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用RT-PCR检测海兰褐蛋鸡禽戊型肝炎病毒 被引量:3
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作者 杨树青 孙嘉 +2 位作者 孔祥伟 贠鲁祥 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1618-1622,共5页
为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份。提取RNA后,进行禽HEVORF2基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR)检测,阳性样品进行克隆... 为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份。提取RNA后,进行禽HEVORF2基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR)检测,阳性样品进行克隆测序。同时采集疑似HEV感染鸡的肝,在两周龄SPF鸡进行了人工接种试验。结果表明,来自海兰褐蛋鸡群的40份粪便和10份血浆样品中,27份粪便样品和4份血浆样品为禽HEV RNA阳性。随机选取两个阳性样品的序列进行分析,其与国内外参考序列相似性为78.1%~98.3%。进化树分析显示与中国、欧洲参考株在同一分支,属于禽HEV基因3型。人工接种试验结果显示,接种后14d的SPF鸡肝中均鉴定出HEV RNA阳性(4/4)。我国蛋鸡群存在基因3型禽HEV。本研究首次发现并报道国内蛋鸡存在禽HEV,这为进一步了解禽HEV在我国鸡群的流行状况及其危害提供了依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒(HEV) 海兰褐蛋鸡 大肝大脾病(BLS) 基因3
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禽戊型肝炎病毒组织切片免疫荧光检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 陈瑞爱 李延鹏 +2 位作者 同戈 郭凯 刘正伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1851-1857,共7页
为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白... 为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白的单因子血清具有良好的特异性,利用组织切片免疫荧光方法能够特异地检测禽HEV的感染,从而有效地区分HEV与易混淆的ALV、REV的感染。建立的鉴别诊断禽HEV的组织切片免疫荧光方法,可以有效地诊断禽HEV感染,给实验室诊断带来极大的方便。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 组织切片 免疫荧光 鉴别诊断
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陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测 被引量:3
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作者 拓晓玲 刘宝元 +3 位作者 陈宜阳 孙亚妮 赵钦 周恩民 《动物医学进展》 北大核心 2017年第7期120-123,共4页
2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和... 2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和粪便中的禽HEV RNA进行了实验室检测。ELISA检测结果发现,168份血清为禽HEV抗体阳性,阳性率为49.85%;套式RT-PCR检测结果发现,63份粪便为禽HEV RNA基因片段阳性,阳性率为23.51%。基因片段的序列同源性分析发现,杨凌地区的禽HEV分离株与国内的同源性为93.0%~99.2%;进化树分析表明,其与国内其他地区的分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 酶联免疫吸附试验 套式RT—PCR 序列分析
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我国部分地区禽戊型肝炎病毒分子流行病学分析 被引量:1
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作者 张翔 林婷婷 +9 位作者 刘丰波 宋姗姗 李彬 栾栋祖 王群义 刘平 刘红祥 马冬 任衍倍 刘东 《中国动物检疫》 CAS 2021年第3期1-4,共4页
为了解我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(avain hepatitis E virus,aHEV)的分子变异情况,对2018年从山东、河南、河北、辽宁、吉林、黑龙江、陕西、山西、江苏等地疑似aHEV感染鸡群中采集的679份肝脏、脾脏病料样品进行RT-PCR检测,从中选取PCR... 为了解我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(avain hepatitis E virus,aHEV)的分子变异情况,对2018年从山东、河南、河北、辽宁、吉林、黑龙江、陕西、山西、江苏等地疑似aHEV感染鸡群中采集的679份肝脏、脾脏病料样品进行RT-PCR检测,从中选取PCR阳性产物,对其ORF1基因进行序列测定与遗传进化分析。结果显示:从病料中检出阳性样品37份,阳性检出率为5.45%;选取的15个试验毒株之间的ORF1基因同源性为90.1%~100%,与目前报道的4种基因型同源性均小于90%,其中与基因1型的澳大利亚株和韩国株同源性为85.5%~89.0%,与基因2型的美国原型株和美国无毒株同源性为85.5%~88.2%,与基因3型的欧洲株和中国株同源性为86.3%~89.7%,与基因4型的匈牙利株和中国台湾株同源性为86.4%~88.5%。ORF1基因进化树分析发现,所分离的aHEV均属于戊型肝炎B种,不在目前所划分的基因型分支上,形成独立的基因分支,不属于已报道的4个基因型。结果表明,目前在我国流行的aHEV是一种新基因型病毒,这为我国aHEV分子流行病学分析提供了补充和依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 分子流行病学 ORF1基因 同源性
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4例禽戊型肝炎病例的实验室诊断及ORF2基因遗传进化分析 被引量:5
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作者 张翔 刘丰波 +8 位作者 马冬 宋姗姗 刘东 刘红祥 李彬 王群义 栾栋祖 刘平 邵三敏 《中国动物检疫》 CAS 2019年第8期80-84,共5页
本研究通过分子流行病学诊断技术,分别从山东、辽宁、吉林、陕西4个地区表现肝炎症状的病鸡中,采集肝脏和脾脏样品,利用RT-PCR方法,检测禽戊型肝炎病毒(aHEV),并对aHEV-ORF2基因片段进行测序,利用MegAlign进行同源性比较。结果显示:4个... 本研究通过分子流行病学诊断技术,分别从山东、辽宁、吉林、陕西4个地区表现肝炎症状的病鸡中,采集肝脏和脾脏样品,利用RT-PCR方法,检测禽戊型肝炎病毒(aHEV),并对aHEV-ORF2基因片段进行测序,利用MegAlign进行同源性比较。结果显示:4个鸡场的病鸡样品均为aHEV阳性,aHEV-ORF2基因序列间同源性为84.5%~94.5%,与已报道的4种基因型同源性均小于84.0%,其中与基因1型的澳大利亚株和韩国株同源性为81.6%~82.8%,与基因2型的美国原型株和美国无毒株同源性为80.9%~82.8%,与基因3型的欧洲株和中国株同源性为80.8%~82.5%,与基因4型的匈牙利株和中国台湾株同源性为81.4%~82.6%。ORF2基因进化树分析显示:4株aHEV均属于戊型肝炎B种,形成独立的基因分支,但不属于已报道的4个基因型,而在一个新型独立分支上,表明国内存在一种新基因型的aHEV流行。本研究为我国aHEV的进一步研究提供了基础和依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 ORF2基因 同源性
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