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非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立 被引量:4
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作者 张皓淳 魏园园 +4 位作者 杨作丰 邓文超 王冰 李巍 王连山 《现代畜牧兽医》 2019年第11期13-16,共4页
针对非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立进行研究,为了形成一种快速、操作性强的分子检测技术手段,生物研究领域提出基于ASFA重组酶聚合酶扩增的等温检测方法。当非洲猪瘟病毒在38℃水浴锅中反应30 min,能实现目的片段的扩增,便于之后... 针对非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立进行研究,为了形成一种快速、操作性强的分子检测技术手段,生物研究领域提出基于ASFA重组酶聚合酶扩增的等温检测方法。当非洲猪瘟病毒在38℃水浴锅中反应30 min,能实现目的片段的扩增,便于之后的病毒检测。该方法具有检测成本低、操作简单、结果可靠等优势,为非洲猪瘟有效防范提供了有效的技术保障。 展开更多
关键词 非洲瘟疫病毒 等温检测方法 分子检测
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鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究 被引量:1
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作者 刘艳华 任彤 +1 位作者 谈艳苗 张利峰 《中国动物检疫》 CAS 2018年第10期99-103,共5页
鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到。为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介... 鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到。为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间为1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,且不与传染性鲑鱼贫血病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒、病毒性神经坏死病病毒、草鱼呼肠孤病毒和鲤春病毒血症病毒的RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见。本研究建立的RTLAMP方法是一种特异性强、方便快捷的SAV检测方法,适合SAV的现场初筛和核酸检测。 展开更多
关键词 鲑鱼甲病毒 逆转录环介导等温扩增检测方法 检测 特异性
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草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究
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作者 张旻 王娜 +1 位作者 景宏丽 吴绍强 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第4期71-75,共5页
为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度... 为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,比传统的RT-PCR方法要高10倍。且不与鲤春病毒、传染性造血器官坏死病病毒、传染性胰脏坏死病毒和病毒性出血性败血症病毒RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见,是一种特异性强、方便快捷的检测方法,适合GCRV-873株的现场初筛和核酸检测工作。 展开更多
关键词 草鱼呼肠孤病毒 逆转录环介导等温扩增检测方法 检测 特异性
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