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血清4型禽腺病毒和禽戊型肝炎病毒共感染对SPF鸡胚及SPF鸡的致病性分析
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作者 侯力丹 迟增娜 +5 位作者 张亚文 薛麒 苏佳 吴华伟 赵鹏 杨汉春 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期29-35,共7页
此前有报道曾从不同肝脏损伤病例中鉴定到禽戊型肝炎病毒(aHEV)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的共感染,为进一步观察FAdV和aHEV在鸡体内共感染的致病情况,本研究分别将aHEV-YT和FAdV-4 GY单独或共同感染SPF鸡胚和雏鸡,观察不同感染情况对SP... 此前有报道曾从不同肝脏损伤病例中鉴定到禽戊型肝炎病毒(aHEV)与血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的共感染,为进一步观察FAdV和aHEV在鸡体内共感染的致病情况,本研究分别将aHEV-YT和FAdV-4 GY单独或共同感染SPF鸡胚和雏鸡,观察不同感染情况对SPF鸡胚孵化率、雏鸡排毒等方面的差异。结果显示:FAdV-4单感染、aHEV单感染和先后共感染鸡胚后,鸡胚出壳率分别为0、73.30%和40.00%;雏鸡感染实验则显示aHEV-YT单感染1日龄SPF鸡不致死,100 TCID50 FAdV-4 GY单感染对28日龄SPF鸡的死亡率为100.00%,而1日龄先感染aHEV-YT后再感染同等剂量FAdV-4 GY死亡率仅为25.00%。结果表明,aHEV与FAdV-4的共感染相比FAdV-4 GY单独感染均降低了致死率,这为进一步了解两者共感染致病特点与机制提供了一定参考。 展开更多
关键词 病毒 禽戊型肝炎病毒 共感染 SPF鸡胚 SPF鸡
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禽戊型肝炎病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
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作者 张玉倩 刘春红 +2 位作者 吕志航 廉春杨 张雪莲 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期225-231,共7页
为了针对禽戊型肝炎病毒(aHEV)建立一种快速、准确的抗体检测方法,以大肠杆菌原核表达系统表达的CaHEV-GDSZ01株的ORF2蛋白作为包被抗原,对相关反应条件进行优化后确定其最佳工作条件,以建立检测aHEV鸡血清抗体的间接ELISA方法,并对该... 为了针对禽戊型肝炎病毒(aHEV)建立一种快速、准确的抗体检测方法,以大肠杆菌原核表达系统表达的CaHEV-GDSZ01株的ORF2蛋白作为包被抗原,对相关反应条件进行优化后确定其最佳工作条件,以建立检测aHEV鸡血清抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,与Western Blot方法进行对比后,初步应用于检测鸡临床血清样本。结果显示,ORF2蛋白被成功表达、纯化,并经Western Blot试验证实,可与aHEV阳性鸡血清发生特异性反应,建立的ELISA的最佳反应条件为:ORF2蛋白以200 ng/孔4℃包被过夜(12 h),5%脱脂乳37℃封闭1~2 h,血清1∶1600稀释、室温孵育1 h,兔抗鸡IgY-HRP 1∶5000稀释、37℃孵育90 min,TMB底物37℃显色20 min后终止。该ELISA方法可检出稀释51200倍后的aHEV阳性血清,且不与NDV、AIV-H5、AIV-H9、ALV、REV和MDV等其他鸡源性病毒的阳性血清发生交叉反应;批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%,与Western Blot方法的总体符合率达95.12%。通过该方法检测广东不同地区养鸡场的临床血清样本,总阳性率达66.34%。成功建立了一种操作简便、有效,且特异性、灵敏性和重复性均良好的aHEV血清学检测方法,可为基层监测、防控aHEV的感染提供一定的技术支持。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 ORF2蛋白 间接ELISA 血清学检测 流行病学调查
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禽戊型肝炎病毒与鸡传染性贫血病毒早期共感染SPF鸡的致病性观察
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作者 张煜朵 张亚文 +3 位作者 王金金 常爽 王一新 赵鹏 《中国家禽》 北大核心 2025年第2期66-74,共9页
为研究禽戊型肝炎病毒(aHEV)与鸡传染性贫血病毒(CIAV)早期共感染的致病性,试验将aHEV与CIAV人工感染SPF鸡胚或雏鸡后,通过检测体重、死亡率、器官指数等多项指标研究两者早期共感染对SPF鸡的影响。结果显示:aHEV和CIAV共感染组死亡率最... 为研究禽戊型肝炎病毒(aHEV)与鸡传染性贫血病毒(CIAV)早期共感染的致病性,试验将aHEV与CIAV人工感染SPF鸡胚或雏鸡后,通过检测体重、死亡率、器官指数等多项指标研究两者早期共感染对SPF鸡的影响。结果显示:aHEV和CIAV共感染组死亡率最高,且在各统计时间点共感染组体重始终最低;aHEV与CIAV的早期共感染可显著加重肝脏的肿大和胸腺的萎缩,可促进CIAV在肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊以及血液中的复制,反之共感染也可促进aHEV在上述四种器官中的复制以及通过泄殖腔的排毒。研究表明,试验成功构建了aHEV与CIAV早期共感染动物模型,并证实其可加重对SPF鸡的致病性和免疫抑制,提示需要加强对aHEV与CIAV共感染的检测与净化。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 鸡传染性贫血病毒 共感染 致病性 免疫抑制
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禽戊型肝炎病毒CaHEV-GDSZ01株ORF3蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
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作者 张玉倩 李长乐 +2 位作者 吕志航 姚鑫炎 张雪莲 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期224-229,共6页
旨在对禽戊型肝炎病毒的ORF3蛋白进行原核表达,并制备其多克隆抗体,为进一步研究aHEV ORF3蛋白生物学功能新型疫苗提供生物材料。通过RT-PCR方法扩增CaHEV-GDSZ01株ORF3基因,连接pET-32a(+)表达载体以构建重组原核表达质粒,并转化BL21(D... 旨在对禽戊型肝炎病毒的ORF3蛋白进行原核表达,并制备其多克隆抗体,为进一步研究aHEV ORF3蛋白生物学功能新型疫苗提供生物材料。通过RT-PCR方法扩增CaHEV-GDSZ01株ORF3基因,连接pET-32a(+)表达载体以构建重组原核表达质粒,并转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达;利用SDS-PAGE凝胶电泳分析ORF3蛋白的表达形式后进行纯化,并免疫新西兰白兔以获得兔抗ORF3蛋白多克隆抗体,利用间接ELISA试验检测多克隆抗体的效价,利用Western Blot试验和间接免疫荧光试验(IFA)检测多克隆抗体特异性。结果显示,成功构建了pET-32a-ORF3重组原核表达质粒,并通过原核表达系统成功诱导表达了27 ku不可溶性的aHEV ORF3重组蛋白;Western Blot试验和IFA试验结果显示,制备的多克隆抗体可以特异性识别ORF3蛋白,ELISA结果显示,多克隆抗体效价为1∶51 200。成功表达CaHEV-GDSZ01株的ORF3蛋白,并制备了其多克隆抗体。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 多克隆抗体 原核表达 免疫 ORF3蛋白
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禽戊型肝炎病毒CaHEV-GDSZ01株ORF2蛋白的生物信息学分析、原核表达及多克隆抗体制备
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作者 张玉倩 吕志航 +2 位作者 刘春红 廉春杨 张雪莲 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期231-238,共8页
旨在分析禽戊型肝炎病毒(aHEV)CaHEV-GDSZ01株ORF2蛋白的结构和生物学功能等,并利用大肠杆菌原核表达系统表达ORF2重组蛋白及制备抗ORF2蛋白多克隆抗体,验证重组蛋白的免疫原性和反应原性等。利用生物信息学软件对CaHEV-GDSZ01株ORF2蛋... 旨在分析禽戊型肝炎病毒(aHEV)CaHEV-GDSZ01株ORF2蛋白的结构和生物学功能等,并利用大肠杆菌原核表达系统表达ORF2重组蛋白及制备抗ORF2蛋白多克隆抗体,验证重组蛋白的免疫原性和反应原性等。利用生物信息学软件对CaHEV-GDSZ01株ORF2蛋白的理化性质、结构和功能等方面进行分析;通过酶切、连接pET-32a(+)载体与CaHEV GDSZ01株的ORF2基因,构建pET-32a-ORF2-His和pET-32a-ORF2原核表达质粒,并转化至DE3感受态细胞中进行诱导表达,分析其表达形式;ORF2重组蛋白经切胶纯化,利用Western Blot试验验证其反应原性后,免疫新西兰大白兔以获得兔抗ORF2蛋白多克隆抗体,并通过Western Blot方法对多抗进行鉴定分析、利用间接ELISA方法进行抗体效价检测。生物信息学分析结果显示,CaHEV-GDSZ01株的ORF2蛋白为亲水性的、不稳定的蛋白,且其存在信号肽的概率高达93.59%,其二级结构主要以无规则卷曲为主,具备结合抗体的结构条件,其保护性抗原整体预测评分则表明ORF2蛋白具备良好的免疫原性。试验成功构建了ORF2重组原核表达质粒,并成功诱导表达了目的蛋白,经SDS-PAGE试验和Western Blot试验显示,诱导表达的蛋白主要为非可溶性蛋白,并具有良好的反应原性;而制备的兔源抗aHEV ORF2蛋白多克隆抗体的效价为1∶102400,且能特异性识别免疫原ORF2蛋白、非免疫原ORF2-His蛋白和截短的sORF2蛋白。以上结果初步分析了ORF2蛋白的理化性质和部分生物学功能,成功表达了aHEV ORF2蛋白,制备了抗ORF2蛋白的兔源多克隆抗体。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 ORF2蛋白 生物信息学 原核表达 多克隆抗体
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人、猪和鸡血清中抗禽戊型肝炎病毒抗体的检测与鉴定 被引量:1
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作者 荆胜涛 张红霞 +4 位作者 孙培明 董施伟 赵钦 张璐 周恩民 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第1期89-92,共4页
通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的... 通过对人、猪和鸡血清中的抗禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定,本研究结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEVORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的抗原表位,而阳性血清中抗禽HEV ORF2特异性抗原表位抗体的阳性率为41.3%~92.1%,提示人、猪和鸡都有感染禽HEV的可能性,这为进一步验证禽HEV可能造成的人兽共感染提供新的科学依据。 展开更多
关键词 肝炎病毒 禽戊型肝炎病毒 禽戊型肝炎病毒特异性抗体 血清学调查
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用RT-PCR检测海兰褐蛋鸡禽戊型肝炎病毒 被引量:3
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作者 杨树青 孙嘉 +2 位作者 孔祥伟 贠鲁祥 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1618-1622,共5页
为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份。提取RNA后,进行禽HEVORF2基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR)检测,阳性样品进行克隆... 为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份。提取RNA后,进行禽HEVORF2基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR)检测,阳性样品进行克隆测序。同时采集疑似HEV感染鸡的肝,在两周龄SPF鸡进行了人工接种试验。结果表明,来自海兰褐蛋鸡群的40份粪便和10份血浆样品中,27份粪便样品和4份血浆样品为禽HEV RNA阳性。随机选取两个阳性样品的序列进行分析,其与国内外参考序列相似性为78.1%~98.3%。进化树分析显示与中国、欧洲参考株在同一分支,属于禽HEV基因3型。人工接种试验结果显示,接种后14d的SPF鸡肝中均鉴定出HEV RNA阳性(4/4)。我国蛋鸡群存在基因3型禽HEV。本研究首次发现并报道国内蛋鸡存在禽HEV,这为进一步了解禽HEV在我国鸡群的流行状况及其危害提供了依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒(HEV) 海兰褐蛋鸡 大肝大脾病(BLS) 基因3
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禽戊型肝炎病毒组织切片免疫荧光检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 陈瑞爱 李延鹏 +2 位作者 同戈 郭凯 刘正伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1851-1857,共7页
为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白... 为建立对禽戊型肝炎病毒(HEV)鉴别诊断的组织切片免疫荧光方法,制备禽HEV ORF2蛋白的单因子血清,对感染HEV、禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)鸡的病变肝组织切片进行间接免疫荧光检测。结果显示制备的禽HEV ORF2蛋白的单因子血清具有良好的特异性,利用组织切片免疫荧光方法能够特异地检测禽HEV的感染,从而有效地区分HEV与易混淆的ALV、REV的感染。建立的鉴别诊断禽HEV的组织切片免疫荧光方法,可以有效地诊断禽HEV感染,给实验室诊断带来极大的方便。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 组织切片 免疫荧光 鉴别诊断
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我国鸡群禽戊型肝炎病毒RT-PCR检测及部分ORF2基因序列分析 被引量:2
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作者 赵钦 周恩民 +4 位作者 孙培明 董施伟 张璐 孙亚妮 姜世金 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期721-723,共3页
为从核酸水平证实我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(HEV)的存在,本实验从山东省某鸡场患有肝脾肿大综合征的病鸡中采集10份粪便和8份胆汁样品,利用RT-PCR方法检测其中禽HEV ORF2基因片段,并将阳性PCR产物克隆测序。结果显示:18份粪便和胆汁样品... 为从核酸水平证实我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(HEV)的存在,本实验从山东省某鸡场患有肝脾肿大综合征的病鸡中采集10份粪便和8份胆汁样品,利用RT-PCR方法检测其中禽HEV ORF2基因片段,并将阳性PCR产物克隆测序。结果显示:18份粪便和胆汁样品中,13份为禽HEV RNA阳性;其序列间的同源性为97%~99%,与GenBank中登录的参考序列同源性为76.6%~98.1%;进化树显示与欧洲地区的禽HEV在同一分支,属于禽HEV基因3型。禽HEV ORF2基因的检出为进一步了解禽HEV对我国家禽养殖业的危害以及在我国的流行情况奠定了基础。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 ORF2基因
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在肝脏肿大和产蛋率下降综合征病鸡中检出禽戊型肝炎病毒核酸 被引量:1
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作者 刘宝元 孙亚妮 +2 位作者 陈宜阳 赵钦 周恩民 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期35-37,共3页
为弄清辽宁某蛋鸡场鸡只产蛋量突然下降,死亡率上升及部分剖检鸡只肝脏肿大出血的原因,对采集的发病鸡肝脏组织进行病理学观察,同时对肠道内容物进行禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)核酸片段的RT-PCR检测。肝脏的组织病理学观... 为弄清辽宁某蛋鸡场鸡只产蛋量突然下降,死亡率上升及部分剖检鸡只肝脏肿大出血的原因,对采集的发病鸡肝脏组织进行病理学观察,同时对肠道内容物进行禽戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)核酸片段的RT-PCR检测。肝脏的组织病理学观察发现,肝细胞坏死和汇管区周围淋巴细胞浸润;RT-PCR从肠道内容物中成功扩增到禽HEV ORF2基因的部分片段;基因序列同源性分析结果表明,其与国内禽HEV参考株的序列同源性为97.5%~99.6%,而与其他国家的HEV序列同源性为77.9%~97.6%;进化树分析表明,该序列(命名为China 15-LN)与国内其他地区及欧洲的部分分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 分离鉴定 序列分析
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肉种鸡禽白血病病毒与禽戊型肝炎病毒混合感染的诊断病例 被引量:4
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作者 刘林 林梦舟 +4 位作者 唐寅 朱飞 张家勇 徐建生 程旭 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期74-77,共4页
江苏某肉种鸡场鸡群发生精神抑郁、消瘦、死亡率高现象,经剖检发现,病死鸡肝、脾组织肿大并伴有肿瘤样结节。本实验室对病料制备组织切片,设计合成J亚型禽白血病病毒和禽戊型肝炎病毒引物进行RT-PCR检测。组织切片结果显示,肝、脾出现... 江苏某肉种鸡场鸡群发生精神抑郁、消瘦、死亡率高现象,经剖检发现,病死鸡肝、脾组织肿大并伴有肿瘤样结节。本实验室对病料制备组织切片,设计合成J亚型禽白血病病毒和禽戊型肝炎病毒引物进行RT-PCR检测。组织切片结果显示,肝、脾出现细胞脂肪变性、淋巴细胞浸润以及肿瘤细胞浸润等情况,脾脏出现细胞坏死和结缔组织增生。RT-PCR结果显示,J亚群禽白血病病毒与禽戊型肝炎病毒核酸均呈阳性,该场为J亚型禽白血病和禽戊型肝炎的混合感染,本试验首次在国内肉种鸡上发现2种以上病毒的混合感染。 展开更多
关键词 肉种鸡 白血病病毒 禽戊型肝炎病毒 组织切片 RT-PCR 混合感染
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陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测 被引量:3
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作者 拓晓玲 刘宝元 +3 位作者 陈宜阳 孙亚妮 赵钦 周恩民 《动物医学进展》 北大核心 2017年第7期120-123,共4页
2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和... 2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和粪便中的禽HEV RNA进行了实验室检测。ELISA检测结果发现,168份血清为禽HEV抗体阳性,阳性率为49.85%;套式RT-PCR检测结果发现,63份粪便为禽HEV RNA基因片段阳性,阳性率为23.51%。基因片段的序列同源性分析发现,杨凌地区的禽HEV分离株与国内的同源性为93.0%~99.2%;进化树分析表明,其与国内其他地区的分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 酶联免疫吸附试验 套式RT—PCR 序列分析
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禽戊型肝炎病毒与J亚群禽白血病病毒共感染诱发鸡大肝大脾病的分析 被引量:4
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作者 郑高颖 何书海 +5 位作者 张玉利 张亚 袁世玉 薛婧雯 庞宇 成子强 《中国家禽》 北大核心 2019年第17期72-75,共4页
为查明山东某种鸡场父母代种鸡出现产蛋下降、死亡率上升以及剖检所见肝脾肿大的原因,对发病鸡进行了PCR检测和组织病理学检查。PCR结果显示:被检10只鸡中8只为禽戊型肝炎病毒(HEV)阳性、5只为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)阳性,HEV与ALV-J... 为查明山东某种鸡场父母代种鸡出现产蛋下降、死亡率上升以及剖检所见肝脾肿大的原因,对发病鸡进行了PCR检测和组织病理学检查。PCR结果显示:被检10只鸡中8只为禽戊型肝炎病毒(HEV)阳性、5只为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)阳性,HEV与ALV-J双阳性有4只。HEV与ALV-J共感染鸡的组织病理学检查发现:肝细胞坏死和汇管区周围淋巴细胞浸润,肝细胞内可见嗜酸性包涵体,同时部分肝内汇管区周围及肾脏间质可见髓细胞样瘤细胞,脑神经元坏死,肠绒毛脱落、坏死。检测结果提示本次蛋鸡大肝大脾病为HEV与ALV-J共感染引起。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 J亚群白血病病毒 大肝大脾病 共感染
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禽戊型肝炎病毒研究进展 被引量:3
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作者 张玉倩 杨惠湖 +3 位作者 姚鑫炎 严专强 黄淑坚 张雪莲 《中国家禽》 北大核心 2022年第3期99-105,共7页
禽戊型肝炎病毒(Avian hepatitis E virus,aHEV)是引起鸡大肝大脾病或肝炎脾大综合征的主要病原,自2016年以来,我国出现了新基因型aHEV的流行,可感染更低日龄鸡群,并引起不同于以往的临床症状,给养殖业造成严重的经济损失。aHEV的宿主... 禽戊型肝炎病毒(Avian hepatitis E virus,aHEV)是引起鸡大肝大脾病或肝炎脾大综合征的主要病原,自2016年以来,我国出现了新基因型aHEV的流行,可感染更低日龄鸡群,并引起不同于以往的临床症状,给养殖业造成严重的经济损失。aHEV的宿主范围广泛,除了感染鸡、火鸡等常见家禽外,还能感染野外其它禽类与家猪等,有潜在的人兽共患风险。近年来,在aHEV与宿主细胞相互作用、疫苗研制等方面取得了一定的进展,文章就aHEV的病原学、流行病学、病毒与宿主细胞相互作用及疫苗研制等方面的研究进展进行综述,以期为未来aHEV的深入研究及引起的相关疾病的综合防控提供参考。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 病原学 流行病学 防控
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禽戊型肝炎病毒与大肠杆菌混合感染的诊断 被引量:6
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作者 梁燕飞 朱明君 成子强 《中国家禽》 北大核心 2019年第15期64-66,共3页
2018年8月,内蒙古赤峰市某鸡场送检的6只140日龄海兰褐蛋鸡,125日龄开始产蛋,随即发病,并出现死亡,死亡频次由3~4只/d逐渐增加至60~70只/d。为确诊病因,对送检的6只病鸡进行了剖检观察、组织学观察及病原学检测,病死鸡剖检可见心包膜肥... 2018年8月,内蒙古赤峰市某鸡场送检的6只140日龄海兰褐蛋鸡,125日龄开始产蛋,随即发病,并出现死亡,死亡频次由3~4只/d逐渐增加至60~70只/d。为确诊病因,对送检的6只病鸡进行了剖检观察、组织学观察及病原学检测,病死鸡剖检可见心包膜肥厚,体腔内有多量积水,肝脏肿大、淤血;镜检可见大肠杆菌;病理组织学检查主要表现以淋巴细胞和异嗜性细胞浸润为主的肝炎;PCR检测和序列比对结果鉴定其原发病原为禽戊型肝炎病毒(HEV)。确诊病因为HEV与大肠杆菌混合感染。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 大肠杆菌 混合感染 蛋鸡
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我国部分地区禽戊型肝炎病毒分子流行病学分析 被引量:1
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作者 张翔 林婷婷 +9 位作者 刘丰波 宋姗姗 李彬 栾栋祖 王群义 刘平 刘红祥 马冬 任衍倍 刘东 《中国动物检疫》 CAS 2021年第3期1-4,共4页
为了解我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(avain hepatitis E virus,aHEV)的分子变异情况,对2018年从山东、河南、河北、辽宁、吉林、黑龙江、陕西、山西、江苏等地疑似aHEV感染鸡群中采集的679份肝脏、脾脏病料样品进行RT-PCR检测,从中选取PCR... 为了解我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(avain hepatitis E virus,aHEV)的分子变异情况,对2018年从山东、河南、河北、辽宁、吉林、黑龙江、陕西、山西、江苏等地疑似aHEV感染鸡群中采集的679份肝脏、脾脏病料样品进行RT-PCR检测,从中选取PCR阳性产物,对其ORF1基因进行序列测定与遗传进化分析。结果显示:从病料中检出阳性样品37份,阳性检出率为5.45%;选取的15个试验毒株之间的ORF1基因同源性为90.1%~100%,与目前报道的4种基因型同源性均小于90%,其中与基因1型的澳大利亚株和韩国株同源性为85.5%~89.0%,与基因2型的美国原型株和美国无毒株同源性为85.5%~88.2%,与基因3型的欧洲株和中国株同源性为86.3%~89.7%,与基因4型的匈牙利株和中国台湾株同源性为86.4%~88.5%。ORF1基因进化树分析发现,所分离的aHEV均属于戊型肝炎B种,不在目前所划分的基因型分支上,形成独立的基因分支,不属于已报道的4个基因型。结果表明,目前在我国流行的aHEV是一种新基因型病毒,这为我国aHEV分子流行病学分析提供了补充和依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 分子流行病学 ORF1基因 同源性
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不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白的免疫效果分析
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作者 闫洪健 高启明 +3 位作者 王一新 常爽 赵鹏 王成森 《中国家禽》 北大核心 2023年第10期50-58,共9页
为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗。将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只。ORF2蛋白组单纯免疫... 为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗。将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只。ORF2蛋白组单纯免疫YT-ORF2蛋白,ORF2蛋白+弗氏佐剂组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂,AB101组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB101,AB106组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB106,AB506组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB506,空白对照组免疫生理盐水,分别在21、28、42日龄三次免疫SPF鸡。采用ELISA和间接免疫荧光检测不同免疫组SPF鸡的aHEV抗体水平,通过流式细胞仪检测CD4+和CD8+T淋巴细胞水平,荧光定量PCR检测IL-2、IL-4、IFN-γ3种细胞因子表达情况,并测定体重和器官发育指数。结果显示:原核表达获得分子量为72 ku的ORF2蛋白,AB106组产生的抗体水平极显著高于其他各组(P<0.01),AB106和AB506免疫增强剂可引起CD4^(+)和CD8^(+)T细胞比重显著增加并上调IL-2、IL-4、IFN-γ表达量(P<0.05),AB106组脾脏指数、法氏囊指数显著高于空白对照组、ORF2蛋白组和ORF2蛋白+弗氏佐剂组(P<0.05)。研究表明含胸腺肽和TLR7激动剂的免疫增强剂可显著提高CD4+和CD8+T细胞比重并上调与免疫相关的细胞因子表达量,其中且含胸腺肽的免疫增强剂诱导的aHEV抗体水平较高。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 免疫增强剂 ORF2 亚单位疫苗 原核表达
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我国家禽戊型肝炎病毒感染情况的调查
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作者 耿彦生 张硕 +3 位作者 赵晨燕 汪葆玥 田克恭 王佑春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期429-432,共4页
目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV... 目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV及禽HEV核酸检测。结果 1507份鸡血清中有54份为HEV抗体阳性,26份为HEV抗原阳性,抗原和抗体的阳性率分别为3.58%和1.73%;140份鸭血清中10份为HEV抗体阳性,2份为HEV抗原阳性,阳性率分别为7.14%和1.43%;鸡和鸭HEV抗原、抗体阳性率无统计学差异。在鸡、鸭血清标本中没有检测到HEVRNA。结论我国家禽存在HEV感染,但还需要进一步研究以确定感染的病毒是否为禽HEV或1-4型HEV跨种感染。 展开更多
关键词 肝炎病毒 禽戊型肝炎病毒 HEV-抗原 HEV-抗体 血清学调查
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禽戊型肝炎血清学调查以及与肝脾肿大综合征关系的研究 被引量:17
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作者 张璐 周恩民 +6 位作者 崔治中 董施伟 荆胜涛 彭军 孙陪明 孙淑红 秦卓明 《中国家禽》 北大核心 2008年第20期22-24,共3页
禽戊型肝炎病毒(hepatitis Evirus,HEV)是肝脾肿大(hepatitis-splenomegaly,HS)综合征的主要病原。禽HEV与人和猪HEV均属于肝病毒属。我们的前期研究结果表明基因重组禽HEV的ORF2蛋白含有其独有的抗原表位,同时含有与人、猪HEV共有的抗... 禽戊型肝炎病毒(hepatitis Evirus,HEV)是肝脾肿大(hepatitis-splenomegaly,HS)综合征的主要病原。禽HEV与人和猪HEV均属于肝病毒属。我们的前期研究结果表明基因重组禽HEV的ORF2蛋白含有其独有的抗原表位,同时含有与人、猪HEV共有的抗原表位。本研究用禽HEVORF(Open Reading Frame)2-1蛋白作为包被抗原所建立的检测血清抗体的间接ELISA对从山东、广东、黑龙江采集的914份鸡血清进行了血清学检测,用疑似肝脾肿大综合征鸡肝组织感染SPF鸡群,检测攻毒后血清中可能存在的抗禽HEVORF2抗体。检测结果显示健康鸡群的抗体阳性率平均为28.5%,而患有肝脾肿大综合征的鸡群中的阳性率则为43.3%。用疑似肝脾肿大综合征鸡肝组织感染的SPF鸡群血清抗禽HEVORF2抗体的阳性率则高达62.5%。本研究进一步阐明了禽HEV在我国部分地区的流行状况以及与HS的直接关系。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 血清学调查 ORF2重组蛋白 肝脾重大综合征
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4例禽戊型肝炎病例的实验室诊断及ORF2基因遗传进化分析 被引量:5
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作者 张翔 刘丰波 +8 位作者 马冬 宋姗姗 刘东 刘红祥 李彬 王群义 栾栋祖 刘平 邵三敏 《中国动物检疫》 CAS 2019年第8期80-84,共5页
本研究通过分子流行病学诊断技术,分别从山东、辽宁、吉林、陕西4个地区表现肝炎症状的病鸡中,采集肝脏和脾脏样品,利用RT-PCR方法,检测禽戊型肝炎病毒(aHEV),并对aHEV-ORF2基因片段进行测序,利用MegAlign进行同源性比较。结果显示:4个... 本研究通过分子流行病学诊断技术,分别从山东、辽宁、吉林、陕西4个地区表现肝炎症状的病鸡中,采集肝脏和脾脏样品,利用RT-PCR方法,检测禽戊型肝炎病毒(aHEV),并对aHEV-ORF2基因片段进行测序,利用MegAlign进行同源性比较。结果显示:4个鸡场的病鸡样品均为aHEV阳性,aHEV-ORF2基因序列间同源性为84.5%~94.5%,与已报道的4种基因型同源性均小于84.0%,其中与基因1型的澳大利亚株和韩国株同源性为81.6%~82.8%,与基因2型的美国原型株和美国无毒株同源性为80.9%~82.8%,与基因3型的欧洲株和中国株同源性为80.8%~82.5%,与基因4型的匈牙利株和中国台湾株同源性为81.4%~82.6%。ORF2基因进化树分析显示:4株aHEV均属于戊型肝炎B种,形成独立的基因分支,但不属于已报道的4个基因型,而在一个新型独立分支上,表明国内存在一种新基因型的aHEV流行。本研究为我国aHEV的进一步研究提供了基础和依据。 展开更多
关键词 禽戊型肝炎病毒 ORF2基因 同源性
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