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生长素合成关键酶基因iaaM种子特异表达载体的构建及转基因油菜的获得
被引量：
1
1
作者
赵珍
凌华
+5 位作者
田保明
廉玉利
李旭娇
邓云娟
范兴福
师恭曜
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2008年第9期39-44,共6页
生长素是重要的植物激素,它对植物的生长发育具有重要的调控作用,它能诱导营养物质向其含量高的部位运输。通过转基因技术提高内源生长素在油菜种子中的含量,诱导营养物质向种子运输,为提高油菜灌浆速度,增加产量提供了新的研究方向。i...
生长素是重要的植物激素,它对植物的生长发育具有重要的调控作用,它能诱导营养物质向其含量高的部位运输。通过转基因技术提高内源生长素在油菜种子中的含量,诱导营养物质向种子运输,为提高油菜灌浆速度,增加产量提供了新的研究方向。iaaM基因编码的色氨酸单加氧酶是催化色氨酸(Trp)转变为生长素(IAA)的关键酶,将iaaM基因与油菜(Brassica napusL.)种子发育早期特异性表达的储藏蛋白专一性启动子(Napin)融合并插入植物表达载体pCAMBIA3301中,构建iaaM基因的种子特异表达载体,并经农杆菌介导转化甘蓝型油菜。经PPT抗性筛选、GUS组织化学检测、PCR检测,初步证实外源基因已整合进油菜基因组,获得转基因植株。
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关键词
生长素
iaaM基因
种子特异表达载体
转化
甘蓝型油菜
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职称材料
重组人TNFR-Fc基因水稻种子特异表达载体构建
2
作者
段永波
赵丰兰
+4 位作者
姚磊
滕井通
盛玮
张爱民
薛建平
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期589-594,581,共7页
重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)在治疗系统性自身免疫疾病中有很好的功效。目前TNFR-Fc主要通过动物细胞系生产,高昂的成本限制了其大规模应用。使用水稻种子作为生物反应器有望大幅度降低TNFR-Fc的生产成本,提供优...
重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)在治疗系统性自身免疫疾病中有很好的功效。目前TNFR-Fc主要通过动物细胞系生产,高昂的成本限制了其大规模应用。使用水稻种子作为生物反应器有望大幅度降低TNFR-Fc的生产成本,提供优质足量的目标产品。为使TNFR-Fc基因能够在水稻中高效表达,该研究拟构建经水稻偏好密码优化的TNFR-Fc基因的种子特异表达载体。通过对水稻和人全基因组密码子使用偏好性进行比较分析并按照水稻最优密码对TNFR-Fc氨基酸序列进行逐一优化,命名为Rf TNFRFc,通过全基因合成法制备该基因片段;同时采用PCR法扩增水稻种子特异表达启动子Glu-4,构建种子特异表达启动子驱动的Rf TNFR-Fc基因表达载体。结果表明:水稻与人多数氨基酸中密码子使用偏好性较为一致,但在L、S、P、R这4种氨基酸的密码子使用偏好性差异较大,优化时对这些密码子进行逐一替换,优化后30.8%的氨基酸密码子发生了变化;PCR扩增获得种子特异启动子,并连接至p CAMBIA1381载体,同时将全基因合成法制备的Rf TNFR-Fc基因连入该载体,PCR、双酶切验证及测序分析表明载体成功构建。该研究构建的Rf TNFR-Fc基因种子特异表达载体,为在水稻种子中大规模生产TNFR-Fc奠定了基础。
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关键词
水稻
重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)
偏好密码优化
种子
特异
表达
载体
构建
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职称材料
种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建
被引量：
5
3
作者
张梦晗
谢伟红
+4 位作者
曾洪斌
徐超
李宏业
杨维东
刘洁生
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第1期63-67,共5页
[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a...
[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a亚基基因8SGα的启动子区域,基因组步移使用的引物根据绿豆8SGα的cDNA序列设计。[结果]通过3轮PCR的扩增,得到了472 bp的上游序列片段,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-GUS。[结论]研究结果可用于转化植物,并于转基因植物中分析启动表达的时空特异性及表达强度,并为植物种子生物反应器提供重要元件。
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关键词
启动子
PCR
基因组步移
绿豆8S球蛋白
种子特异表达载体
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职称材料
题名
生长素合成关键酶基因iaaM种子特异表达载体的构建及转基因油菜的获得
被引量：
1
1
作者
赵珍
凌华
田保明
廉玉利
李旭娇
邓云娟
范兴福
师恭曜
机构
郑州大学生物工程系
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2008年第9期39-44,共6页
基金
河南省重大攻关项目(072101110300)
河南省自然科学基金(0511030600)
文摘
生长素是重要的植物激素,它对植物的生长发育具有重要的调控作用,它能诱导营养物质向其含量高的部位运输。通过转基因技术提高内源生长素在油菜种子中的含量,诱导营养物质向种子运输,为提高油菜灌浆速度,增加产量提供了新的研究方向。iaaM基因编码的色氨酸单加氧酶是催化色氨酸(Trp)转变为生长素(IAA)的关键酶,将iaaM基因与油菜(Brassica napusL.)种子发育早期特异性表达的储藏蛋白专一性启动子(Napin)融合并插入植物表达载体pCAMBIA3301中,构建iaaM基因的种子特异表达载体,并经农杆菌介导转化甘蓝型油菜。经PPT抗性筛选、GUS组织化学检测、PCR检测,初步证实外源基因已整合进油菜基因组,获得转基因植株。
关键词
生长素
iaaM基因
种子特异表达载体
转化
甘蓝型油菜
Keywords
Auxin
IaaM gene
Seed-specific expression vector
Genetic transformation
Brassica napus L.
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
重组人TNFR-Fc基因水稻种子特异表达载体构建
2
作者
段永波
赵丰兰
姚磊
滕井通
盛玮
张爱民
薛建平
机构
淮北师范大学生命科学学院/资源植物生物学安徽省重点实验室
出处
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期589-594,581,共7页
基金
国家自然科学基金(31501368
81573518)
+3 种基金
安徽省自然科学基金(1408085MC58
1608085MC52)
安徽省教育厅省级高校自然科学基金重点项目和重大项目(KJ2014A226
KJ2015ZD35)~~
文摘
重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)在治疗系统性自身免疫疾病中有很好的功效。目前TNFR-Fc主要通过动物细胞系生产,高昂的成本限制了其大规模应用。使用水稻种子作为生物反应器有望大幅度降低TNFR-Fc的生产成本,提供优质足量的目标产品。为使TNFR-Fc基因能够在水稻中高效表达,该研究拟构建经水稻偏好密码优化的TNFR-Fc基因的种子特异表达载体。通过对水稻和人全基因组密码子使用偏好性进行比较分析并按照水稻最优密码对TNFR-Fc氨基酸序列进行逐一优化,命名为Rf TNFRFc,通过全基因合成法制备该基因片段;同时采用PCR法扩增水稻种子特异表达启动子Glu-4,构建种子特异表达启动子驱动的Rf TNFR-Fc基因表达载体。结果表明:水稻与人多数氨基酸中密码子使用偏好性较为一致,但在L、S、P、R这4种氨基酸的密码子使用偏好性差异较大,优化时对这些密码子进行逐一替换,优化后30.8%的氨基酸密码子发生了变化;PCR扩增获得种子特异启动子,并连接至p CAMBIA1381载体,同时将全基因合成法制备的Rf TNFR-Fc基因连入该载体,PCR、双酶切验证及测序分析表明载体成功构建。该研究构建的Rf TNFR-Fc基因种子特异表达载体,为在水稻种子中大规模生产TNFR-Fc奠定了基础。
关键词
水稻
重组人II型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)
偏好密码优化
种子
特异
表达
载体
构建
Keywords
Oryza sativa, recombinant human a receptor antibody-protein of tumor necorsis factor type ll fusion protein (TNFR-Fc) , preferred codon optimization, seed-specific expression, vector construction
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建
被引量：
5
3
作者
张梦晗
谢伟红
曾洪斌
徐超
李宏业
杨维东
刘洁生
机构
暨南大学生物工程学系
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010年第1期63-67,共5页
基金
广东省自然科学基金面上项目(9151063101000001)
国家大学生创新性实验计划项目(081055908)
文摘
[目的]启动子是植物基因工程中一个重要工具,对构建植物生物反应器有着重要意义。8S球蛋白是绿豆中含量最丰富的种子贮藏蛋白,因此,其调控序列可能提供了一个很好来源的种子特异性启动子。[方法]通过基因组步移技术克隆了绿豆8S球蛋白a亚基基因8SGα的启动子区域,基因组步移使用的引物根据绿豆8SGα的cDNA序列设计。[结果]通过3轮PCR的扩增,得到了472 bp的上游序列片段,构建了植物双元表达载体pBI-8SGα-GUS。[结论]研究结果可用于转化植物,并于转基因植物中分析启动表达的时空特异性及表达强度,并为植物种子生物反应器提供重要元件。
关键词
启动子
PCR
基因组步移
绿豆8S球蛋白
种子特异表达载体
Keywords
Promoter
PCR
Genome-walking
Vigna radiate 8S globulin
Seed-specific expression vector
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
生长素合成关键酶基因iaaM种子特异表达载体的构建及转基因油菜的获得
赵珍
凌华
田保明
廉玉利
李旭娇
邓云娟
范兴福
师恭曜
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
重组人TNFR-Fc基因水稻种子特异表达载体构建
段永波
赵丰兰
姚磊
滕井通
盛玮
张爱民
薛建平
《广西植物》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
种子特异启动子的克隆及植物表达载体构建
张梦晗
谢伟红
曾洪斌
徐超
李宏业
杨维东
刘洁生
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2010
5
在线阅读
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职称材料
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