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烟草花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达
被引量:
3
1
作者
陈青
薛朝阳
+2 位作者
吴俊杰
凌建群
周雪平
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期119-123,共5页
根据烟草花叶病毒蚕豆株系 (TMV- B)的已知序列合成引物 ,经 PCR扩增获得 TMV- B的移动蛋白 (MP)基因 .该基因测序验证后 ,分别以正、反向克隆到植物表达载体 p BI12 1中 ,并置于 Ca MV35S启动子控制之下 ,通过三亲交配及叶盘转化 ,将 M...
根据烟草花叶病毒蚕豆株系 (TMV- B)的已知序列合成引物 ,经 PCR扩增获得 TMV- B的移动蛋白 (MP)基因 .该基因测序验证后 ,分别以正、反向克隆到植物表达载体 p BI12 1中 ,并置于 Ca MV35S启动子控制之下 ,通过三亲交配及叶盘转化 ,将 MP基因导入烟草 .经卡那霉素抗性筛选 ,PCR扩增 ,Southern点杂交 ,Northern点杂交及 Western blot检测 ,获得了正义表达 MP基因及反义表达 MP基因的转基因烟草 ,分别命名为 p TMP(+ )烟草和 p TMP(- )
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关键词
烟草花叶病毒
移动蛋白基因
转
基因
基因
表达
烟草
互作机制
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职称材料
广东烟草花叶病毒移动蛋白基因的cDNA克隆和酶切鉴定
被引量:
2
2
作者
王得元
刘志昕
+3 位作者
潘俊松
王鸣
郑学勤
王西雨
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
1998年第3期334-338,共5页
根据已报道的烟草花叶病毒移动蛋白基因序列,设计合成一对特异性引物。以广东TMV株系RNA为模板,用AMV反转录酶反转录合成cDNA第一链;在复性温度51℃条件下进行PCR扩增,获得了一条0.8Kb的特异扩增产物,与已...
根据已报道的烟草花叶病毒移动蛋白基因序列,设计合成一对特异性引物。以广东TMV株系RNA为模板,用AMV反转录酶反转录合成cDNA第一链;在复性温度51℃条件下进行PCR扩增,获得了一条0.8Kb的特异扩增产物,与已发表的TMVMP基因编码区803bp大小相近;并将之克隆于pBluescriptⅡSK(+)质粒。限制性内切酶酶切分析表明,本研究筛选到的是含TMVMPcDNA的正向插入组质粒。
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关键词
烟草花叶病毒
移动蛋白基因
CDNA克隆
酶切分析
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职称材料
烟草花叶病毒蚕豆分离物移动蛋白基因克隆及序列分析
被引量:
3
3
作者
陈青
周雪平
+1 位作者
薛朝阳
李德葆
《浙江农业大学学报》
CSCD
北大核心
1999年第3期239-242,共4页
根据已报道的TMV U1株系(TMV-U1)的序列设计了特异性引物,利用RT-PCR技术,从烟 草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)上扩增移动蛋白(MP)基因及其邻近序列。将此cDNA片段克隆于 pBluscript SK...
根据已报道的TMV U1株系(TMV-U1)的序列设计了特异性引物,利用RT-PCR技术,从烟 草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)上扩增移动蛋白(MP)基因及其邻近序列。将此cDNA片段克隆于 pBluscript SK质粒上,进行测序分析。结果表明:MP基因由807个核苷酸组成,编码268个氨基酸。与 TMV-U1的MP基因序列比较,核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为99.01%和 98.89%。与TMV-Yu的MP基因序列比较,同源性分别为98.14%和98.89%。说明TMV的MP基因 在不同株系中是非常保守的。
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关键词
烟草
花叶病毒
移动蛋白基因
克隆
蚕豆分离物
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职称材料
鸡蛋花花叶病毒3’端序列的克隆与分析
4
作者
邓晓东
费小雯
+1 位作者
黄俊生
郑学勤
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
2000年第3期185-192,共8页
根据烟草花叶病毒组(Tobamoviruses)3’端非编码区保守区域,人工合成下游引物P1,P2,P3,分别以这些引物引导在反转录酶作用下合成双链 cDNA,并克隆到 pBS载体上。Hind Ⅲ+ PstⅠ双酶切分析重...
根据烟草花叶病毒组(Tobamoviruses)3’端非编码区保守区域,人工合成下游引物P1,P2,P3,分别以这些引物引导在反转录酶作用下合成双链 cDNA,并克隆到 pBS载体上。Hind Ⅲ+ PstⅠ双酶切分析重组稿子后,得到 15个阳性重组子,其中重组子 pBF3含有 2 432 bp外源 DNA。序列分析结果表明:该 2 432bp的序列含 2个开放读框,即鸡蛋花花叶病毒移动蛋白基因序列和外壳蛋白基因序列。移动蛋白基因序列起始于806位ATG,中止于 1576位TAG。推导的氨基酸序列共256个氨基酸,分子量为28.5 kDa。外壳蛋白基因序列起始于 1635位ATG,中止于 2 158位TAA。推导的氨基酸序列共 174个氨基酸,分子量为19.4 kDa.此外该片段还包含部分180 kDa蛋白和全部3’端非编码区核苷酸序列。
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关键词
鸡蛋花花叶病毒
移动蛋白基因
序列分析
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职称材料
美国农业部提出新的遗传工程生物管理规则
5
作者
孙雷心
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1996年第6期17-19,共3页
美国农业部动植物健康监察局(APHIS)新提出的一项规则将简化引入遗传工程生物、报告在通告条件下进行田间试验、以及申请确定非管制状态的程序。 提出的这项修正案的作用是:(1)扩展生物引种范围,即在通告程序和缩减特定管理必备条件的...
美国农业部动植物健康监察局(APHIS)新提出的一项规则将简化引入遗传工程生物、报告在通告条件下进行田间试验、以及申请确定非管制状态的程序。 提出的这项修正案的作用是:(1)扩展生物引种范围,即在通告程序和缩减特定管理必备条件的情况下,
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关键词
田间试验
遗传工程
通告程序
美国农业部
非管制
移动蛋白基因
植物病毒
转
基因
植物
数据报告
植物品种
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职称材料
题名
烟草花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达
被引量:
3
1
作者
陈青
薛朝阳
吴俊杰
凌建群
周雪平
机构
浙江大学生物技术研究所
出处
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期119-123,共5页
基金
国家自然科学基金! ( 3980 0 0 0 4)
浙江省青年科技人才专项资金及教育部"跨世纪优秀人才培养计划"基金资助项目
文摘
根据烟草花叶病毒蚕豆株系 (TMV- B)的已知序列合成引物 ,经 PCR扩增获得 TMV- B的移动蛋白 (MP)基因 .该基因测序验证后 ,分别以正、反向克隆到植物表达载体 p BI12 1中 ,并置于 Ca MV35S启动子控制之下 ,通过三亲交配及叶盘转化 ,将 MP基因导入烟草 .经卡那霉素抗性筛选 ,PCR扩增 ,Southern点杂交 ,Northern点杂交及 Western blot检测 ,获得了正义表达 MP基因及反义表达 MP基因的转基因烟草 ,分别命名为 p TMP(+ )烟草和 p TMP(- )
关键词
烟草花叶病毒
移动蛋白基因
转
基因
基因
表达
烟草
互作机制
Keywords
tobacco mosaic virus
movement protein
transgenic tobacco
expression
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
广东烟草花叶病毒移动蛋白基因的cDNA克隆和酶切鉴定
被引量:
2
2
作者
王得元
刘志昕
潘俊松
王鸣
郑学勤
王西雨
机构
广东省农业科学院蔬菜研究所
热带作物生物技术国家重点实验室
西北农业大学园艺系
河南省南阳市园林处
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
1998年第3期334-338,共5页
基金
热带作物生物技术国家重点实验室开放课题资助
文摘
根据已报道的烟草花叶病毒移动蛋白基因序列,设计合成一对特异性引物。以广东TMV株系RNA为模板,用AMV反转录酶反转录合成cDNA第一链;在复性温度51℃条件下进行PCR扩增,获得了一条0.8Kb的特异扩增产物,与已发表的TMVMP基因编码区803bp大小相近;并将之克隆于pBluescriptⅡSK(+)质粒。限制性内切酶酶切分析表明,本研究筛选到的是含TMVMPcDNA的正向插入组质粒。
关键词
烟草花叶病毒
移动蛋白基因
CDNA克隆
酶切分析
Keywords
TMV
movement protein
cloning
restriction enzyme-digestion analysis
分类号
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
烟草花叶病毒蚕豆分离物移动蛋白基因克隆及序列分析
被引量:
3
3
作者
陈青
周雪平
薛朝阳
李德葆
机构
浙江大学生物技术研究所
出处
《浙江农业大学学报》
CSCD
北大核心
1999年第3期239-242,共4页
基金
国家自然科学基金!39870499
浙江省青年科技人才专项基金
教育部"跨世纪优秀人才培训计划"基金
文摘
根据已报道的TMV U1株系(TMV-U1)的序列设计了特异性引物,利用RT-PCR技术,从烟 草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)上扩增移动蛋白(MP)基因及其邻近序列。将此cDNA片段克隆于 pBluscript SK质粒上,进行测序分析。结果表明:MP基因由807个核苷酸组成,编码268个氨基酸。与 TMV-U1的MP基因序列比较,核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为99.01%和 98.89%。与TMV-Yu的MP基因序列比较,同源性分别为98.14%和98.89%。说明TMV的MP基因 在不同株系中是非常保守的。
关键词
烟草
花叶病毒
移动蛋白基因
克隆
蚕豆分离物
Keywords
tobacco mosaic virus
movement protein gene
sequence analysis
分类号
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
鸡蛋花花叶病毒3’端序列的克隆与分析
4
作者
邓晓东
费小雯
黄俊生
郑学勤
机构
中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室
出处
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
2000年第3期185-192,共8页
文摘
根据烟草花叶病毒组(Tobamoviruses)3’端非编码区保守区域,人工合成下游引物P1,P2,P3,分别以这些引物引导在反转录酶作用下合成双链 cDNA,并克隆到 pBS载体上。Hind Ⅲ+ PstⅠ双酶切分析重组稿子后,得到 15个阳性重组子,其中重组子 pBF3含有 2 432 bp外源 DNA。序列分析结果表明:该 2 432bp的序列含 2个开放读框,即鸡蛋花花叶病毒移动蛋白基因序列和外壳蛋白基因序列。移动蛋白基因序列起始于806位ATG,中止于 1576位TAG。推导的氨基酸序列共256个氨基酸,分子量为28.5 kDa。外壳蛋白基因序列起始于 1635位ATG,中止于 2 158位TAA。推导的氨基酸序列共 174个氨基酸,分子量为19.4 kDa.此外该片段还包含部分180 kDa蛋白和全部3’端非编码区核苷酸序列。
关键词
鸡蛋花花叶病毒
移动蛋白基因
序列分析
Keywords
Frangipani mosaic virus, Movement protein gene, Coat protein gene, 3'-end non-coding regions, Sequence analysis
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
美国农业部提出新的遗传工程生物管理规则
5
作者
孙雷心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1996年第6期17-19,共3页
文摘
美国农业部动植物健康监察局(APHIS)新提出的一项规则将简化引入遗传工程生物、报告在通告条件下进行田间试验、以及申请确定非管制状态的程序。 提出的这项修正案的作用是:(1)扩展生物引种范围,即在通告程序和缩减特定管理必备条件的情况下,
关键词
田间试验
遗传工程
通告程序
美国农业部
非管制
移动蛋白基因
植物病毒
转
基因
植物
数据报告
植物品种
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
烟草花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达
陈青
薛朝阳
吴俊杰
凌建群
周雪平
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
在线阅读
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职称材料
2
广东烟草花叶病毒移动蛋白基因的cDNA克隆和酶切鉴定
王得元
刘志昕
潘俊松
王鸣
郑学勤
王西雨
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
1998
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
烟草花叶病毒蚕豆分离物移动蛋白基因克隆及序列分析
陈青
周雪平
薛朝阳
李德葆
《浙江农业大学学报》
CSCD
北大核心
1999
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
鸡蛋花花叶病毒3’端序列的克隆与分析
邓晓东
费小雯
黄俊生
郑学勤
《热带亚热带植物学报》
CAS
CSCD
2000
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
5
美国农业部提出新的遗传工程生物管理规则
孙雷心
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1996
0
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职称材料
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