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不同诱导培养条件对重组绵羊β_2-AR第二细胞外环在大肠杆菌中表达的影响
被引量：
2
1
作者
陈小平
张慧玲
+2 位作者
杨斌
韩冰
陈勇
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期1345-1350,共6页
【目的和方法】研究对不同诱导时间、诱导剂IPTG终浓度、培养温度和振荡培养箱转速等4个诱导培养条件对绵羊β2-肾上腺素能受体（β2-adrenoceptor,β2-AR）第二细胞外环重组质粒pET32C-AR/Se在大肠杆菌BL21（DE3）中表达水平的影响进...
【目的和方法】研究对不同诱导时间、诱导剂IPTG终浓度、培养温度和振荡培养箱转速等4个诱导培养条件对绵羊β2-肾上腺素能受体（β2-adrenoceptor,β2-AR）第二细胞外环重组质粒pET32C-AR/Se在大肠杆菌BL21（DE3）中表达水平的影响进行了研究,以筛选其最佳培养条件。【结果】随着IPTG诱导时间的延长,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量逐渐增加,在2 h时相对表达量达到最大值,为菌体总蛋白的30.1%。IPTG终浓度在0.01~2 mmol/L时,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量水平均在27%~30%;当IPTG终浓度为0.01 mmol/L时,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的30.5%。在设置的4个诱导温度中,25℃时重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的35.5%。在振荡培养箱不同转速条件下,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量在33%~40%波动;在200 r/min时,相对表达水平最高,为细菌总蛋白的40.0%。【结论】绵羊β2-AR第二细胞外环基因在大肠杆菌中的表达最佳条件为：重组菌株在LB液体培养基中生长至OD6000.5左右时,加入IPTG至终浓度0.01mmol/L,于25℃、200 r/min诱导120 min。
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关键词
绵羊
Β2-肾上腺素能受体
第二细胞外环
诱导表达
大肠杆菌
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职称材料
题名
不同诱导培养条件对重组绵羊β_2-AR第二细胞外环在大肠杆菌中表达的影响
被引量：
2
1
作者
陈小平
张慧玲
杨斌
韩冰
陈勇
机构
新疆农业大学动物营养实验室
出处
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期1345-1350,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30860195)
新疆维吾尔自治区高校科研计划项目(XJEDU2007I18)
文摘
【目的和方法】研究对不同诱导时间、诱导剂IPTG终浓度、培养温度和振荡培养箱转速等4个诱导培养条件对绵羊β2-肾上腺素能受体（β2-adrenoceptor,β2-AR）第二细胞外环重组质粒pET32C-AR/Se在大肠杆菌BL21（DE3）中表达水平的影响进行了研究,以筛选其最佳培养条件。【结果】随着IPTG诱导时间的延长,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量逐渐增加,在2 h时相对表达量达到最大值,为菌体总蛋白的30.1%。IPTG终浓度在0.01~2 mmol/L时,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量水平均在27%~30%;当IPTG终浓度为0.01 mmol/L时,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的30.5%。在设置的4个诱导温度中,25℃时重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的35.5%。在振荡培养箱不同转速条件下,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量在33%~40%波动;在200 r/min时,相对表达水平最高,为细菌总蛋白的40.0%。【结论】绵羊β2-AR第二细胞外环基因在大肠杆菌中的表达最佳条件为：重组菌株在LB液体培养基中生长至OD6000.5左右时,加入IPTG至终浓度0.01mmol/L,于25℃、200 r/min诱导120 min。
关键词
绵羊
Β2-肾上腺素能受体
第二细胞外环
诱导表达
大肠杆菌
Keywords
sheep
β2-adrenoceptor
the second extracellular loop
induced expression
E.coli
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
S826 [农业科学—畜牧学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
不同诱导培养条件对重组绵羊β_2-AR第二细胞外环在大肠杆菌中表达的影响
陈小平
张慧玲
杨斌
韩冰
陈勇
《新疆农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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职称材料
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