙醇添加组几乎没有明显的糖耗。利用Rh123法和FDA荧光法分别测定了乙醇体积分数对菌体跨膜电位和通透性的影响。结果表明,随着乙醇体积分数的增大,跨膜电位下降,细胞膜通透性提高,当乙醇体积分数为3%和6%时,跨膜电位分别下降了14.14%和24.58%,细胞膜通透性分别增加了6.58%和18.37%。 展开更多

关键词 简单节杆菌 乙醇体积分数 菌体生长 细胞性质

在线阅读 下载PDF 职称材料

简单节杆菌AS1.94*细胞对有机溶剂的耐受性 被引量：1

4

作者 别松涛 王珊 +2 位作者 蒋彦洁 路福平 杜连详 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第7期28-32,共5页

以糖代谢活力保留值R(%)为指标,研究简单节杆菌细胞在15种logPoct不同的有机溶剂中的耐受性。发现游离简单节杆菌细胞和固定化简单节杆菌细胞糖代谢活力保留值与溶剂logPoct值大致都呈"S"型曲线关系。考察了微生物的生长时期... 以糖代谢活力保留值R(%)为指标,研究简单节杆菌细胞在15种logPoct不同的有机溶剂中的耐受性。发现游离简单节杆菌细胞和固定化简单节杆菌细胞糖代谢活力保留值与溶剂logPoct值大致都呈"S"型曲线关系。考察了微生物的生长时期、摇床转速、摇床温度、水相介质等对游离简单节杆菌细胞有机溶剂耐受性的影响,结果发现,不同生长时期、摇床转速、摇床温度对简单节杆菌的有机溶剂耐受性有很大的影响,而采用不同的水相介质简单节杆菌的糖代谢活力保留值R(%)没有明显的差别。 展开更多

关键词 简单节杆菌 有机溶剂 耐受性 糖代谢活力保留值

在线阅读 下载PDF 职称材料

海藻酸钠固定化简单节杆菌的研究 被引量：1

5

作者 潘继伦 韩丽君 +1 位作者 童明容 俞耀庭 《功能材料》 EI CAS CSCD 1994年第5期456-457,464,共3页

研究了用海藻酸钠作载体，用包埋法固定化简单节杆菌（ＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒＳｉｍｐｌｅｘ）Ｂｙ－２－１３的制备条件及固定化菌的一般性质。用１０ｍｌ４％海藻酸钠包埋０．５ｇ湿菌体活力收率可达８７％。固定化菌的最适ｐＨ与... 研究了用海藻酸钠作载体，用包埋法固定化简单节杆菌（ＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒＳｉｍｐｌｅｘ）Ｂｙ－２－１３的制备条件及固定化菌的一般性质。用１０ｍｌ４％海藻酸钠包埋０．５ｇ湿菌体活力收率可达８７％。固定化菌的最适ｐＨ与最适温度与游离菌相同；固定化菌的储存稳定性高于游离菌。 展开更多

关键词 海藻酸钠 固定化 载体 简单节杆菌 活力收率

在线阅读 下载PDF 职称材料

固定化简单节杆菌转化醋酸可的松动力学 被引量：1

6

作者 张瑛 王明耀 +2 位作者 姚传义 张宝文 王致萍 《天津大学学报》 EI CAS CSCD 1999年第1期41-44,共4页

研究了利用聚乙烯醇复合材料包埋简单节杆菌转化醋酸可的松脱氢的动力学过程．实验测得了醋酸可的松在Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中的饱和浓度和在该固定化细胞中的有效扩散系数．采用排除内、外扩散影响的方法建立了相应的动力学模型，计... 研究了利用聚乙烯醇复合材料包埋简单节杆菌转化醋酸可的松脱氢的动力学过程．实验测得了醋酸可的松在Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液中的饱和浓度和在该固定化细胞中的有效扩散系数．采用排除内、外扩散影响的方法建立了相应的动力学模型，计算值与实验值吻合较好． 展开更多

关键词 简单节杆菌 醋酸可的松 固定化细胞 动力学 脱氢

在线阅读 下载PDF 职称材料

简单节杆菌催化6α-甲基醋酸可的松C_(1,2)脱氢动力学 被引量：6

7

作者 龚万本 关怡新 +1 位作者 王海清 姚善泾 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期983-988,共6页

研究了简单节杆菌催化6α-甲基醋酸可的松C1,2脱氢转化生成6α-甲基醋酸强的松的动力学。分别考察了菌体质量浓度、底物质量浓度及添加不同质量浓度的产物对脱氢反应过程的影响。结果表明,随着菌体质量浓度的增加,脱氢反应速率随之加快... 研究了简单节杆菌催化6α-甲基醋酸可的松C1,2脱氢转化生成6α-甲基醋酸强的松的动力学。分别考察了菌体质量浓度、底物质量浓度及添加不同质量浓度的产物对脱氢反应过程的影响。结果表明,随着菌体质量浓度的增加,脱氢反应速率随之加快。较高质量浓度的底物及不同质量浓度的产物均会对脱氢反应产生抑制作用。建立了该脱氢反应的动力学模型,经线性化回归拟合出该反应的动力学参数。 展开更多

关键词 简单节杆菌 C1 2脱氢转化 6α-甲基醋酸可的松 6α-甲基醋酸强的松 脱氢动力学

在线阅读 下载PDF 职称材料

简单节杆菌groEL基因表达对大肠杆菌抗逆性能的影响 被引量：1

8

作者 王艳霞 王红玲 +1 位作者 王敏 骆健美 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期180-186,共7页

以简单节杆菌(Arthrobacter simplex)TCCC 11037基因组为模板,通过PCR方法进行gro EL基因克隆,结果表明,该菌株中Gro EL的核苷酸和氨基酸序列与Nocardioides sp.JS614来源的Gro EL同源性最高,分别为89%和95%。通过p ET-22b(+)将其在大... 以简单节杆菌(Arthrobacter simplex)TCCC 11037基因组为模板,通过PCR方法进行gro EL基因克隆,结果表明,该菌株中Gro EL的核苷酸和氨基酸序列与Nocardioides sp.JS614来源的Gro EL同源性最高,分别为89%和95%。通过p ET-22b(+)将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,结果表明,重组菌株在甲醇、高渗和强酸这3种压力高浓度冲击条件下的存活能力和适当压力条件下的生长性能均明显提高。 展开更多

关键词 简单节杆菌 gro EL 异源表达 大肠杆菌 抗逆性能

在线阅读 下载PDF 职称材料

简单节杆菌treS表达对大肠杆菌抗逆性能的影响

9

作者 孙亚华 程洪金 +1 位作者 鲁志毅 骆健美 《山东农业大学学报（自然科学版）》 北大核心 2021年第2期234-240,共7页

简单节杆菌(Arthrobacter simplex)是工业上普遍使用的甾体C1,2脱氢菌株,转化过程中常常需要添加乙醇等有机溶剂增加疏水性底物的溶解性,但高浓度的有机溶剂会对菌体产生毒害作用。课题组前期通过组学技术发现,海藻糖合成过程中的海藻... 简单节杆菌(Arthrobacter simplex)是工业上普遍使用的甾体C1,2脱氢菌株,转化过程中常常需要添加乙醇等有机溶剂增加疏水性底物的溶解性,但高浓度的有机溶剂会对菌体产生毒害作用。课题组前期通过组学技术发现,海藻糖合成过程中的海藻糖合酶(TreS)与该菌株乙醇胁迫条件下的适应行为密切相关。在此基础上,本文以工业菌株TCCC 11037基因组为模板进行treS的克隆及其生物信息学分析。结果表明,该菌株treS的氨基酸序列与来源于Nocardioides sp.J54的海藻糖合成酶基因的同源性最高,为94%。蛋白的相对分子质量65202.39 Da,等电点为4.66,具有不稳定性和亲水性,无跨膜螺旋结构,主要存在于细胞质中。treS的表达对大肠杆菌的生长性能无明显影响,但能显著提高其对甲醇、高渗和高盐这三种压力的耐受性。该工作对简单节杆菌中treS基因克隆和表达的首次报道,为深入研究该基因的生物学功能提供基础数据。 展开更多

关键词 简单节杆菌 大肠杆菌 抗逆性能

在线阅读 下载PDF 职称材料

双水相体系中甾类化合物6-甲基氢化可的松的生物转化研究 被引量：6

10

作者 孙新宇 王普 +1 位作者 何军邀 周莺 《浙江工业大学学报》 CAS 2007年第6期617-621,共5页

双水相体系作为一种新型生物反应体系,与其他反应体系相比,双水相体系具有生物相容性高、反应条件温和以及实现生物反应-产物分离耦合等优点.利用简单节杆菌Arthrobacter simplex UR016在PEG/Dextran双水相体系中对6-甲基氢化可的松进行... 双水相体系作为一种新型生物反应体系,与其他反应体系相比,双水相体系具有生物相容性高、反应条件温和以及实现生物反应-产物分离耦合等优点.利用简单节杆菌Arthrobacter simplex UR016在PEG/Dextran双水相体系中对6-甲基氢化可的松进行Δ^1脱氢制备6-甲基泼尼松龙,对双水相体系的组成进行了选择和优化,研究得到的最佳转化体系组成和配比为16%PEG20000/4%Dextran40000.在构建的此双水相转化体系中最适6-甲基氢化可的松底物加入量为4.5 g/L,转化48 h,6-甲基氢化可的松的转化率可达到95.72%,较水相脱氢转化率提高了25%～30%. 展开更多

关键词 6-甲基氢化可的松 简单节杆菌 双水相 生物转化

在线阅读 下载PDF 职称材料

液膜固定化细胞甾体转化的研究

11

作者 姜坪 李乃宏 何炳林 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS 1986年第8期745-749,共5页

本文研究了液膜固定化简单节杆菌进行较大有机分子甾体类的生物转化,结果表明液膜固定化细胞可成功进行氢化可的松—→去氢氢化可的松的△′-脱氢反应。研究了液膜固定化细胞的制备、性质和影响甾体转化的各种因素。在某些液膜体系中其... 本文研究了液膜固定化简单节杆菌进行较大有机分子甾体类的生物转化,结果表明液膜固定化细胞可成功进行氢化可的松—→去氢氢化可的松的△′-脱氢反应。研究了液膜固定化细胞的制备、性质和影响甾体转化的各种因素。在某些液膜体系中其转化反应初期的比活力与自由细胞相同。细胞在液膜内可存活较长时间,提高了贮存稳定性。液膜固定化细胞体系基本不受染茵的影响,而自由细胞转化作用明显受抑制。 展开更多

关键词 简单节杆菌 固定化细胞 贮存稳定性 氢化可的松 转化反应 脱氢反应 液膜 有机分子

在线阅读 下载PDF 职称材料

两相体系中微生物转化法制备依西美坦 被引量：2

12

作者 谌蓉 李光 +3 位作者 张娟 刘芳 彭智辉 邓乐 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第2期112-117,共6页

采用有机介质中微生物转化的方法,对甾体C1,2位的生物脱氢进行了研究.通过考察有机溶剂对甾体底物和产物的溶解度,微生物细胞在不同有机溶剂中的存活率以及有机溶剂的加入量,构建了较合适的二甲苯/发酵液两相体系,且二甲苯加入量占总体... 采用有机介质中微生物转化的方法,对甾体C1,2位的生物脱氢进行了研究.通过考察有机溶剂对甾体底物和产物的溶解度,微生物细胞在不同有机溶剂中的存活率以及有机溶剂的加入量,构建了较合适的二甲苯/发酵液两相体系,且二甲苯加入量占总体积的15%为宜.然后以雄甾-4-烯-6-亚甲基-3,17-二酮为底物,利用简单节杆菌(Arthrobacter simplex)完整细胞在两相体系中对甾体A环C1,2位进行生物脱氢,得到抗肿瘤药物依西美坦(雄甾-1,4-二烯-6-亚甲基-3,17-二酮).对转化时间、转化温度、摇床转速、摇瓶装液量等条件进行了一系列的研究.结果表明,在装液量为20 mL每100 mL三角瓶,温度为32℃,转速为180 r/min,转化时间为24 h的条件下,转化率可达到13.6%. 展开更多

关键词 有机溶剂/水两相体系 微生物转化 简单节杆菌 依西美坦

在线阅读 下载PDF 职称材料