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端粒重复序列扩增-银染色法用于端粒酶活性测定的研究 被引量:12
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作者 虞伟 谈华 +1 位作者 武建国 季洪爱 《医学研究生学报》 CAS 2000年第2期96-98,共3页
目的 :建立端粒重复序列扩增 (TRAP) -银染色技术 ,探讨端粒酶活性检测在肿瘤诊断中的意义。 方法 :用裂解液提取组织细胞中的端粒酶模板 ,在特异引物作用下进行 PCR扩增 ,所得产物用氯仿∶异戊醇 (2 4∶ 1)处理浓缩 ,作聚丙稀酰胺凝... 目的 :建立端粒重复序列扩增 (TRAP) -银染色技术 ,探讨端粒酶活性检测在肿瘤诊断中的意义。 方法 :用裂解液提取组织细胞中的端粒酶模板 ,在特异引物作用下进行 PCR扩增 ,所得产物用氯仿∶异戊醇 (2 4∶ 1)处理浓缩 ,作聚丙稀酰胺凝胶垂直板电泳 ,经硝酸银染色分析端粒酶活性。 结果 :TRAP-银染色法能准确特异地检测小鼠骨髓瘤细胞 (SP2 / 0 )的端粒酶活性 ,灵敏度可达 1× 10 2个细胞。端粒酶阳性率在 2 3例各种恶性肿瘤组织中为 86 .9% (2 0 / 2 3) ,而在 19例炎性包块与良性增生组织为 5 .3% (1/ 19) ,5例正常组织中未发现有端粒酶活性。 结论 :TRAP-银染色法简便快速、具有较好的测定敏感度与重复性 ,对临床恶性肿瘤疾病的诊断具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 端粒 端粒重复序列扩增-银染色 肿瘤 诊断
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INF-γ和TGF-β_1对视网膜色素上皮细胞端粒酶活性的影响 被引量:4
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作者 赵宏 刘苏冰 +1 位作者 左志高 朱晓红 《眼科新进展》 CAS 2003年第6期409-411,共3页
目的 探讨不同浓度的干扰素 γ(interferon γ ,INF γ)和转化生长因子 β1(trans forminggrowthfactor β1,TGF β1)对人视网膜色素上皮 (RPE)细胞端粒酶活性的影响。方法 使用不同浓度的INF γ和TGF β1处理RPE细胞 2 4h后 ,采用端... 目的 探讨不同浓度的干扰素 γ(interferon γ ,INF γ)和转化生长因子 β1(trans forminggrowthfactor β1,TGF β1)对人视网膜色素上皮 (RPE)细胞端粒酶活性的影响。方法 使用不同浓度的INF γ和TGF β1处理RPE细胞 2 4h后 ,采用端粒重复序列扩增法定性、定量检测上述细胞因子作用下的RPE细胞端粒酶活性。结果 随着上述细胞因子浓度的增加 ,RPE细胞端粒酶活性逐渐降低 ,且呈剂量依赖性 ,2种细胞因子具有协同作用。结论 INF γ和TGF β1对RPE细胞端粒酶活性具有抑制作用 ,细胞因子有可能成为治疗增生性玻璃体视网膜病变的新靶点。 展开更多
关键词 转化生长因子-β1 干扰素-Γ 视网膜色素上皮细胞 端粒重复序列
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端粒酶活性测定在膀胱癌诊断中的作用 被引量:2
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作者 魏武 葛京平 +4 位作者 虞伟 高建平 马宏青 周文泉 薛松 《医学研究生学报》 CAS 2002年第4期301-303,共3页
目的 :评估端粒酶活性测定对膀胱癌诊断的临床意义。 方法 :采用端粒重复序列扩增 银染色法 ,对 5 4例膀胱癌组织及尿沉渣进行端粒酶活性测定 ,并与对照组及尿脱落细胞病理学检查进行比较。 结果 :组织端粒酶活性的阳性率达 89% ;尿... 目的 :评估端粒酶活性测定对膀胱癌诊断的临床意义。 方法 :采用端粒重复序列扩增 银染色法 ,对 5 4例膀胱癌组织及尿沉渣进行端粒酶活性测定 ,并与对照组及尿脱落细胞病理学检查进行比较。 结果 :组织端粒酶活性的阳性率达 89% ;尿沉渣的阳性率达 81% ,而尿脱落细胞学检查的阳性率为 46 %。尿端粒酶活性明显高于尿脱落细胞病理学检查 ,尤其在肿瘤早期差异更为显著。 结论 :组织端粒酶活性测定的临床意义尚有待进一步研究 ;而尿沉渣端粒酶活性测定阳性率高、特异性好 ,且各级膀胱癌之间无明显差异 ,可以替代尿脱落细胞病理学检查 。 展开更多
关键词 端粒酶活性 诊断 端粒 膀胱癌 端粒重复序列扩增-银染色
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上皮性卵巢肿瘤端粒酶活性及其各亚单位基因表达的研究 被引量:2
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作者 刘敏 纪新强 +1 位作者 罗兵 刘付敏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期461-465,共5页
目的:探讨端粒酶及其亚单位(hTERT、TP1、hTR)在卵巢癌发生和发展中的作用,研究端粒酶活性与各亚单位表达的相关性。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测66例卵巢上皮性肿瘤及1... 目的:探讨端粒酶及其亚单位(hTERT、TP1、hTR)在卵巢癌发生和发展中的作用,研究端粒酶活性与各亚单位表达的相关性。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术检测66例卵巢上皮性肿瘤及10例正常卵巢组织端粒酶不同亚单位基因的表达情况,应用端粒重复序列扩增技术(telomeraserepeatamplificationprotocol,TRAP)检测其中45例卵巢上皮性肿瘤及9例正常卵巢组织端粒酶活性。结果:1)恶性、交界性卵巢肿瘤组织中端粒酶阳性检出率分别为83.33%(25/30)、71.43%(5/7),两组间无显著性差异(P>0.05),而良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢上皮中未检测到端粒酶活性,与前两组之间均有显著差异(P<0.001);2)RT-PCR定性检测发现hTR和TP1mRNA在检测的各组组织中均有表达,而hTERTmRNA主要在上皮性卵巢癌和交界性卵巢肿瘤中表达,二者间hTERTmRNA表达的差别无统计学意义(P>0.05),而与良性及正常组织hTERT表达有显著差异(P<0.001);3)端粒酶活性与hTERT亚单位表达明显相关(P<0.001),而与hTR和TP1亚单位表达无明显相关性(P>0.05)。结论:端粒酶与卵巢癌发生发展过程密切相关;hTERT表达与端粒酶活性密切相关,并可能参与端粒酶的活性调节,hTERT的表达有望成为上皮性卵巢癌的诊断指标。 展开更多
关键词 上皮性卵巢肿瘤 端粒 端粒酶亚单位 逆转录-聚合酶链反应 RT—PCR 端粒重复序列技术 TRAP
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