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禽多杀性巴氏杆菌检验用菌种的研究 被引量：1
1
作者 冯妍 张一帜 +4 位作者 王秀丽 王甲 刘燕 姚文生 任小侠 《中国兽药杂志》 2024年第1期13-17,共5页
为研究禽多杀性巴氏杆菌类兽用生物制品效力评价用菌株,制备了一批禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株,并对菌种的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分及毒力等进行检定,进一步评估了冻干菌菌数的稳定性,对冻干菌... 为研究禽多杀性巴氏杆菌类兽用生物制品效力评价用菌株,制备了一批禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株,并对菌种的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分及毒力等进行检定,进一步评估了冻干菌菌数的稳定性,对冻干菌与新鲜培养菌液的毒力进行了比较。试验结果表明,该冻干菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二○○○版菌种标准的规定。冻干菌菌数保持稳定,并且与新鲜培养的攻毒菌液相比,毒力并无差异。本研究为禽多杀性巴氏杆菌类兽用生物制品效力评价用菌株的制备和检定提供参考依据。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株 毒力 效力评价
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艾叶等20种中药对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性 被引量：22
2
作者 曲径 殷中琼 +3 位作者 贾仁勇 彭练慈 康帅 李莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期91-94,共4页
通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法提取艾叶等20种中药的有效成分,采用二倍稀释法测定其对禽多杀性巴氏杆菌（C48-1,血清型A∶1）的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果.结果显示,艾叶、黄连、黄柏、秦皮、... 通过乙醇回流、水煎煮和超声波等方法提取艾叶等20种中药的有效成分,采用二倍稀释法测定其对禽多杀性巴氏杆菌（C48-1,血清型A∶1）的体外抗菌活性;并研究抗菌活性较强的几味中药的体外联合抑菌效果.结果显示,艾叶、黄连、黄柏、秦皮、地榆、虎杖6种中药提取物对巴氏杆菌的最低抑菌浓度值（MIC）范围在6.25-50mg/mL;赤芍、何首乌、茵陈、射干、甘草、蒲公英、白鲜皮7种中药提取物的MIC 值范围在50-100mg/mL;金银花、柴胡、板蓝根、夏枯草、穿心莲、知母、苦参7种中药提取物的MIC值大于100mg/mL.联合抑菌试验结果表明,黄连、黄柏、秦皮、虎杖和艾叶的联合抑菌指数（FICI）≤0.5,黄柏、秦皮、黄连和虎杖的联合抑菌指数（FICI）≥2;秦皮、地榆和黄柏的联合抑菌指数（FICI）≥2.通过以上数据可以看出,黄连、黄柏、地榆、艾叶对巴氏杆菌均具有较好的体外抗菌活性;黄连、黄柏、地榆和艾叶为相加、协同作用;地榆和黄柏为拮抗作用. 展开更多
关键词 中药提取物 禽多杀性巴氏杆菌 抗菌活性
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禽多杀性巴氏杆菌感染对麻保沙星在鸡体内药动学特征的影响研究 被引量：10
3
作者 黄显会 陈杖榴 +1 位作者 张淑婷 曾振灵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期98-102,共5页
按每kg体重30万个CFU在鸡胸部肌肉注射接种禽多杀性巴氏杆菌(C48 1),人工诱发鸡急性多杀性巴氏杆菌病。选用90只51～60日龄健康未经多杀性巴氏杆菌苗免疫的岭南黄鸡,18只用作病理模型研究,其余72只随机分为6组,进行静注、肌注及内服麻... 按每kg体重30万个CFU在鸡胸部肌肉注射接种禽多杀性巴氏杆菌(C48 1),人工诱发鸡急性多杀性巴氏杆菌病。选用90只51～60日龄健康未经多杀性巴氏杆菌苗免疫的岭南黄鸡,18只用作病理模型研究,其余72只随机分为6组,进行静注、肌注及内服麻保沙星(2 5mg/kg)在健康和禽多杀性巴氏杆菌感染鸡的药物动力学研究。用反相高效液相色谱法测定血浆中麻保沙星的浓度。用MCPKP药物动力学程序处理血浆药物浓度—时间数据。麻保沙星在鸡体内的药动学特征是吸收迅速且完全、分布广泛、消除缓慢。急性禽多杀性巴氏杆菌感染除显著延长了肌注及内服麻保沙星的消除半衰期、血药有效浓度维持时间和降低肌注给药的峰浓度外,对其他药动学参数无显著性差异的影响。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌感染 麻保沙星 鸡体 药动学特征 高效液相色谱法
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氟苯尼考对禽多杀性巴氏杆菌的抗菌后效应 被引量：9
4
作者 张旭 王大菊 伍金娥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期408-410,共3页
采用菌落计数法测定氟苯尼考对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌药后效应（PAE）、抗菌后亚抑菌浓度效应（PA-SME）及亚抑菌浓度效应（SME）。结果显示：氟苯尼考在2～8MIC（μg／mL）范围内对禽多杀性巴氏杆菌的PAE为1．31～5．01h，PA-SME... 采用菌落计数法测定氟苯尼考对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌药后效应（PAE）、抗菌后亚抑菌浓度效应（PA-SME）及亚抑菌浓度效应（SME）。结果显示：氟苯尼考在2～8MIC（μg／mL）范围内对禽多杀性巴氏杆菌的PAE为1．31～5．01h，PA-SME为1．66-24．20h，SME为0．05～1．31h；其PAE受药物浓度、细菌接触时间及接种量的影响。结果提示：临床应用氟苯尼考治疗禽多杀性巴氏杆菌病时，应结合药代动力学参数和MIC及PAE，制订给药方案。 展开更多
关键词 氟苯尼考 禽多杀性巴氏杆菌(P.multocida) 抗菌药后效应(PAE) 抗菌后亚抑制浓度效应(PA-SME) 亚抑菌浓度效应(SME)
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禽多杀性巴氏杆菌PtfA重组亚单位疫苗免疫效果的检测 被引量：4
5
作者 宫强 孔梁宇 +3 位作者 牛明福 秦翠丽 侯颖 孙晓菲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期567-570,共4页
为评价禽多杀性巴氏杆菌(P.multocida)PtfA重组蛋白(rPtfA)的免疫效果,本研究通过PCR扩增禽P.multocida的ptfA基因,将其克隆于pET-32a载体中并在大肠杆菌中表达。表达的rPtfA纯化后制备油乳剂亚单位疫苗,经3次免疫20只4周龄雏鸡,并设弱... 为评价禽多杀性巴氏杆菌(P.multocida)PtfA重组蛋白(rPtfA)的免疫效果,本研究通过PCR扩增禽P.multocida的ptfA基因,将其克隆于pET-32a载体中并在大肠杆菌中表达。表达的rPtfA纯化后制备油乳剂亚单位疫苗,经3次免疫20只4周龄雏鸡,并设弱毒活疫苗组和PBS对照组。免疫后定期采血检测免疫鸡体液和细胞免疫水平,并进行攻毒试验评价rPtfA保护效率。结果显示动物免疫后,rPtfA免疫组和弱毒活疫苗免疫组血清抗体水平持续上升,与PBS对照组相比差异极显著(p<0.01),并且弱毒活疫苗组血清抗体水平高于rPtfA免疫组。淋巴细胞增殖和IFN-γ分泌试验的结果也表明,rPtfA组和弱毒活疫苗组的SI值及分泌的IFN-γ水平均极显著高于对照组(p<0.01),并且弱毒活疫苗组稍高于rPtfA组。攻毒后rPtfA组和弱毒活疫苗组的保护率分别为40%和70%,表明rPtfA亚单位疫苗虽然可为免疫鸡提供一定的保护,但效果不及弱毒活疫苗,仍需采取措施进一步增强其免疫保护效果。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 ptfA基因 重组亚单位疫苗 免疫效果
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检测禽多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立 被引量：11
6
作者 施少华 陈红梅 +3 位作者 程龙飞 傅光华 万春和 黄瑜 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第4期388-391,共4页
以禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)C48-1为研究对象,利用LAMP方法对Pm进行快速检测.结果表明:LAMP方法在恒温65℃下,1 h内就可以检测到Pm;LAMP方法最低可检测100 pg.μL-1Pm基因组DNA.该方法不需要精密的温度循环装置,有恒... 以禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)C48-1为研究对象,利用LAMP方法对Pm进行快速检测.结果表明:LAMP方法在恒温65℃下,1 h内就可以检测到Pm;LAMP方法最低可检测100 pg.μL-1Pm基因组DNA.该方法不需要精密的温度循环装置,有恒温加热设备就可以满足检测条件,适合基层临床应用. 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 环介导等温扩增方法
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11株禽多杀性巴氏杆菌OmpA基因克隆测序及其序列分析 被引量：4
7
作者 高明燕 徐步 +3 位作者 龚建森 王鑫 范建华 刘学贤 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期951-956,共6页
为了解国内禽多杀性巴氏杆菌流行株（Pasteurellamultocida，Pm）OmpA基因的变异情况，参考Gen-Bank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计一对特异性引物，采用PCR方法对11个禽Pm菌株和3个荚膜型参考株（A，B，D）的OmpA基因进行扩增，将... 为了解国内禽多杀性巴氏杆菌流行株（Pasteurellamultocida，Pm）OmpA基因的变异情况，参考Gen-Bank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计一对特异性引物，采用PCR方法对11个禽Pm菌株和3个荚膜型参考株（A，B，D）的OmpA基因进行扩增，将各菌株纯化回收的扩增产物与pMDl8-T载体连接，筛选阳性克隆进行测序。结果表明：14个菌株的OmpA基因开放阅读框在1047～1077bp之间，其中长度为1062bp的有9个菌株；SignalIP4．0预测表明，信号肽均为N端21个氨基酸残基，成熟蛋白氨基酸残基数量在327～332之间，推测的分子量为35．19～36．35kD。与GenBank中12个菌株OmpA基因核苷酸序列比对及遗传进化分析发现，核苷酸同源性为85．3％～100％；氨基酸同源性为83．1％～100％；其中C48—1，1010，9003，890920，921012，xj等6个国内禽Pm分离株OmpA序列同源性为100％。由此可见国内禽Pm菌株OmpA基因非常保守。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 OmpA基因 序列分析 同源性
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禽多杀性巴氏杆菌与大肠杆菌科间原生质体融合的研究 被引量：14
8
作者 蒋文泓 黄青云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期267-272,共6页
以耐药标记的华农系禽多杀性巴氏杆菌５：Ａ弱毒菌株（Ｃｈｌｒ，Ｎｏｒｓ）与禽大肠杆菌Ｏ２弱毒菌株（Ｎｏｒｒ，Ｃｈｌｓ）作亲本，在ＤＮａｓｅ１始终存在的条件下，采用溶菌酶ＥＤＴＡ法制备两亲本菌株原生质体后再生，原生质体... 以耐药标记的华农系禽多杀性巴氏杆菌５：Ａ弱毒菌株（Ｃｈｌｒ，Ｎｏｒｓ）与禽大肠杆菌Ｏ２弱毒菌株（Ｎｏｒｒ，Ｃｈｌｓ）作亲本，在ＤＮａｓｅ１始终存在的条件下，采用溶菌酶ＥＤＴＡ法制备两亲本菌株原生质体后再生，原生质体形成率均９０％以上，原生质体再生率为３５６３％、５０９３％。通过聚乙二醇钙离子促融合剂系统，进行原生质体融合，成功地获得３株具有双亲本耐药性（Ｃｈｌｒ，Ｎｏｒｒ）和双菌体血清型（５：Ａ，Ｏ２）的融合菌株。它们的生化反应、菌体和菌落大小介于两亲本菌株之间，在肉汤培养中表现出双亲菌株的生长特性。经多次传代，表明３个融合株的上述性状是稳定遗传的。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 禽大肠杆菌 原生质体融合
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8株禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因序列分析 被引量：3
9
作者 高明燕 徐步 +4 位作者 龚建森 王鑫 俞燕 范建华 刘学贤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第12期43-47,共5页
为了解国内禽多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm）流行株外膜蛋白 H（OmpH）基因的变异情况，参考GenBank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计1对特异性引物，采用PCR方法对不同来源的8株禽Pm菌株和3个荚膜型参考株（A、B、D）的... 为了解国内禽多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm）流行株外膜蛋白 H（OmpH）基因的变异情况，参考GenBank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计1对特异性引物，采用PCR方法对不同来源的8株禽Pm菌株和3个荚膜型参考株（A、B、D）的OmpH基因进行扩增、测序。结果显示，11个菌株的OmpH基因开放阅读框在1002-1071 bp 之间；SignalIP 4.0预测结果表明，信号肽均为N端20个氨基酸残基，成熟蛋白氨基酸残基数量在314-337 aa之间，推测的分子质量在33.76-37.04 ku之间。与GenBank中15个菌株OmpH基因序列比对结果发现，核苷酸同源性在84.9%-100.0%之间；氨基酸同源性在81.5%-100.0%之间；其中C48-1、1010、9003、890920、921012、XJ-e 6个国内禽Pm分离株OmpH序列同源性为100.0%。试验结果表明，国内禽Pm菌株OmpH基因非常保守。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 OmpH基因 序列分析 同源性
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禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白和脂多糖的免疫保护效果 被引量：2
10
作者 王帅涛 宫强 +4 位作者 彭永刚 程茗 秦翠丽 张敏 牛明福 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期644-647,共4页
为确定禽多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的保护性抗原外膜蛋白(OMPs)和脂多糖(LPS)在抵抗感染中的作用,本研究提取了禽P.multocida CVCC 474的OMPs和LPS成分,将该两种成分分别与弗氏佐剂混合制备免疫原,进行动物免疫。小鼠分为4组:OMPs组... 为确定禽多杀性巴氏杆菌(P.multocida)的保护性抗原外膜蛋白(OMPs)和脂多糖(LPS)在抵抗感染中的作用,本研究提取了禽P.multocida CVCC 474的OMPs和LPS成分,将该两种成分分别与弗氏佐剂混合制备免疫原,进行动物免疫。小鼠分为4组:OMPs组、LPS组、禽P.multocida弱毒活疫苗组和PBS对照组,每组16只。各组均免疫3次,每次间隔两周。间接ELISA检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况。以禽P.multocida强毒株CVCC 474进行攻毒,计算小鼠死亡数及保护率。实验结果表明,动物免疫后,OMPs组与LPS组免疫小鼠特异性血清抗体水平持续升高,与弱毒活疫苗组水平相近,与PBS组相比差异极显著(p<0.01)。脾淋巴细胞增殖试验表明,OMPs组、LPS组和弱毒活疫苗组的SI值极显著高于PBS对照组(p<0.01),但3个免疫组之间则无明显差异(p>0.05)。攻毒保护试验结果显示,OMPs免疫组的保护率与弱毒活疫苗相当,为8/10,高于LPS免疫组的保护率(7/10),表明OMPs作为研制禽P.multocida亚单位疫苗具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白 脂多糖 疫苗 免疫应答
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禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗免疫效果的研究 被引量：2
11
作者 宫强 王帅涛 +5 位作者 秦翠丽 牛明福 程茗 侯玉泽 张勇法 孙晓菲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期454-458,共5页
目的：研究禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗在鸡体内诱导的免疫保护效果。方法：PCR扩增禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆入pcDNA3.1（＋）上,构建重组质粒pOMPA,体外转染SP2/0细胞,RT-PCR和免疫荧光试验检测目的基因的转录及表达情... 目的：研究禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗在鸡体内诱导的免疫保护效果。方法：PCR扩增禽多杀性巴氏杆菌的ompa基因片段,克隆入pcDNA3.1（＋）上,构建重组质粒pOMPA,体外转染SP2/0细胞,RT-PCR和免疫荧光试验检测目的基因的转录及表达情况。动物免疫共分四组：pOMPA组、弱毒疫苗组、pCDNA3.1（＋）空载体组和PBS对照组,每组15只4周龄鸡,除弱毒疫苗组外其他三组均肌注免疫三次,每次间隔两周,弱毒疫苗组仅首免时肌注1羽份/每只鸡。间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,MTT法检测免疫鸡外周血淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA检测IFN~γ分泌情况,强毒攻击,计算免疫鸡存活数目及保护率。结果：体外转染检测结果表明pOMPA可在体外培养的细胞中表达目的蛋白。动物免疫后,DNA疫苗组和弱毒疫苗组血清抗体水平持续上升,与两对照组相比差异极显著（P〈0.01）,且弱毒疫苗组血清抗体水平明显高于DNA疫苗组（P〈0.05）。经提取的外膜蛋白（Omps）诱生后,两疫苗组的SI值极显著高于pCDNA3.1（＋）组和PBS免疫组（P〈0.01）,两疫苗组之间则无差别。两疫苗组免疫鸡外周血淋巴细胞产生的IFNγ-极显著高于两对照组（P〈0.01）。强毒攻击后DNA疫苗组和弱毒疫苗组的保护率分别为60%和73.3%。结论：成功构建了禽多杀性巴氏杆菌OmpA DNA疫苗,该疫苗为动物提供一定的免疫保护力,但不够理想。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 OmpADNA疫苗 免疫应答 保护效果
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禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果 被引量：2
12
作者 宫强 孔梁宇 +7 位作者 马丽苹 牛明福 秦翠丽 杨莹 李翔 阮梦蝶 田野 李战丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期658-662,671,共6页
为评价禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果,本实验以壳聚糖为佐剂制备ptfA基因的壳聚糖纳米DNA疫苗,检测其形态及抗DNA酶降解的能力,随后进行动物免疫实验,检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平、免疫小鼠脾淋巴细胞增殖... 为评价禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因壳聚糖纳米DNA疫苗的免疫效果,本实验以壳聚糖为佐剂制备ptfA基因的壳聚糖纳米DNA疫苗,检测其形态及抗DNA酶降解的能力,随后进行动物免疫实验,检测免疫后小鼠血清特异性抗体水平、免疫小鼠脾淋巴细胞增殖、IFN-γ分泌情况和抵抗强毒菌株攻击和免疫保护率。实验结果显示,ptfA基因壳聚糖纳米DNA在透射电镜下呈现较为规则的圆球型,粒径约为200 nm,可以有效抵抗DNAaseⅠ的降解。间接ELISA检测结果显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA组的血清抗体水平均呈现上升趋势,明显高于空载体对照组和PBS对照组,且壳聚糖纳米DNA疫苗组的抗体水平稍高于裸DNA疫苗组。淋巴细胞增殖试验和IFN-γ分泌试验结果也显示,壳聚糖纳米DNA疫苗组和裸DNA疫苗组的SI值与IFN-γ分泌水平极显著高于两对照组(p<0.01),但两种DNA疫苗组之间差异并不显著(p>0.05)。强毒菌株攻击后壳聚糖纳米DNA疫苗组的保护率优于裸DNA疫苗组,在一定程度上增强了禽多杀性巴氏杆菌ptfA基因裸DNA疫苗的免疫效果。从而为禽多杀性巴氏杆菌新型DNA疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 ptfA基因 壳聚糖纳米DNA疫苗 免疫效果
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禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因PCR检测方法的初步建立 被引量：2
13
作者 宫强 魏景利 +3 位作者 孔梁宇 牛明福 秦翠丽 侯颖 《中国家禽》 北大核心 2014年第12期47-48,52,共3页
为建立一种禽多杀性巴氏杆菌的PCR检测方法,本研究根据GenBank中已发表的禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因序列,设计与合成了一对特异性引物,建立了一种基于禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因的PCR检测方法,并优化了反应条件,检测了该方法的特异性和敏... 为建立一种禽多杀性巴氏杆菌的PCR检测方法,本研究根据GenBank中已发表的禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因序列,设计与合成了一对特异性引物,建立了一种基于禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因的PCR检测方法,并优化了反应条件,检测了该方法的特异性和敏感性。结果显示,该方法可成功扩增出禽多杀性巴氏杆菌ptfa基因片段,而鸡致病性大肠杆菌、鸡金黄色葡萄球菌和鸡白痢沙门菌均未扩增出相应片段。敏感性试验表明该方法可检测最低浓度为1pg/μL的禽多杀性巴氏杆菌基因组DNA。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 ptfa基因 PCR 检测方法
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禽多杀性巴氏杆菌、H9亚型禽流感二联灭活疫苗研制及免疫效力试验 被引量：2
14
作者 张敬峰 李银 +6 位作者 韩凯凯 刘宇卓 赵冬敏 黄欣梅 游园 周小波 谢星星 《江西农业学报》 CAS 2012年第10期127-129,共3页
采用鸡胚共同增殖禽多杀性巴氏杆菌和H9亚型禽流感病毒的方法制备的抗原中含巴氏杆菌数≥4×1010CFU/mL、H9亚型禽流感病毒含量≥109.38EID50/mL,经灭活后制备3批二联灭活疫苗并进行了相关检验。结果表明,所研制的3批二联疫苗的物... 采用鸡胚共同增殖禽多杀性巴氏杆菌和H9亚型禽流感病毒的方法制备的抗原中含巴氏杆菌数≥4×1010CFU/mL、H9亚型禽流感病毒含量≥109.38EID50/mL,经灭活后制备3批二联灭活疫苗并进行了相关检验。结果表明,所研制的3批二联疫苗的物理性状、无菌检验以及安全检验均符合相关质量标准;用3批疫苗分别免疫试验鸡和试验鸭,21 d后对禽多杀性巴氏杆菌免疫保护率均为90%以上,对H9亚型禽流感免疫保护率均为85%以上。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 H9亚型禽流感 灭活疫苗
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禽多杀性巴氏杆菌C48-1株omp基因克隆及序列分析 被引量：1
15
作者 陈红梅 施少华 +3 位作者 程龙飞 傅光华 彭春香 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 2008年第4期351-354,共4页
根据Genbank中禽多杀性巴氏杆菌的omp(outer membrane protein)基因核苷酸序列设计1对特异性引物,应用PCR方法扩增出禽多杀性巴氏杆菌(5∶A)C48-1株的omp基因全长片段,与克隆载体pmD18-T连接后,转化感受态细胞,对经PCR鉴定和酶切鉴定均... 根据Genbank中禽多杀性巴氏杆菌的omp(outer membrane protein)基因核苷酸序列设计1对特异性引物,应用PCR方法扩增出禽多杀性巴氏杆菌(5∶A)C48-1株的omp基因全长片段,与克隆载体pmD18-T连接后,转化感受态细胞,对经PCR鉴定和酶切鉴定均为阳性的克隆进行测序。结果表明omp基因全长2 376bp,编码791个氨基酸。序列分析表明该菌株与PBA100株、P52株、EU570212、PM70株核苷酸同源性为48.7%～98.6%,氨基酸同源性为34.8%～99.0%。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白 序列分析 同源性
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禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因的克隆表达及抗原性鉴定 被引量：1
16
作者 陈翠腾 程龙飞 +5 位作者 刘荣昌 万春和 傅光华 陈珍 朱春华 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第5期451-455,共5页
为了对禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白H(Omp H)的免疫学活性进行鉴定,本研究根据已发表的多杀性巴氏杆菌X-73株(U50907.1)设计了两对引物,用PCR方法扩增了禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株的Omp H,扩增片段为1 348bp(ORF为1 056bp)。扩增的Om... 为了对禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白H(Omp H)的免疫学活性进行鉴定,本研究根据已发表的多杀性巴氏杆菌X-73株(U50907.1)设计了两对引物,用PCR方法扩增了禽多杀性巴氏杆菌CVCC44801株的Omp H,扩增片段为1 348bp(ORF为1 056bp)。扩增的Omp H与GenBank中登录号为AE004439.1(Pm70株)、EF635422.1(C44-1株)、EU016232.1(P52株)、JQ082510.1(XJ121株)、U50907.1(X-73株)、U52200.1(P-1059株)的序列比对分析结果表明,其核苷酸同源性范围在80.2%~98.4%,氨基酸同源性范围在79.6%~98.5%。扩增了去信号肽的Omp H基因,构建原核重组表达质粒pET-Omp H,转化BL21并诱导表达,SDS-PAGE结果表明,表达蛋白约为56ku,与预期分子量的大小相符;蛋白免疫印迹试验结果表明,该蛋白具有良好的免疫学活性,为建立禽Pm血清学检测方法以及禽多杀性巴氏杆菌外膜蛋白疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白H基因 原核表达
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禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子 被引量：1
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作者 徐海军 刘俊良 +2 位作者 胡方宏 陈乃富 孙协军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期73-74,共2页
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 交叉保护因子 细菌性传染病 抗菌药物 经济损失 药物残留 畜禽产品 人类健康
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禽多杀性巴氏杆菌C48-1株OmpA基因表达与抗原性鉴定 被引量：1
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作者 高明燕 胡茂志 +2 位作者 沈欣悦 周生 徐步 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第3期289-292,共4页
为了研究禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白A(Omp A)的免疫原性,根据C48-1菌株Omp A基因序列设计一对特异性引物,采用PCR方法扩增去信号肽的成熟Omp A基因.将去信号肽的成熟Omp A基因扩增片段双酶切后,克隆到p GEX-6p-1表达载体中,构建重组... 为了研究禽多杀性巴氏杆菌(Pm)外膜蛋白A(Omp A)的免疫原性,根据C48-1菌株Omp A基因序列设计一对特异性引物,采用PCR方法扩增去信号肽的成熟Omp A基因.将去信号肽的成熟Omp A基因扩增片段双酶切后,克隆到p GEX-6p-1表达载体中,构建重组表达质粒p GEX-Omp A,转化宿主菌BL21并经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.SDS-PAGE的结果显示,融合蛋白GST-Omp A大小约为63 ku,与预期的分子质量相符.免疫印迹分析结果表明,该融合蛋白与鸡抗Pm血清具有明显的免疫反应,说明Omp A具有良好的抗原性,这为禽Pm Omp A在免疫防御研究中的应用奠定了基础. 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白A 原核表达 免疫印迹
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间接ELISA检测禽多杀性巴氏杆菌抗体中包被抗原的选择 被引量：4
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作者 龚建森 施祖灏 +3 位作者 单艳菊 陆俊贤 葛庆联 刘学贤 《吉林畜牧兽医》 2008年第1期10-12,共3页
间接ELISA已在抗体检测中广泛应用,而抗原包被作为间接ELISA中必不可少的一步可直接影响试验的准确性。本试验分别使用超声波裂解抗原、脂多糖蛋白抗原和全菌抗原作为包被抗原,建立相应的检测方法并进行重复性试验。试验证明全菌抗原建... 间接ELISA已在抗体检测中广泛应用,而抗原包被作为间接ELISA中必不可少的一步可直接影响试验的准确性。本试验分别使用超声波裂解抗原、脂多糖蛋白抗原和全菌抗原作为包被抗原,建立相应的检测方法并进行重复性试验。试验证明全菌抗原建立的禽多杀性巴氏杆菌ELISA检测方法在敏感度、特异性、稳定性方面均优于其他两种抗原。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 包被抗原 ELISA
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9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌体外抗菌活性研究 被引量：2
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作者 张旭 王大菊 《中国兽药杂志》 2005年第8期11-13,共3页
采用试管二倍稀释法,测定了9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性(MIC和MBC)。结果表明氨苄西林、阿莫西林和诺氟沙星对禽多杀性巴氏杆菌的MIC均为0.125μg/mL,诺氟沙星MBC为0.5μg/mL,氨苄西林和阿莫西林的MBC都为1.0μg/mL。... 采用试管二倍稀释法,测定了9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性(MIC和MBC)。结果表明氨苄西林、阿莫西林和诺氟沙星对禽多杀性巴氏杆菌的MIC均为0.125μg/mL,诺氟沙星MBC为0.5μg/mL,氨苄西林和阿莫西林的MBC都为1.0μg/mL。氟苯尼考、替米考星和卡那霉素对禽多杀性巴氏杆菌的MIC分别为0.5、2和2μg/mL。 展开更多
关键词 抗菌药物 禽多杀性巴氏杆菌 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
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