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2株重组禽传染性支气管炎病毒的分离鉴定及基因组序列分析
1
作者 李峰 谢宾 张帅 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3958-3969,共12页
【目的】了解禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的遗传变异情况。【方法】采集山东地区部分养殖场中疑似IBV感染鸡病料组织,接种SPF鸡胚进行病毒分离鉴定,利用二代测序技术进行全基因组测序鉴定,并基于全基因组序... 【目的】了解禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的遗传变异情况。【方法】采集山东地区部分养殖场中疑似IBV感染鸡病料组织,接种SPF鸡胚进行病毒分离鉴定,利用二代测序技术进行全基因组测序鉴定,并基于全基因组序列进行遗传进化和关键氨基酸位点分析。【结果】感染鸡剖检可见气管环出血,管腔内有黄色或黑黄色栓塞物等。从病料中共分离获得2株IBV,分别命名为SDJN和SDLY。相似性分析结果显示,分离株SDJN和SDLY与GⅠ-19基因型参考毒株相似性较高,核苷酸序列相似性为96.0%~97.3%,氨基酸序列相似性为94.9%~100%。氨基酸序列分析结果显示,2株IBV分离株与其他毒株相比存在多个氨基酸变异位点。系统进化树结果显示,分离株SDJN和SDLY与IBV GⅠ-19基因型参考毒株位于同一分支。重组分析结果显示,分离株SDJN和SDLY为多种基因型毒株的重组毒株,均以ck/CH/LDL/091022株为主要亲本毒株。【结论】本研究从山东地区分离得到2株IBV,2株分离株与GⅠ-19基因型毒株密切相关,是一种新型重组IBV毒株。研究结果为进一步研究IBV流行与进化及禽传染性支气管炎的防控奠定基础。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 分离 鉴定 全基因组 遗传进化分析
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Viperin通过胆固醇影响禽传染性支气管炎病毒复制
2
作者 任丽娜 张愉 +4 位作者 张桃妮 卢彦澎 张冰莎 黄鉴妮 磨美兰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期9-19,共11页
Viperin是一种干扰素诱导因子,具有广泛的抗病毒作用。为探究Viperin是否通过胆固醇发挥抗禽传染性支气管炎病毒(IBV)的作用,本试验通过消耗或添加细胞膜胆固醇,分析胆固醇对IBV复制的影响;并分别在细胞中过表达和干扰表达Viperin,评估V... Viperin是一种干扰素诱导因子,具有广泛的抗病毒作用。为探究Viperin是否通过胆固醇发挥抗禽传染性支气管炎病毒(IBV)的作用,本试验通过消耗或添加细胞膜胆固醇,分析胆固醇对IBV复制的影响;并分别在细胞中过表达和干扰表达Viperin,评估Viperin对细胞胆固醇含量和IBV复制的影响,并分析Viperin、胆固醇含量和IBV复制三者之间的关系。结果显示,在IBV感染后48 h,与IBV感染组相比较,使用5.0和10.0 mmol/L甲基-β-环糊精(MβCD)消耗细胞膜胆固醇后IBV复制被极显著抑制(P<0.001),添加5.0 mg/mL外源性胆固醇后IBV复制被极显著促进(P<0.001),消耗细胞膜胆固醇后再添加外源性胆固醇,IBV复制被抑制后恢复至接近正常水平(P>0.05);在IBV感染后24和48 h,与IBV感染组相比较,过表达Viperin可极显著降低细胞中胆固醇含量(P<0.001),并极显著抑制IBV复制(P<0.001);在IBV感染后6和48 h,与IBV感染组相比较,干扰表达Viperin可显著提高细胞中胆固醇含量(P<0.05或P<0.001);在IBV感染后24 h,与IBV感染组相比较,干扰表达Viperin可极显著促进IBV复制(P<0.001);在IBV感染后48 h,与IBV感染组相比较,过表达Viperin后再添加外源性胆固醇可恢复IBV复制(P>0.05)。结果表明,细胞膜中胆固醇水平与IBV复制密切相关,且Viperin可通过调节细胞胆固醇抑制IBV复制。本试验为寻找IBV新的抗病毒靶点提供理论依据和新思路。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 Viperin 胆固醇
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新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR鉴别检测方法的建立与应用 被引量：1
3
作者 连聪 向国庆 +9 位作者 潘浩华 罗胜军 吕殿红 宋帅 贾春玲 牛瑞辉 郭素茵 李汝洪 邹永基 温肖会 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期48-53,共6页
新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性... 新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性支气管炎病毒(IBV)1a基因和禽流感病毒(AIV)NP基因,经分析选取保守序列设计了三套引物与探针,通过优化检测方法的反应体系,成功建立了可同时检测NDV、IBV和AIV的三重RT-qPCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行了评估。结果表明,该方法能够特异性检测出NDV、IBV和AIV,有较好的特异性;方法对三种病毒的最低检测限均为3.02×10^(2)copies/μL,有较高的敏感性;重复性实验结果显示批内与批间变异系数均不大于1.28%,有良好的重复性。使用本研究建立的方法对102份临床咽拭子进行检测,并与常规RT-PCR进行比较,总符合率为96.6%。本研究建立的三重RT-qPCR检测方法,特异性强,灵敏度高,可用于NDV、IBV、AIV三种病毒的检测。 展开更多
关键词 新城疫病毒 禽传染性支气管炎病毒 禽流感病毒 荧光RT-PCR
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抗鸡传染性支气管炎病毒中药的筛选 被引量：5
4
作者 李俊贤 任涛 +3 位作者 杨剑 郭杨 文安林 欧德渊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1241-1249,共9页
【目的】对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行抗病毒中药的筛选,并验证其治疗效果,为临床用药提供一定参考。【方法】采用鸡胚培养法,通过预防和治疗2个角度对24味单一中药、6种市售复方中药进行抗IBV的有效... 【目的】对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行抗病毒中药的筛选,并验证其治疗效果,为临床用药提供一定参考。【方法】采用鸡胚培养法,通过预防和治疗2个角度对24味单一中药、6种市售复方中药进行抗IBV的有效成分或方剂筛选试验,即在SPF鸡胚中先注射中药2 h后再接种病毒和先接种病毒2 h后再注射中药。使用SPSS 20.0软件对鸡胚重量进行方差分析,利用实时荧光定量PCR法辅助判定治疗效果。【结果】对鸡胚净重进行方差分析显示,桔梗组与阳性对照组差异显著(P<0.05),与阴性对照组差异不显著(P>0.05),表明预防和治疗均有效果。实时荧光定量PCR检测鸡胚尿囊液病毒滴度结果显示,桔梗、鱼腥草、宣肺败毒方、绞股蓝、蒲公英、甘草对IBV增殖均有抑制作用,其中桔梗抑制效果最佳。【结论】桔梗对IBV有显著的预防及抑制效果,结果为深入研究桔梗作用机理提供了依据。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒(ibv) 鸡胚 中药 筛选
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三株鸡传染性支气管炎病毒优势流行毒株全基因组分析及其致病性 被引量：1
5
作者 熊挺 何献铭 +6 位作者 赵希雅 庄婷婷 黄美珍 梁世金 余传照 梁雪静 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2109-2122,共14页
为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S... 为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S1全长核苷酸序列进行遗传演化分析,从中挑选了MH20、KC和JS96 3株优势基因型毒株进行全基因组测序分析,然后选取毒力较强的JS96毒株进行了SPF鸡致病性试验。结果表明:遗传演化分析结果显示GI-19是我国主要流行毒株,占比约53.57%,同时变异毒不断涌现,GVI(新基因型)明显的流行增多。3株优势基因型分离毒株的全长基因组与QX-like毒株相似性最高,达到97%以上,但与国内外疫苗株、经典毒株的相似性低,仅为77%左右。抗原表位分析同样表明了分离株与疫苗毒株、经典毒株的B细胞抗原表位数量和序列都存在差异。3株分离毒株均可导致SPF鸡胚矮化和致死,其中JS96对1日龄SPF鸡的致病率高于15日龄SPF鸡,1日龄SPF鸡100%死亡率,15日龄SPF鸡出现生长显著迟缓和个别鸡症状明显,发病鸡剖检均可见“花斑肾”。本研究表明,QX-like基因型IBV毒株是现下IBV的主要流行毒株,对低日龄鸡致病性强,易发生基因重组,与疫苗毒株、经典毒株S蛋白相似性低,适配性较差,急需选择合适疫苗及研发新型疫苗,才能控制当下IBV疫病流行,减少养禽业的损失。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 基因测序 演化与相似性分析 致病性
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2021年华东地区鸡传染性支气管炎病毒分离、鉴定及S1基因遗传特征分析
6
作者 蓝胜芝 侯博 +1 位作者 邵国青 王晨燕 《中国动物传染病学报》 北大核心 2024年第6期169-175,共7页
本研究在2021年从华东地区肉鸡或蛋鸡群中采集了187份具有呼吸道症状的患病鸡气管、肺脏和肾脏混合样本,通过鸡胚分离、RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出IBV,并对其S1基因测序,通过构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示:187份临... 本研究在2021年从华东地区肉鸡或蛋鸡群中采集了187份具有呼吸道症状的患病鸡气管、肺脏和肾脏混合样本,通过鸡胚分离、RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出IBV,并对其S1基因测序,通过构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示:187份临床病料中检测出79份阳性样品,将其接种SPF鸡胚共分离鉴定出39株IBV,S1进化树分析结果表明主要流行的基因型为GⅠ-19、GⅠ-13、tl/CH/LDT3/03型和GⅥ,其中GⅠ-19为优势基因型,其次是GⅠ-13。本研究初步明确了华东地区2021年IBV分离株的遗传进化特点,对IBV临床防控具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒(ibv) 分离 S1基因 进化树分析
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一步法多重RT—PCR检测新城疫、禽流感、传染性支气管炎病毒试验的研究 被引量：11
7
作者 赵建梅 魏荣 +3 位作者 王志亮 孟良玉 郑东霞 赵云玲 《中国动物检疫》 CAS 2003年第1期22-24,共3页
为了提高检测鸡肉中新城疫病毒 (Newcastlediseasevirus,NDV)、禽流感病毒 (Avianinfluenzavirus,AIV)、传染性支气管炎病毒 (Avianinfectiousbronchitisvirus,IBV)的效率和敏感性 ,利用引物设计软件PrimerPrimer5.0设计了NDV的F基因片... 为了提高检测鸡肉中新城疫病毒 (Newcastlediseasevirus,NDV)、禽流感病毒 (Avianinfluenzavirus,AIV)、传染性支气管炎病毒 (Avianinfectiousbronchitisvirus,IBV)的效率和敏感性 ,利用引物设计软件PrimerPrimer5.0设计了NDV的F基因片段、AIV的M基因片段、IBV的M基因片段的引物。在以前一步法RT—PCR扩增各种病毒RNA的基础上 ,进行了两种病毒和三种病毒的一步法多重RT—PCR的试验。结果确定了两种病毒的一步法多重RT—PCR的试验条件 ,三种病毒的一步法多重RT—PCR的试验条件基本确立。本试验初步建立了检测NDV、AIV。 展开更多
关键词 传染性支气管炎 病毒 新城疫 禽流感 一步法多重RT-PCR NDV AIV ibv 病原检测 鸡
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禽传染性支气管炎病毒SAIBk株全基因组的分段克隆、测序及分析 被引量：4
8
作者 周生 王红宁 +2 位作者 唐梦君 黄勇 柳萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期72-77,共6页
根据GenBank上公布的IBV基因组序列，经多重比较后设计19对引物，用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒致肾病变型分离株SAIBk株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定。测序结果表明：SAIBk株基因组序列全长27520 bp，A＋T的含量占6... 根据GenBank上公布的IBV基因组序列，经多重比较后设计19对引物，用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒致肾病变型分离株SAIBk株的全基因组进行了分段扩增、克隆和序列测定。测序结果表明：SAIBk株基因组序列全长27520 bp，A＋T的含量占61．74％，具有典型的冠状病毒基因组结构。基因组内碱基的插入和缺失主要分布在3 220-3470位、20560-20810位、25310-25600位和27150—27220位。与GenBank上公布的5株IBV基因组序列Beaudette、Mass41、Ca199、BJ、KQ6的同源率分别为87．2％、87．6％、87．2％、85．6％和87．5％。SAIBk株基因组不同区域的同源性分析结果表明，3＇UTR和5＇UTR是基因组中最为保守的区域，同源率在90．9％～97．7％，而S1基因是基因组中变异最大的区域，同源率在74．8％～83．2％。系统进化分析结果表明SAIBk株与国内分离株S14、LX4、BJ的亲缘关系较近。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 致肾病变型 基因组 序列分析
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我国禽传染性支气管炎病毒分子流行病学研究进展 被引量：6
9
作者 高明燕 姜逸 +4 位作者 程旭 俞燕 范建华 贾雪波 孟闯 《中国家禽》 北大核心 2023年第12期87-94,共8页
禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infec-tiousbronchitisvirus,IBV)引起的雏鸡和成年鸡呼吸系统以及泌尿生殖道组织损伤和病变的急性、高度接触性疾病。虽然临床上广泛使用疫苗免疫防控该病,但由于... 禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infec-tiousbronchitisvirus,IBV)引起的雏鸡和成年鸡呼吸系统以及泌尿生殖道组织损伤和病变的急性、高度接触性疾病。虽然临床上广泛使用疫苗免疫防控该病,但由于IBV基因组存在频繁的变异和重组,导致新基因型和血清型不断出现,从而造成我国鸡IB未能得到有效控制。文章详细介绍了基于IBVS1基因系统发育学建立的分型方法以及我国流行的IBV4个基因型、18个分支的来源、传播和流行现状,为IB防控和疫苗研发提供参考。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 分子流行病学 S1基因序列系统发育学分析 基因重组
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传染性支气管炎病毒(IBV)小囊膜蛋白基因的原核表达 被引量：4
10
作者 张芳 曾祥伟 +3 位作者 明晓波 魏萍 祝玉卿 王琳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期99-103,共5页
以传染性支气管炎病毒(IBV)M41毒株为材料,克隆该毒株的小囊膜蛋白(E)基因,并将其连接到表达载体pGEX-6P-1中,转化到大肠杆菌BL21中。经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶(GST,大小约为26ku)融合后大小约为38ku,表明... 以传染性支气管炎病毒(IBV)M41毒株为材料,克隆该毒株的小囊膜蛋白(E)基因,并将其连接到表达载体pGEX-6P-1中,转化到大肠杆菌BL21中。经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶(GST,大小约为26ku)融合后大小约为38ku,表明目的蛋白相对分子质量约为12.4。这一结论为E蛋白的进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒(ibv) 小囊膜蛋白(E) 蛋白表达
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禽传染性支气管炎病毒免疫原基因的PCR获取及其酶切鉴定 被引量：4
11
作者 王林川 辛朝安 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期85-88,共4页
介绍用ＲＴ－ＰＣＲ（反转录－聚合酶链反应）获取禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株和广东地方致弱株Ｄ４１免疫原（Ｓ１）基因的详细方法，所用引物为ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｅ株Ｓ１基因两侧的对应序列，跨幅为１．７ｋｂ。结果... 介绍用ＲＴ－ＰＣＲ（反转录－聚合酶链反应）获取禽传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株和广东地方致弱株Ｄ４１免疫原（Ｓ１）基因的详细方法，所用引物为ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｅ株Ｓ１基因两侧的对应序列，跨幅为１．７ｋｂ。结果表明，两株病毒所获的ＰＣＲ产物与预期的一致；用此对引物，以ＩＢＶＤ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物为模板，扩增出一样的ＤＮＡ片段。试验还显示，国内外几家公司有关ＲＴ和ＰＣＲ的分子生物学试剂可以兼用，适用于国内的有关研究；ＰＣＲ仪则以进口的或水浴锅式的为佳。对ＩＢＶＭ４１株Ｓ１基因的ＲＴ－ＰＣＲ产物进行ＨａｅⅢ酶切图谱分析。 展开更多
关键词 禽病 传染性支气管炎 病毒 免疫 PCR 酶切分析
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禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建 被引量：2
12
作者 吴建祥 周继勇 +2 位作者 程丽琴 沈行燕 丁红梅 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期293-296,共4页
:以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及... :以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及酶切鉴定表明 。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 S1基因 植物表达载体 质粒PBS 酚切鉴定 三亲交配 定向克隆
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禽传染性支气管炎病毒分离株理化特性的研究 被引量：3
13
作者 杨帆 孙翔 +1 位作者 邓保国 何群力 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第23期9976-9976,10018,共2页
[目的]探讨禽传染性支气管炎病毒河南分离株IBV-HN05对各种理化因素的敏感性。[方法]IBV-HN05经过热、酸碱、胰蛋白酶、乙醚、氯仿、甲醛等理化因素处理后接种10日龄非免疫鸡胚,以EID50或鸡胚矮化为判断指标,确定各种理化因素对IBV-HN0... [目的]探讨禽传染性支气管炎病毒河南分离株IBV-HN05对各种理化因素的敏感性。[方法]IBV-HN05经过热、酸碱、胰蛋白酶、乙醚、氯仿、甲醛等理化因素处理后接种10日龄非免疫鸡胚,以EID50或鸡胚矮化为判断指标,确定各种理化因素对IBV-HN05的敏感性。[结果]IBV-HN05在56℃温度条件下45 min可被灭活,耐酸碱,pH值2.5和10.5的环境能存活3 h,对浓度1%胰蛋白酶有一定的耐受性,浓度20%乙醚作用24 h能部分被灭活,浓度5%氯仿和浓度1%甲醛作用30 min即可灭活该病毒。[结论]IBV的理化特性因毒株的不同而异。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 理化特性 研究
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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达 被引量：1
14
作者 贺会利 徐敏 +4 位作者 余娟 魏小兵 闫艺婷 勾肖晶 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第9期15-20,共6页
本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的核衣壳蛋白(N)。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEMT-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ... 本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的核衣壳蛋白(N)。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEMT-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ进行双酶切,将酶切后的N基因片段克隆到表达载体pGEX-6P-1,转入大肠杆菌BL21(DE3)菌中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳,结果显示外源基因获得了表达且为可溶性蛋白;Western blotting检测结果显示N蛋白可与相应的IBV ZZ2004阳性血清发生特异性反应,结果表明N蛋白有一定的生物活性。本研究为IBV诊断试剂盒及新型IBV重组亚单位疫苗研制奠定基础。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒(ibv) 核衣壳蛋白 克隆 可溶性表达
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禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合基因的构建和原核表达
15
作者 田浪 王红宁 +5 位作者 高荣 张安云 鲁丹 张云飞 王霆 康润敏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期22-24,共3页
关键词 禽传染性支气管炎病毒 鸡传染性支气管炎病毒 原核表达 嵌合基因 多表位 接触性传染病 冠状病毒感染 经济损失
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禽传染性支气管炎病毒免疫原基因cDNA的构建与鉴定
16
作者 王林川 刘福安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期136-141,共6页
以ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧２１个碱基的对应序列来合成引物，并在两引物Ｏｌｉｇｏ５、Ｏｌｉｇｏ３的５端分别加有ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切位点，对ＩＢＶ标准毒株Ｍ４１、广东地方肾病变型致弱株Ｄ４１作Ｒ... 以ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧２１个碱基的对应序列来合成引物，并在两引物Ｏｌｉｇｏ５、Ｏｌｉｇｏ３的５端分别加有ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切位点，对ＩＢＶ标准毒株Ｍ４１、广东地方肾病变型致弱株Ｄ４１作ＲＴ－ＰＣＲ（反转录－聚合酶链反应），得到了１７２０ｂｐ预计大小的ＤＮＡ片段，又经Ｍ４１株ＰＣＲ产物的ＨａｅⅢ酶切分析，表明此ＤＮＡ片段即为ＩＢＶＳ１基因片段；并用此对引物，以Ｏ１ｉｇｏ３作限制性引物（终浓度０．８ｎｇ／μｌ），两引物浓度比例为１∶１０时，得到Ｄ４１株Ｓ１基因不对称ＰＣＲ的单、双链产物；对广东肾变病鸡中分离致弱的ＩＢＶＤ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物的ＨａｅⅢ酶切分析，发现其与Ｍ４１株的相同，与美国标准肾变株Ｇｒａｙ、Ｈｏｌｔｅ不同，根据国外同类研究制定的判定标准，Ｄ４１株应归属为马萨诸塞血清型，并由此证明华南地区流行的ＩＢＶ毒株已有变异；将Ｄ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物插入质粒ｐＵＣ１８，得到两株重组质粒转化菌，以重组质粒ＤＮＡ作模板，用ｆｍｏｌＴＭ测序系统得出Ｄ４１株Ｓ１基因５一端的１６７个碱基序列，其与Ｂｅａｕｄｅｔｅ株的同源性为７４．２５％，与Ｍ４１株的同源性为７１．２６％，对应? 展开更多
关键词 禽 传染性支气管炎 病毒 免疫 基因 CDNA 疫苗
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禽传染性支气管炎病毒地方株N基因的克隆及序列分析
17
作者 周生 王红宁 +2 位作者 唐梦君 黄勇 柳萍 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期15-17,共3页
关键词 禽传染性支气管炎病毒 N基因 序列分析 地方株 分子流行病学 重大传染病 克隆 继发感染
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羊驼禽传染性支气管炎样病毒的分子流行病学分析
18
作者 张俊珍 董常生 范瑞文 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期14-15,共2页
关键词 禽传染性支气管炎病毒 冠状病毒科 流行病学分析 分子 羊驼 接触性传染病 mRNA 结构蛋白
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鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)免疫学特性的研究
19
作者 孙建和 陆苹 《动物科学与动物医学》 2002年第10期32-34,共3页
为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒 (IBV)免疫学特性 ,为生产上防治该病服务 ,应用 SDS- PAGE分析了 IBV的结构蛋白 ,发现肾型 IBV- X株与 M4 1和 H5 2的蛋白电泳图谱存在一定的相似性 ,均具有分子量为 90 0 0 0、84 0 0 0、6 70 0 0和 ... 为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒 (IBV)免疫学特性 ,为生产上防治该病服务 ,应用 SDS- PAGE分析了 IBV的结构蛋白 ,发现肾型 IBV- X株与 M4 1和 H5 2的蛋白电泳图谱存在一定的相似性 ,均具有分子量为 90 0 0 0、84 0 0 0、6 70 0 0和 4 30 0 0的蛋白带 ,但 X株病毒还具有一条分子量为 6 10 0 0的条带 ,而且它的相对含量很高。肾型传支上海野毒 S株与 X株相似 ,也具有这条 6 10 0 0的条带 ,应用抗 IBV- X血清进行免疫转印 ,显示分子量 6 10 0 0的结构蛋白具有较强的免疫反应性。为了进一步揭示肾型 IBV诱导免疫保护的特性 ,应用 IBV- X毒株接种 10日龄鸡胚尿囊腔 ,收集尿囊液 ,灭活后 ,制成油乳剂灭活苗免疫鸡 ,30 d后 ,对 IBV- S毒株攻击的保护率达 10 0 % ,并呈现良好的体液免疫应答 ;疫苗在 4℃保存 7个月后用来免疫鸡 ,其保护率达95 %。该疫苗安全、可靠 。 展开更多
关键词 鸡 肾型传染性支气管炎病毒 ibv 免疫学特性
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中国禽传染性支气管炎病毒的遗传演化及时空传播分析 被引量：3
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作者 范文胜 刘思伽 +7 位作者 邱深本 黄爱芳 王艳 刘敏芳 梅敏敏 陈新亮 韦平 磨美兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2543-2554,共12页
对从GenBank数据库下载的所有传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)中国分离株之N基因序列进行分析,旨在探索其遗传变异规律和时空传播情况。通过生物信息学软件MEGA 6.0、RDP 4.95、SimPlot 3.5.1、BEAST v1.10.4、jmo... 对从GenBank数据库下载的所有传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)中国分离株之N基因序列进行分析,旨在探索其遗传变异规律和时空传播情况。通过生物信息学软件MEGA 6.0、RDP 4.95、SimPlot 3.5.1、BEAST v1.10.4、jmodeltest 2.1.7、Tracer v1.7.1、TempEst v1.5.1、FigTree v1.4.3以及SpreaD3 v0.9.7等对分离株分别进行系统进化树、基因重组、毒株溯源、种群动态和时空传播分析。系统进化树分析显示,国内IBV毒株分为6种基因型,以LX4型为主;重组分析发现,1株四川分离株N基因存在重组现象;贝叶斯最大分支置信树分析显示,中国IBV最可能起源于20世纪30年代初的辽宁省。贝叶斯谱系地理学分析显示,IBV毒株在国内存在多条传播路径并形成了3个流行中心:东北地区(黑龙江、辽宁和吉林)、华北和华东地区(河北、山东和江苏)以及华南地区(广东、广西),其中,山东最可能成为IBV的毒株来源库。本研究揭示了中国IBV的起源及其传播途径,N基因存在基因重组现象,提示有必要加强分离株N基因的分析,持续开展系统的分子流行病学研究。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 遗传变异 基因重组 起源 时空传播
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