期刊文献+
共找到166篇文章
< 1 2 9 >
每页显示 20 50 100
序列特异性引物-聚合酶链反应法用于广东汉族人群HLA DQA1等位基因分析 被引量:3
1
作者 吴耀生 罗超权 +1 位作者 杨英浩 伍新尧 《中山医科大学学报》 CSCD 1998年第2期112-114,共3页
目的:研究广东汉族人群中人类白细胞抗原(HLA)DQA1等位基因频率分布,为HLADQA1相关疾病的研究及人类学的研究提供基础资料。方法:用序列特异性引物聚合酶链反应(SSPPCR)法对广东汉族人群作HLADQA... 目的:研究广东汉族人群中人类白细胞抗原(HLA)DQA1等位基因频率分布,为HLADQA1相关疾病的研究及人类学的研究提供基础资料。方法:用序列特异性引物聚合酶链反应(SSPPCR)法对广东汉族人群作HLADQA1等位基因分型,根据出现扩增产物所用的序列特异性引物,直接分析判断受检查者的基因型别。结果:146例广东汉族健康无血缘关系个体中共检出10个等位基因,以DQA10301的频率(0.291)最高,基因型的观察值与期望值相比,符合HardyWeinberg平衡,纯合基因型的观察值与期望值相比,P>0.95,家系调查及重复性试验显示结果可靠。结论:广东汉族HLADQA1基因与其他10组华人群体的资料比较,总体检验有显著差异,但均以DQA10301的频率最高,显示华人的遗传系统既有共性亦有各自的特点,南方汉族人群体间或与南方一些少数民族比较均有显著差异,显示南方华人群体遗传背景的复杂性。 展开更多
关键词 HLA 等位基因 聚合反应 DQA1
在线阅读 下载PDF
蜡样芽孢杆菌特异性基因筛选及聚合酶链式反应检测方法的建立 被引量:4
2
作者 赵岩岩 王书彦 +7 位作者 赵琳琳 赵璐 周威 崔震昆 张浩 王淼焱 王书贤 赵圣明 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期271-277,共7页
该研究以蜡样芽孢杆菌ATCC 14579的基因组为模板,利用比较基因组学方法筛选并通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证获得3个蜡样芽孢杆菌的特异性基因,用于食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测,并对引物的特异性、灵敏度、... 该研究以蜡样芽孢杆菌ATCC 14579的基因组为模板,利用比较基因组学方法筛选并通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)验证获得3个蜡样芽孢杆菌的特异性基因,用于食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测,并对引物的特异性、灵敏度、抗干扰能力和人工污染检测限等进行评价。结果表明,筛选获得的3个基因片段特异性较好。其中以gene2626设计的引物gFA2特异性最好,检测灵敏度可达359. 5 fg/μL。抗干扰评价结果表明在牛肉背景菌群浓度5. 28×10^7CFU/m L和猪肉背景菌群浓度7. 75×10^6CFU/m L的干扰下,蜡样芽孢杆菌的最低检出限为3. 74×10^3CFU/m L。人工污染试验结果表明,蜡样芽孢杆菌经增菌培养10 h后,人工污染的牛肉和猪肉样品中蜡样芽孢杆菌的检出限分别为4. 62和8. 38 CFU/g。因此该研究筛选的特异性基因及建立的PCR检测方法在食品中蜡样芽孢杆菌的快速检测方面具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 异性基因 筛选 聚合反应
在线阅读 下载PDF
巯基乙酸修饰的CdTe量子点对聚合酶链反应特异性的影响 被引量:5
3
作者 李清 贺蓉 +2 位作者 高峰 潘碧峰 崔大祥 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期693-696,700,共5页
合成了巯基乙酸(TGA)修饰的量子点,X衍射分析证实CdTe相的存在,高分辨电子显微镜分析表明量子点的直径为3 nm,Zeta电位表征表明量子点表面带有负电荷.把TGA修饰的CdTe量子点加入到聚合酶链反应(PCR)反应液中,使用brcaa1基因载体作为... 合成了巯基乙酸(TGA)修饰的量子点,X衍射分析证实CdTe相的存在,高分辨电子显微镜分析表明量子点的直径为3 nm,Zeta电位表征表明量子点表面带有负电荷.把TGA修饰的CdTe量子点加入到聚合酶链反应(PCR)反应液中,使用brcaa1基因载体作为PCR反应的模板,进行两轮PCR反应.最终的PCR产物通过w=1%的琼脂糖凝胶电泳进行分析,结果表明,在0-1.33 g/L范围内,随着量子点的量逐渐增加,非特异性的扩增条带逐渐消失,荧光(PL)光谱表明PCR反应后的量子点荧光强度降低.X射线光电子能谱(XPS)证实PCR反应前后Cd元素和Te元素的能谱峰并没有出现化学位移,吸收光谱(UV-vis)表明了PCR反应之后的吸收强度增强.因此,TGA修饰的CdTe量子点置于PCR反应液之中,能提高PCR的特异性,可以应用于超灵敏DNA检测、光电生物传感器. 展开更多
关键词 CDTE量子点 聚合反应 异性
在线阅读 下载PDF
逆转录聚合酶链反应检测Ⅲ型登革病毒的敏感性和特异性研究
4
作者 李刚 王飞 +2 位作者 郭日波 柯伟民 廖育煌 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1993年第3期235-237,共3页
本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139~1158位,引物1位于1453~1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。... 本文应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测Ⅲ型登革病毒基因。所设计引物在E基因组,引物2位于核苷酸序列的1139~1158位,引物1位于1453~1471位,反应产物为333bp,内含1个HindⅢ限制性内切酶位点,酶切后有128 bp和199 bp两个片段。产物在含溴化乙锭的2%琼脂糖中电泳。采用RT-PCR法可测出少至5个半数组织细胞培养感染量(TCID_so)的病毒RNA。 展开更多
关键词 逆转录聚合反应 登革病毒 异性研究 E基因 组织细胞培养 引物 敏感性 限制性内切 RNA
在线阅读 下载PDF
基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ序列位点特异性聚合酶链反应鉴别鹿茸及其伪品 被引量:1
5
作者 杨重晖 尹程程 +7 位作者 宋文博 荆礼 陈昊媛 杨洋 李芳宇 刘莉 赵大庆 齐滨 《世界中医药》 CAS 2020年第10期1381-1385,共5页
目的:基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)序列建立一种新的PCR鉴定方法,以快速鉴别出梅花鹿、马鹿茸片与驯鹿茸片。方法:采集不同来源的鹿茸片共60批。通过比较梅花鹿、马鹿与驯鹿等其他伪品的COⅠ基因序列差异,根据SNP鉴别位点设计梅花... 目的:基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)序列建立一种新的PCR鉴定方法,以快速鉴别出梅花鹿、马鹿茸片与驯鹿茸片。方法:采集不同来源的鹿茸片共60批。通过比较梅花鹿、马鹿与驯鹿等其他伪品的COⅠ基因序列差异,根据SNP鉴别位点设计梅花鹿茸、马鹿茸同驯鹿茸的鉴别引物Cne-F、Rt-F、Co-R,并对影响聚合酶链反应(PCR)结果的主要因素变性时间、退火温度、退火时间、延伸时间等进行方法学考察和优化。结果:该实验构建的双位点特异PCR鉴别体系,基于COⅠ的鉴别位点,可通过PCR扩增获得294 bp的梅花鹿、马鹿特异片段,而产生514 bp的驯鹿特异片段,伪品及阴性对照无条带。结论:该实验建立对梅花鹿、马鹿及驯鹿等其他伪品鹿茸的PCR鉴别方法简便、可靠。 展开更多
关键词 鹿茸 细胞色素C氧化亚基Ⅰ DNA 位点异性 聚合反应 分子鉴定
在线阅读 下载PDF
氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率、灵敏度和特异性的影响
6
作者 蒋城 杨中柱 +1 位作者 赵美莲 宋瑱 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期724-729,共6页
以人类基因组DNA和志贺氏菌粗制裂解菌液为模板,扩增115 bp的Alu基因片段和402 bp的ipaH基因片段.通过设置氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)和模板的浓度为变量,分别研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩... 以人类基因组DNA和志贺氏菌粗制裂解菌液为模板,扩增115 bp的Alu基因片段和402 bp的ipaH基因片段.通过设置氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)和模板的浓度为变量,分别研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增效率和灵敏度的影响;运用多轮PCR扩增方法研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增特异性的影响.结果显示,氧化石墨烯有效提高PCR扩增效率的范围为9—14倍,提高PCR灵敏度一个数量级以及增加多轮PCR扩增中的两轮扩增反应.从原子力显微镜(Atomic force microscope,AFM)的结果可以看出,本文制备的氧化石墨烯片层厚度主要集中在0.5—0.8 nm,少数大于1 nm,总体具有较大的比表面积.除此之外,本文还发现当氧化石墨烯浓度到达μg·μL^(-1)后,引物二聚体与氧化石墨烯的浓度呈正比,说明氧化石墨烯优化PCR的主要影响因素是其与引物的相互作用. 展开更多
关键词 氧化石墨烯 聚合反应 扩增效率 灵敏度 异性
在线阅读 下载PDF
金纳米粒子对聚合酶链式反应体系中长链DNA特异性扩增的效应
7
作者 刘美荣 朱树华 周杰 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第3期391-395,共5页
以乙烯受体基因ETR1(2500bp)和山梨醇脱氢酶基因(SDH)(1100bp)为材料,研究了不同浓度金纳米粒子对聚合酶链式反应(PCR)体系中大于1000bp的长链DNA特异性扩增的效应。结果表明,金纳米粒子显著增强了ETR1和SDH在PCR时的特异性... 以乙烯受体基因ETR1(2500bp)和山梨醇脱氢酶基因(SDH)(1100bp)为材料,研究了不同浓度金纳米粒子对聚合酶链式反应(PCR)体系中大于1000bp的长链DNA特异性扩增的效应。结果表明,金纳米粒子显著增强了ETR1和SDH在PCR时的特异性扩增,有效降低了非特异性扩增。在ETR1和SDH的PCR中,金纳米粒子适宜浓度为0.4nmol·L^-1。在50℃-62℃的退火温度范围内,金纳米粒子均能够显著增强ETR1和SDH的特异性扩增。因此,金纳米粒子不仅提高了1000bp以上的长链DNA在PCR扩增的特异性,而且拓宽了PCR的退火温度范围。 展开更多
关键词 金纳米粒子 聚合反应 异性扩增 异性扩增 DNA
在线阅读 下载PDF
应用等位基因特异性PCR检测胆固醇酯转运蛋白基因突变 被引量:6
8
作者 周代锋 蔡望伟 +3 位作者 云美玲 张勇 习隽丽 王镇 《海南医学院学报》 CAS 2009年第7期693-697,701,共6页
目的:建立检测胆固醇酯转运蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)基因6种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对CETP基因TaqIB(G→A)、I405V(A→G)、D442G(A→G)、R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)这6种常见... 目的:建立检测胆固醇酯转运蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)基因6种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对CETP基因TaqIB(G→A)、I405V(A→G)、D442G(A→G)、R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)这6种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中CETP基因突变类型进行了检测,同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果:在海南汉、黎族人群中,TaqIB(G→A)突变位点可检测出GG、GA、AA3种基因型,I405V(A→G)突变位点可检测出AA、AG、GG3种基因型,D442G(A→G)突变位点可检测出AA、AG2种基因型,但在海南汉、黎族人群中未检测到R451Q(G→A)、A373P(G→C)和I14A(G→A)3种突变类型,用等位基因特异性PCR鉴定的CETP基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论:等位基因特异性PCR技术操作简便,重复性和稳定性好,可作为鉴定CETP基因突变类型的可行方法。 展开更多
关键词 胆固醇酯转运蛋白基因 等位基因异性 聚合反应 基因分型
在线阅读 下载PDF
等位基因特异性PCR技术及其法医学应用 被引量:3
9
作者 聂燕钗 王斌 +1 位作者 赵子琴 周怀谷 《法医学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期282-287,共6页
等位基因特异性PCR(allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)是一种基于等位基因特异性引物引导的PCR技术,可以有效地分析单核苷酸多态性(SNP),包括碱基的转换、颠换以及插入/缺失多态性,在疾病研究、分子诊断以及法医物证... 等位基因特异性PCR(allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)是一种基于等位基因特异性引物引导的PCR技术,可以有效地分析单核苷酸多态性(SNP),包括碱基的转换、颠换以及插入/缺失多态性,在疾病研究、分子诊断以及法医物证学研究中具有很好的应用价值。本文系统地综述了AS-PCR技术的原理、检测手段、改进方法及在常染色体、Y染色体和线粒体SNP等领域的研究成果,探讨其法医学应用价值。 展开更多
关键词 法医遗传学 聚合反应 综述[文献类型] 等位基因异性
在线阅读 下载PDF
应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变 被引量:1
10
作者 周代锋 张云霞 +4 位作者 张勇 陈少华 李林江 习隽丽 王镇 《海南医学院学报》 CAS 2010年第10期1253-1255,1258,共4页
目的:建立检测血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因2种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对AGT基因T174M和M235T这2种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中AGT基因突变类型进行了检测,同时... 目的:建立检测血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)基因2种常见突变的等位基因特异性PCR技术。方法:应用针对AGT基因T174M和M235T这2种常见的突变位点设计的等位基因特异性PCR技术,对海南汉、黎族人群中AGT基因突变类型进行了检测,同时对经上述等位基因特异性PCR检测的样本进行序列测定。结果:在海南汉、黎族人群中,T174M突变位点可检测出TT、TM、MM 3种基因型,M235T突变位点可检测出MM、MT、TT 3种基因型,用等位基因特异性PCR鉴定的AGT基因突变的基因分型结果与序列测定结果完全符合。结论:等位基因特异性PCR技术操作简便,重复性和稳定性好,可作为鉴定AGT基因突变类型的可行方法。 展开更多
关键词 血管紧张素原基因 等位基因异性 聚合反应(PCR) 基因分型
在线阅读 下载PDF
新西兰柔鱼与北太平洋柔鱼的品种特异性聚合酶链式反应鉴定
11
作者 衣洁菡 赵爱华 +3 位作者 王金荣 郭德慧 李燕青 仲米存 《肉类研究》 北大核心 2020年第6期80-84,共5页
利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因,通过多重序列比对检测2种鱿鱼之间的多态性位点。根据2种鱿鱼的特异性... 利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因,通过多重序列比对检测2种鱿鱼之间的多态性位点。根据2种鱿鱼的特异性位点分别设计2种鱿鱼的品种特异性引物,并利用多重PCR实现2种鱿鱼品种的特异性鉴定和区分。结果表明:建立的品种特异性PCR鉴别体系对新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼分别扩增出214 bp和339 bp的品种特异性条带,该方法的检测限低至0.1 ng,且能检测出新西兰柔鱼中1%的北太平洋柔鱼掺入,并能有效检测市场上2种鱿鱼及其复配鱼糜制品的原料来源。 展开更多
关键词 鱿鱼 新西兰柔鱼 北太平洋柔鱼 多态性位点 品种异性聚合反应
在线阅读 下载PDF
用甲酰胺提高多聚酶链式反应的特异性、灵敏度和效率的研究
12
作者 黄超 毛裕民 唐榕 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第4期438-442,共5页
在多聚酶链式反应体系中加入甲酰胺可以有效地抑制非特异性扩增,提高特异性扩增,并使反应的灵敏度提高一个数量级。
关键词 甲酰胺 异性扩增 聚合反应
在线阅读 下载PDF
甲醛固定石蜡包埋切片经特殊染色后荧光定量聚合酶链反应检测的再利用 被引量:1
13
作者 魏雪 叶胜兵 +4 位作者 章如松 夏秋媛 饶秋 马恒辉 吴楠 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期239-240,共2页
结核病是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的特异性炎症,在甲醛固定石蜡包埋组织切片中查见MTB是确诊结核的“金标准”。目前,结核病诊断的主要辅助检测方法是特殊染色和qRT-PCR检测。在临床病理诊断中,部分结... 结核病是由结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的特异性炎症,在甲醛固定石蜡包埋组织切片中查见MTB是确诊结核的“金标准”。目前,结核病诊断的主要辅助检测方法是特殊染色和qRT-PCR检测。在临床病理诊断中,部分结核病患者由于获取标本困难,穿刺标本微小,病理组织多被用于HE染色、特殊染色,所剩组织太少无法进行相关分子检测。 展开更多
关键词 殊染色 石蜡包埋切片 临床病理诊断 荧光定量聚合反应 甲醛固定 异性炎症 结核病诊断 结核分枝杆菌
在线阅读 下载PDF
棉花甲基化酶基因COMT和CCoAOMT的组织特异性表达分析 被引量:11
14
作者 吕萌 倪志勇 +3 位作者 王娟 李波 罗淑萍 范玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期713-719,共7页
本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(... 本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(根、茎、叶、子叶、花瓣、雄蕊、胚珠)中都有表达,其中COMT1和CCoAOMT1在各组织中的表达趋势类似,COMT2,COMT3和CCoAOMT2表达趋势各异。在5~25d的棉纤维发育过程中,COMT1和COMT3表达稳定,COMT2表达量逐渐增加。而CCoAOMT基因家族的2个基因的表达量变化相对明显,CCoAOMT1在25d出现表达高峰,CCoAOMT2则在10d和15d呈现高表达量。本研究表明甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在棉花的根,茎等维管组织中具有相对一致的高表达量,而在其他组织和发育纤维中则呈现出明显的组织特异性和纤维发育时期特异性。 展开更多
关键词 陆地棉 咖啡酸-O-甲基转移(COMT) 咖啡酰辅A-O-甲基转移(CCoAOMT) 反转录-聚合反应(RT-PCR) 组织异性表达
在线阅读 下载PDF
聚合酶链式反应检测猪细小病毒方法的研究 被引量:7
15
作者 戎伟 杨润德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期465-467,共3页
本研究依据编码猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,合成了一对寡核苷酸引物,通过减少病毒核酸的提取时间、费用及优化聚合酶链式反应(PCR)的条件,成功地从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中扩增出预期的158bp片段,经EcoRⅠ酶切鉴定,证实了该扩... 本研究依据编码猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,合成了一对寡核苷酸引物,通过减少病毒核酸的提取时间、费用及优化聚合酶链式反应(PCR)的条件,成功地从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中扩增出预期的158bp片段,经EcoRⅠ酶切鉴定,证实了该扩增片段的特异性。经敏感性试验测定,PCR的最低检出量为0 008病毒血凝(HA)单位。这些结果表明本试验建立的PCR对PPV的检测人有快速、简便、经济、灵敏度高和特异性强的特点。 展开更多
关键词 聚合反应 异性 PCR 病毒核酸 血凝 HA 感染 猪细小病毒 PPV 扩增片段
在线阅读 下载PDF
逆转录-聚合酶链反应检测鼠肝炎病毒方法的建立 被引量:4
16
作者 姚玉霞 丛斌 +2 位作者 彭郁葱 尤红煜 刘福英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第2期13-17,共5页
建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒(MHV),采用MHV-3,MHV-A59病毒株感染DBT细胞,37℃培养,待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守... 建立特异、灵敏的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,结合碱性磷酸酶标记的探针杂交检测鼠肝炎病毒(MHV),采用MHV-3,MHV-A59病毒株感染DBT细胞,37℃培养,待细胞出现病变时收集提取病毒RNA。依据MHV基因序列设计一对高度保守区特异性引物,进行RT-PCR扩增,结果可见147bp的鼠肝炎病毒产物特异扩增带。敏感性实验检测到10pg的鼠肝炎病毒RNA,同时用ELISA方法对照。结果提示应用RT—PCR技术结合探针杂交检测鼠肝炎病毒。具有简便、快速、灵敏等优势。本研究在国内尚未见报道。 展开更多
关键词 鼠肝 肝炎病毒 探针杂交 逆转录-聚合反应 RT-PCR 扩增 RNA 异性引物 病毒株 病变
全文增补中
转基因玉米59122品系的特异性检测 被引量:8
17
作者 许文涛 杨蓉 +4 位作者 陆姣 张南 罗云波 何景 黄昆仑 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期139-142,共4页
使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终... 使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因玉米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间。以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性。本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质量浓度为1ng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数。因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法。 展开更多
关键词 基因作物 品系异性检测 半巢式聚合反应 反向聚合反应 二重聚合反应
在线阅读 下载PDF
皖籍汉族人寻常型银屑病与HLA-Cw*0602等位基因的关联研究 被引量:7
18
作者 张安平 朱文元 张学军 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期207-209,共3页
为探讨皖籍汉族人寻常型银屑病(PV)与HLA-Cw0602等位基因的关联性,运用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法,检测了安徽籍汉族人166例PV患者HLA-Cw0602等位基因频率,分析了携带该等位基因的PV患者与其家族史的相互关系,并与248例健... 为探讨皖籍汉族人寻常型银屑病(PV)与HLA-Cw0602等位基因的关联性,运用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法,检测了安徽籍汉族人166例PV患者HLA-Cw0602等位基因频率,分析了携带该等位基因的PV患者与其家族史的相互关系,并与248例健康对照相比较。结果:病例组HLA-Cw0602等位基因频率较对照组显著升高(17.9%vs5.4%,OR=4.13,95%可信限2.38~7.16,P<0.001),且无性别差异;携带HLA-Cw0602等位基因的PV患者发病年龄早于不具有该等位基因的PV患者;有PV家族史患者携带HLA-Cw0602等位基因的频率显著高于无PV家族史患者(37.4%vs11.5%,OR=5.62,95%可信限2.54~12.57,P<0.001)。表明皖籍汉族人PV与HLA-Cw0602等位基因高度关联,且携带该等位基因的PV患者易发生早发型(发病年龄<40岁)银屑病,并有家族倾向性。 展开更多
关键词 银屑病 寻常型 抗原 人类白细胞 聚合反应 序列异性引物 等位基因
在线阅读 下载PDF
用聚合酶链反应检测火鸡枝原体
19
作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 1994年第9期3-3,共1页
美国Shaohua Zhao等人研制用聚合酶链反应(PCR)检测火鸡分枝杆菌(MM)。根据MM种特异性重组株P<sup>MM·2</sup>的DNA顺序合成了一对32 基引物,用该引物扩增约150bp的靶DNA进行MM—PCR。用58~61℃的温度退火其特异... 美国Shaohua Zhao等人研制用聚合酶链反应(PCR)检测火鸡分枝杆菌(MM)。根据MM种特异性重组株P<sup>MM·2</sup>的DNA顺序合成了一对32 基引物,用该引物扩增约150bp的靶DNA进行MM—PCR。用58~61℃的温度退火其特异性不受损失。 展开更多
关键词 聚合反应 引物扩增 DNA 异性 原体 比用 斑点印迹
在线阅读 下载PDF
HLA-A~*02等位基因分型技术及汉族HLA-A~*02多态性研究 被引量:4
20
作者 任素萍 孔繁华 +2 位作者 金荔 陈兴国 屠敏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期180-184,共5页
建立高分辨率的套式PCR-SSP,对17个HLA-A*02等位基因分型。利用国际标准分型细胞进行特异性鉴定,并在54例A*02阳性的无血缘关系汉族健康人中应用。共检测到5个A*02亚型,显示出较高多态性:其中A*02... 建立高分辨率的套式PCR-SSP,对17个HLA-A*02等位基因分型。利用国际标准分型细胞进行特异性鉴定,并在54例A*02阳性的无血缘关系汉族健康人中应用。共检测到5个A*02亚型,显示出较高多态性:其中A*0211(n=2)首次在东方人群检测到;A*0201频率最高,占有48.2%;其余依次为A*0206、A*0207和A*0203。套式PCR-SSP既适用于移植供体选择,又可用于人类进化研究。 展开更多
关键词 HLA-A抗原 等位基因 聚合反应 遗传多态性
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 9 下一页 到第
使用帮助 返回顶部