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重组融合人血清白蛋白-人白介素-2 C125A突变体在毕赤酵母中的表达
被引量：
13
1
作者
金光泽
段作营
+2 位作者
张莲芬
金坚
李华钟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期595-601,共7页
构建编码人血清白蛋白-人白介素-2 C125A的重组表达质粒,在Pichia pastorisGS115中表达,获得具有较高IL-2活性的融合蛋白。设计并合成符合P.pastoris密码子偏好,且含有C125A突变的IL-2编码基因IL-2m,通过酶切连接方法将其与人血清白蛋白...
构建编码人血清白蛋白-人白介素-2 C125A的重组表达质粒,在Pichia pastorisGS115中表达,获得具有较高IL-2活性的融合蛋白。设计并合成符合P.pastoris密码子偏好,且含有C125A突变的IL-2编码基因IL-2m,通过酶切连接方法将其与人血清白蛋白(HSA)的编码基因连接为融合蛋白HSA-IL2m的编码基因。克隆到表达质粒pPIC9K中,电击转化P.pastorisGS115感受态细胞,获得重组P.pastorisGS115/pPHIm基因工程菌。摇瓶发酵获得分泌表达产物。结果:Western blot鉴定结果显示该融合蛋白与IL-2、HSA的抗体都能发生免疫反应。经脱盐、冻干制备的粗蛋白的IL-2生物学活性为1.51×10^(6)IU/mg。结论:在P.pastorisGS115中成功表达了具有人白介素-2生物学活性的HSA-IL2m融合蛋白。
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关键词
突变型人白介素-2
人血清白蛋白
毕赤酵母
融合蛋白
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职称材料
题名
重组融合人血清白蛋白-人白介素-2 C125A突变体在毕赤酵母中的表达
被引量：
13
1
作者
金光泽
段作营
张莲芬
金坚
李华钟
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学医药学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期595-601,共7页
基金
国家自然科学基金项目(30970029)
江苏省产学研联合创新资金计划项目(BY2009110)
文摘
构建编码人血清白蛋白-人白介素-2 C125A的重组表达质粒,在Pichia pastorisGS115中表达,获得具有较高IL-2活性的融合蛋白。设计并合成符合P.pastoris密码子偏好,且含有C125A突变的IL-2编码基因IL-2m,通过酶切连接方法将其与人血清白蛋白(HSA)的编码基因连接为融合蛋白HSA-IL2m的编码基因。克隆到表达质粒pPIC9K中,电击转化P.pastorisGS115感受态细胞,获得重组P.pastorisGS115/pPHIm基因工程菌。摇瓶发酵获得分泌表达产物。结果:Western blot鉴定结果显示该融合蛋白与IL-2、HSA的抗体都能发生免疫反应。经脱盐、冻干制备的粗蛋白的IL-2生物学活性为1.51×10^(6)IU/mg。结论:在P.pastorisGS115中成功表达了具有人白介素-2生物学活性的HSA-IL2m融合蛋白。
关键词
突变型人白介素-2
人血清白蛋白
毕赤酵母
融合蛋白
Keywords
mutant Human interleukin
-
2
Human serum album
Pichia pastoris
fusion protein
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组融合人血清白蛋白-人白介素-2 C125A突变体在毕赤酵母中的表达
金光泽
段作营
张莲芬
金坚
李华钟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
13
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