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piggyBac转座子AgoPLE1.1在黑腹果蝇种系转化中的应用
1
作者
张浩淼
王晓芳
+4 位作者
罗光华
韩湘豫
王秋霞
韩召军
吴敏
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期676-681,共6页
【目的】通过检测黑腹果蝇Drosophila melanogaster中piggyBac(PB)转座子AgoPLE1.1的转化活性,明确AgoPLE1.1开发为昆虫转基因载体的潜力。【方法】构建AgoPLE1.1转座酶辅助质粒pAgoHsp和带有红色荧光标记的供体质粒pXLAgo-PUbDsRed,辅...
【目的】通过检测黑腹果蝇Drosophila melanogaster中piggyBac(PB)转座子AgoPLE1.1的转化活性,明确AgoPLE1.1开发为昆虫转基因载体的潜力。【方法】构建AgoPLE1.1转座酶辅助质粒pAgoHsp和带有红色荧光标记的供体质粒pXLAgo-PUbDsRed,辅助质粒和供体质粒以170 ng/μL∶400 ng/μL,90 ng/μL∶200 ng/μL和90 ng/μL∶100 ng/μL 3种不同的比例混合后分别注射新鲜的W1118黑腹果蝇胚胎,筛选注射后代中的转基因黑腹果蝇个体;利用Southern杂交验证转基因黑腹果蝇中AgoPLE1.1转座子的插入拷贝数;利用染色体步移技术克隆AgoPLE1.1插入位点旁侧序列,明确AgoPLE1.1转座子的转座特征。【结果】AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇中具有转化活性,转基因频率为1.32%~1.94%。Southern杂交结果显示,AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇中至少有6个插入位点。染色体步移法克隆了其中4个位点,分别位于黑腹果蝇的3R,3L,2L和X染色体,并且AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇染色体中的整合带有供体质粒的骨架。【结论】PB转座子AgoPLE1.1仅可以在黑腹果蝇中以较低的频率进行非精确的剪切和转座,不具有开发为新型昆虫转基因载体的潜力。
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关键词
黑腹果蝇
PIGGYBAC转座子
PB类似因子
种系转化
剪切
转座
在线阅读
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职称材料
转座元件mariner
被引量:
6
2
作者
张卉
王小珂
马世俊
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期756-762,共7页
自mariner转座元件在Drosophilamauritiana中首次发现至今已经在包括人类在内的多种生物体中证实了mariner及类mariner元件(MLEs)的存在。MLEs属于mariner/Tc1超家族 II型转座元件中分布最广、种类最多的超家族之一。MLEs的转座酶都具有...
自mariner转座元件在Drosophilamauritiana中首次发现至今已经在包括人类在内的多种生物体中证实了mariner及类mariner元件(MLEs)的存在。MLEs属于mariner/Tc1超家族 II型转座元件中分布最广、种类最多的超家族之一。MLEs的转座酶都具有"D,D(34)D"的结构,并能催化MLEs通过"剪切和粘贴"机制进行转座。它们的宿主广泛和多样,能够进行种系传递,这都表明MLEs的转座不需要宿主特异元件的参与。MLEs对多种生物尤其对脊椎动物的成功转化更支持了它们的不依赖宿主的转座机制,而且让人们看到了它们作为转基因载体的巨大潜能。
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关键词
MARINER
MLEs
转座元件
种系转化
转化
载体
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职称材料
动物遗传工程
3
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992年第3期81-84,共4页
关键词
转基因表达
转基因小鼠
启动子调控
转基因动物
基因克隆
动物遗传
种系转化
干扰素反应
编码基因
同源重组技术
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职称材料
题名
piggyBac转座子AgoPLE1.1在黑腹果蝇种系转化中的应用
1
作者
张浩淼
王晓芳
罗光华
韩湘豫
王秋霞
韩召军
吴敏
机构
南京农业大学植物保护学院
江苏省农业科学院植物保护研究所
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期676-681,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31301729)。
文摘
【目的】通过检测黑腹果蝇Drosophila melanogaster中piggyBac(PB)转座子AgoPLE1.1的转化活性,明确AgoPLE1.1开发为昆虫转基因载体的潜力。【方法】构建AgoPLE1.1转座酶辅助质粒pAgoHsp和带有红色荧光标记的供体质粒pXLAgo-PUbDsRed,辅助质粒和供体质粒以170 ng/μL∶400 ng/μL,90 ng/μL∶200 ng/μL和90 ng/μL∶100 ng/μL 3种不同的比例混合后分别注射新鲜的W1118黑腹果蝇胚胎,筛选注射后代中的转基因黑腹果蝇个体;利用Southern杂交验证转基因黑腹果蝇中AgoPLE1.1转座子的插入拷贝数;利用染色体步移技术克隆AgoPLE1.1插入位点旁侧序列,明确AgoPLE1.1转座子的转座特征。【结果】AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇中具有转化活性,转基因频率为1.32%~1.94%。Southern杂交结果显示,AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇中至少有6个插入位点。染色体步移法克隆了其中4个位点,分别位于黑腹果蝇的3R,3L,2L和X染色体,并且AgoPLE1.1转座子在黑腹果蝇染色体中的整合带有供体质粒的骨架。【结论】PB转座子AgoPLE1.1仅可以在黑腹果蝇中以较低的频率进行非精确的剪切和转座,不具有开发为新型昆虫转基因载体的潜力。
关键词
黑腹果蝇
PIGGYBAC转座子
PB类似因子
种系转化
剪切
转座
Keywords
Drosophila melanogaster
piggyBac transposon
piggyBac-like elements
germline transformation
excision
transposition
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
转座元件mariner
被引量:
6
2
作者
张卉
王小珂
马世俊
机构
北京实验动物研究中心
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期756-762,共7页
基金
863基金(2001AA213131)资助~~
文摘
自mariner转座元件在Drosophilamauritiana中首次发现至今已经在包括人类在内的多种生物体中证实了mariner及类mariner元件(MLEs)的存在。MLEs属于mariner/Tc1超家族 II型转座元件中分布最广、种类最多的超家族之一。MLEs的转座酶都具有"D,D(34)D"的结构,并能催化MLEs通过"剪切和粘贴"机制进行转座。它们的宿主广泛和多样,能够进行种系传递,这都表明MLEs的转座不需要宿主特异元件的参与。MLEs对多种生物尤其对脊椎动物的成功转化更支持了它们的不依赖宿主的转座机制,而且让人们看到了它们作为转基因载体的巨大潜能。
关键词
MARINER
MLEs
转座元件
种系转化
转化
载体
Keywords
mariner
MLEs
transposable element
germline transformation
transforming vector
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
动物遗传工程
3
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992年第3期81-84,共4页
关键词
转基因表达
转基因小鼠
启动子调控
转基因动物
基因克隆
动物遗传
种系转化
干扰素反应
编码基因
同源重组技术
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
piggyBac转座子AgoPLE1.1在黑腹果蝇种系转化中的应用
张浩淼
王晓芳
罗光华
韩湘豫
王秋霞
韩召军
吴敏
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
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职称材料
2
转座元件mariner
张卉
王小珂
马世俊
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2004
6
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职称材料
3
动物遗传工程
《生物技术通报》
CAS
CSCD
1992
0
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职称材料
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